Роль тироксина и гидрокортизона в регуляции перекисного окисления липидов в головном мозге крыс

• Автор: Галкина, Ольга Вячеславовна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 167 с.

СОДЕРЖАНИЕ.

Список сокращений.

Раздел 1. Введение

Раздел 2. Обзор литературы.

2.1. Современные представления о свободнорадикальном окислении

и антиоксидантной защите

2.1.1. Свободнорадикальные реакции и образование активных форм кислорода

2.1.2. Перекисное окисление липидов и его стадии

2.1.3. Продукты перекисного окисления липидов.

2.1.4. Значение свободнорадикальных процессов

2.1.5. Антиоксидантная система организма

2.1.5.1. Ферментативные антиоксиданты
2.1.5.2. Неферментативные антиоксиданты
2.2. Особенности ПОЛ в центральной нервной системе
2.3. Участие гормонов в регуляции свободнорадикального окисления липидов
2.3.1. Строение и механизм действия тиреоидных гормонов.
2.3.2. Строение и механизм действия стероидных гормонов.
2.3.3. Влияние тиреоидных и стероидных гормонов на процесс свободнорадикального окисления липидов.
Раздел 3. Методы исследования.
3.1. Постановка опытов.
3.2. Методы.
3.2.1. Метод выделения митохондриальной фракции из печени крыс
3.2.2. Метод выделения субклеточных фракций из коры головного
мозга крыс.
3.2.3. Метод выделения липидов из тканей и субклеточных фракций
3.2.4. Метод разделения липидов на фракции.
3.2.5. Метод определения содержания фосфолипидов.
3.2.6. Метод определения содержания холестерина.
3.2.7. Методы определения продуктов ПОЛ.
3.2.7.1. Определение диеновых и триеновых конъюгатов
3.2.7.2. Определение оснований Шиффа
3.2.7.3. ТБКтест.
3.2.8. Метод хемилюминесценции
3.2.8.1. Люминолзависимая перекисная хемилюминесценция
3.2.8.2. Хемилюминесценция рибофлавина
3.2.9. Метод определения содержания восстановленного глутатиона
3.2 Метод определения активности глутатионредуктазы.
3.2 Метод определения акгивносити супероксиддисмутазы.
3.3. Статистическая обработка результатов.
Собственные исследования.
Раздел 4. Исследование динамики ПОЛ и содержания основных классов липидов в нервной ткани и печени в норме
4.1. Постановка опытов
4.2. Содержание продуктов, характеризующих интенсивность ПОЛ в исследованных тканях.
4.3. Содержание основных классов липидов в исследованных тканях
4.4. Состояние некоторых компонентов антиоксидантной системы в исследованных тканях.
4.5. Обсуждение результатов.
Раздел 5. Влияние гормонов на интенсивность ПОЛ и липидный состав
коры головного мозга и печени крыс.
5.1. Влияние гипертиреоза на интенсивность ПОЛ и липидный состав коры
головного мозга и печени крыс
5.1.1. Постановка опытов.
5.1.2. Влияние гипертиреоза на содержание продуктов, характеризующих интенсивность ПОЛ исследованных тканей.
5.1.3. Влияние гипертиреоза на липидный состав исследованных тканей.
5.1.4. Влияние гипертиреоза на компоненты антиоксидантной системы
головного мозга.
5.1.5. Влияние тироксина на развитие ПОЛ в гомогенатах коры головного мозга крыс i vi
5.1.6. Изучение антиоксидантных свойств изомеров тироксина с помощью метода хемилюминесценции.
5.1.7. Обсуждение результатов.
5.2. Влияние гидрокортизона на интенсивность ПОЛ и липидный состав
коры головного мозга и печени крыс
5.2.1. Постановка опытов
5.2.2. Содержание продуктов, характеризующих интенсивность ПОЛ, в субклеточных фракциях больших полушарий головного мозга и печени крыс через 2 часа после однократного введения гидрокортизона.
5.2.3. Влияние блокады ТАКС на содержание продуктов, характеризующих интенсивность ПОЛ, и на липидный состав коры головного мозга и печени крыс.
5.2.4. Обсуждение результатов.
Раздел 6. Заключение
7. Выводы.
8. Список литературы
Список сокращений.
АКТТ адренокортикотропный гормон.
АО антиоксиданты
АОА антиоксидантная активность
АОС антиоксидантная система
АРА антирадикальная активность
АФК активные формы кислорода
ТАКС гипофизарноадренокортикальная система
ГП глутатионпероксидаза
ГР глутатионредуктаза
ГТ глутатионтрансфераза
Г8Н восстановленный глутатион
ГЭЭГ окисленный глутатион
ДК диеновый конъюгат
КС кортикостероиды
МДА малоновый диальдегид
ОШ основания Шиффа
ПНЖК полиненасыщенные жирные кислоты
ПОЛ перекисное окисление липидов
СГ стероидные гормоны
СМ сфингомиелин
СОД су пероксид дисмутаза
СРО свободнорадикальное окисление
Тзтрийодтиронин
Т4 тироксин
ТБК тиобарбитуровая кислота
ТБКАП ТБКактивные продукты
ТГ тиреоидные гормоны
ТК триеновые конъюгаты
ФЛ фосфолипиды
ФТХ фосфатидилхолин
ФЭА фосфатидилэтаноламин
X холестерин
ХЛ хемилюминесценция
ЭПР электронный парамагнитный резонанс
свободные радикалы липидов
Ш липиды
ЮОН гидроперекиси липидов супероксиданион радикал 2 синглетный кислород ОН гидроксильный радикал 0 радикал оксида азота ОГЮО пероксинитрит Ч свободный радикал
Раздел 1. ВВЕДЕНИЕ.
Актуальность


