Окислительная модификация белков плазмы крови при гипотермии и на фоне введения даларгина

• Автор: Исмаилова, Жамила Грамидиновна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Махачкала
• Количество страниц: 137 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Активные формы кислорода и механизмы окислительной модификации белков

1.2. Интенсификация свободнорадикального окисления при низких температурах тела и его химическая коррекция

ГЛАВА Н. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1. Обоснование выбора объекта исследования

2.2. Постановка экспериментов.

2.2.1. Искусственное охлаждение животных

2.3. Методика инъекций животным.

2.4. Препаративные методы исследования

2.4.1. Получение плазмы и сыворотки крови.
2.4.2. Получение гемолизатов
2.5. Биохимические методы исследования.
2.5.1. Определение окислительной модификации белков в плазме крови
2.5.2. Определение содержания среднемолекулярных пептидов
в плазме крови
2.5.3. Определение активности супсроксиддисмутазы в эриротроцигах.
2.5.4. Определение активности каталазы в эритроцитах
2.5.5. Определение содержания гемоглобина.
2.5.6. Амперометрический метод определения низкомолекулярных и белковых сульфгидрильных групп.
2.5.7. Определение дисульфидных связей в белках и низкомолекулярных соединениях крови
2.5.8. Электрофоретическое разделение белков плазмы
крови.
Статистическая обработка материала
ГЛАВА Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТА И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Интенсивность окислительной модификации белков плазмы крови при гипотермии и на фоне введения
даларгина.
3.2.0кислительновосстановительное состояние тиоловых групп белков и низкомолекулярных соединений плазмы крови при гипотермии и на фоне введения даларгина
3.3. Электрофоретическое разделение белков плазмы
крови при гипотермии и введении даларгина.
3.4. Содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови при гипотермии и на фоне введения даларгина
3.5. Активность СОД при гипотермии и введении
даларгина.
3.6. Активность каталазы при гипотермии и введении даларгина
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


Материалы, полученные при выполнении данной диссертационной работы, используются в учебном процессе, осуществляемом кафедрой биохимии Дагестанского госуниверситета и Махачкалинского филиала Ростовского госуниверситета. Методические элементы работы включены в учебное пособие Практикум по биохимии РостовнаДону, . Апробация работы. ДНЦ РАН Махачкала, , международной конференции Свободнорадикальные процессы экологические, фармакологические и клинические аспекты СанктПетербург, , й международной конференции, посвященной 0летию основателя Сибирского отделения РАН М А. Лаврентьева Новосибирск, , Всероссийской научнопрактической конференции Химия в технологии и медицине Махачкала, , международном научном семинаре вузов СевероКавказского региона Циклы Ставрополь, , 5й и 6й Пущинской конференции молодых ученых Биология наука XXI века Пущино, , . Публикации. По материалам диссертации опубликовано работ. ГЛАВА I. С образованием кислородной атмосферы стало возможным развитие организмов, использующих энергию органических веществ путем их окисления кислородом. Такой путь получения энергии гораздо более эффективен, чем те, которые возможны в отсутствии кислорода и действуют у анаэробных организмов. Таким образом, для высших форм жизни очень важно наличие в атмосфере молекул кислорода, полное четырехвалентное восстановление которого до воды составляет основу биоэнергетики человека и животных Ленинджер, . Однако процессы метаболизма кислорода связаны ещ и с образованием реакционноспособных активных форм кислорода АФК. АФК образуются в результате неполного одно, двух, и трехэлектронного восстановления кислорода в реакциях само и энзиматического окисления молекулярных компонентов клетки Меньшикова, Зенков, . Среди них обнаруживаются синглетные соединения нерадикальной природы синглетный кислород и перекись водорода Н2О2, озон , а также суперокисные , пергидроксильные Н, гидроксильные ОН, алкоксильные , нитрорадикальные 0, гипохлоритные ОС1 радикалы, оксеноидные частицы тина 200 или 3 Меньшикова, Зенков, Дубинина, ivi, , i, . АФК различаются по продолжительности их существования и активности. Наиболее короткоживущими 71Ос и соответственно реакционноспособными являются гидроксильные радикалы, которые могут оказывать сво окислительное действие только в месте их образования. Дубинина, Шугалей, Зенков, Меньшикова, . ОН радикал образуется в реакциях арахидоновой кислоты, в реакциях ГабераВейса, при микросомалыюм окислении, в реакциях с флавиновыми ферментами и . Основным же источником ОН в биологических системах служит реакция Фентона с участием ионов железа Владимиров, Зенков, Меньшикова, ii, . Синглетный кислород менее активен. Концентрация в клетках невелика, не превышает 6 М, что объясняется низким выходом кислорода в синглетном состоянии и малым временем его жизни в биологических субстратах 25 Юс. Тем не менее, синглетный кислород тоже характеризуется высокой реакционной способностью, легко вступает в окислительные реакции с органическими соединениями Арчаков, Мохосоев, Зенков, Меньшикова, . В качестве основного продукта синглетный кислород может образоваться лишь в фотохимических реакциях, связанных с возбуждением пигментов, таких как хлорофилл, ретиналь, флавины, порфирины Арчаков, Мохосоев, . В то же время в качестве побочного продукта он образуется в самопроизвольной некатализируемой реакции дисмутации суперокисных радикалов, реакции разложения Н2, перекисного окисления липидов в микросомах, биосинтезе простагландинов, во многих ферментативных реакциях с участием антиоксидантных ферментов, а так же в реакциях с АФК как сопутствующий продукт Арчаков, Мохосоев, ivi, . Так, в реакции разложения каталазой Н2 около 5, образующегося кислорода возникает в синглетном состоянии Шинкаренко, Алексовский, . Супероксидный анионрадикал является первичным интермедиатом ионнорадикального окисления, сопряженного с образованием активных свободных радикалов ОН, , .