Развитие цепных процессов происходит неферментативно при взаимодействии этих радикалов с кислородом, который выступает акцептором электронов. Скорость взаимодействия Ог с выше, чем И с Ч, так как кислород более подвижен и находится во всех клеточных структурах Журавлев, . Следует отметить, что в норме, количество таких радикалов, образующихся в организме за время жизни, например под действием фоновой радиации, незначительно Прайор, . Кроме того, в клетках в ходе различных биохимических реакций постоянно происходит образование так называемых активных форм кислорода АФК, по существу являющихся свободными радикалами. О2, гидроксильный радикал ОН, синглетный кислород 2, перекись водорода Н2, а также гипогалоиды и оксид азота , . В основе появления АФК лежит неполное восстановление кислорода. Как известно, в клетках существует два пути использования оксидазный и оксигеназный Каган и др. Меерсон, . Оксидазный путь связан с четырехэлектронным восстановлением кислорода до воды примером его служат процессы окисления энергетических субстратов в митохондриях, где восстановление катализируется в конечном итоге цитохромоксидазой. При оксигеназном пути не происходит полного восстановления , а имеет место одно, двух или трехэлектронное восстановление. Присоединение одного электрона ведет к образованию . В результате двухэлектронного восстановления образуется Н2. С присоединением к молекуле кислорода трех электронов происходит разрыв связи и образуется вода и реакционная частица О, которая, как правило, встраивается в субстрат. В ходе такой реакции возможно также, что один атом кислорода встраивается в субстрат, а другой образует АФК например, 0 при окислении аргинина синтазой, ЮН при окислении арахидоновой кислоты липоксигеназой и др. Биленко, , Зенков и ДР. Перенос электронов на молекулу кислорода в оксидазных реакциях осуществляется с помощью ферментов, в активные центры которых входят металлы переменной валентности или флавопротеины. К ферментам, продуцирующим относятся ксантиноксидаза реакция окисления гипоксантина в ксантин, триптофандиоксигеназа превращение триптофана в формилкинуренин, НАДФНоксидазы фагоцитирующих клеток, НАДФНцитохром0зависимая редуктаза электронтранспортной цепи микросом, альдегидооксидаза, уратоксидаза и другие Лукьянова и др. Супероксиданионрадикал является промежуточным продуктом и других биохимических реакций он образуется в ходе окисления тиолов, флавинов, катехоламинов, при переходе оксигемоглобина в метгемоглобин , , , , , iv, . Дело в том, что четырехэлектронное восстановление до воды возможно лишь при бесперебойной работе всех переносчиков дыхательной цепи. При различных нарушениях нормального функционирования переносчиков их восстановление может приводить к частичному восстановлению кислорода, растворенного в липидном матриксе, то есть к утечке электронов. Наиболее вероятным местом утечки в дыхательной цепи митохондрий служит коэнзим Кольтовер, , i е. Биленко, , Владимиров и др. В отличие от перекись водорода и гипогалоиды не являются свободными радикалами, но их цитотоксическое действие обусловлено тем, что они могут быть источниками радикалов, в том числе гидроксильного. Образование гилогалоидов I, , , I происходит в фагоцитирующих клетках крови в реакции взаимодействия Н2 с галогенами при участии миелопероксидазы НСЮ и пероксидазы эозинофилов , I. Гипогалоиды являются сильными окислителями, а в присутствии ионов способны давать ОН и 2 Зенков и др. Появление перекиси водорода в организме связано с образованием основные источники ксантиноксидазная реакция, митохондриальная и микросомальная цепи транспорта электронов являются также источниками Н2 Лукьянова и др. Перекись водорода может образовываться в реакции дисмутации , катализируемой супероксиддисмутазой i, , а также при окислении холестерина холесгеринооксидазой Каган и др. Н2 ОН ЮН реакция ХабераВейса. Гидроксильный радикал возникает также в реакциях окисления арахидоновой кислоты, при микросомальном окислении, фотолизе воды Зенков и др. Н2 2 н ОН ЮН 3.