Регуляция дельта-сон индуцирующим пептидом свободнорадикальных процессов в тканях и мембранах эритроцитов крыс при действии холода

• Автор: Шустанова, Татьяна Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 197 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Строение, метаболизм и биологическая роль дельтасон индуцирующего пептида ДСИП

1.2. Действие на теплокровных животных низкой температуры окружающей среды.

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Постановка эксперимента.

2.2. Получение биологического материала

2.2.1. Получение плазмы крови

2.2.2. Приготовление суспензии эритроцитов и гемолизатов

2.2.3. Выделение лимфоцитов и нейтрофилов в градиенте плотности

фиколл верографина.
2.2.4. Приготовление гомогенатов тканей
2.3. Биохимические методы исследования.
2.3.1. Определение содержания диеновых конъюгатов.
2.3.2. Определение содержания шиффовых оснований
2.3.3. Определение содержания общего холестерина
2.3.4. Определение содержания общих липидов.
2.3.5. Определение активности ксантиноксидазы.
2.3.6. Определение активности миелопероксидазы
2.3.7. Определение содержания белка.
2.3.8. Определение активности супероксиддисмугазы.
2.3.9. Определение активности катал азы.
2.3 Определение активности глутатионпероксидазы.
2.3 Определение концентрации восстановленного глугатиона
2.3 Определение активности глутатионредуктазы.
2.3 Определение концентрации гемоглобина
2.3 Определение оксидазной активности церулоплазмина
2.3 Определение содержания молекул средней массы
2.3 Определение концентрации мочевины.
2.3 Определение концентрации мочевой кислоты
2.4. Биофизические методы исследования
2.4.1. Определение эффективности безызлучательного переноса энергии
с остатков триптофана мембранных белков на пирен
2.4.2. Определение относительной микровязкости липидного бислоя
и микровязкости зон белоклипидных контактов мембран
2.4.3. Определение полярности липидной фазы мембран.
2.4.4. Определение поверхностного заряда мембран
2.5. Статистическая обработка результатов исследования
ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Влияние ДСИП на интенсивность липопереокисления в мозге, печени и эритроцитах иптактпых крыс и при действии низкой температуры окружающей среды.
3.2. Влияние ДСИП на состояние прооксидантноантиоксидантного равновесия в тканях и крови иптактпых крыс и при действии низкой температуры окружающей среды.
3.2.1. Влияние ДСИП на активность прооксидантных ферментов в тканях и крови интактных крыс и при действии холода
3.2.1.1. Активность ксантиноксидазы в мозге и печени интактных животных, при действии холода и введении ДСИП.
3.2.1.2. Активность миелопероксидазы в нейтрофилах и моноцитах крови интактных животных, при действии холода и введении ДСИП.
3.2.2. Влияние ДСИП на активность антиоксидантных ферментов в тканях и крови интактных крыс и при действии холода
3.2.2.1. Активность супероксиддисмутазы и каталазы в мозге, печени и эритроцитах интактных животных, при действии холода и
введении ДСИП
3.2.2.2. Активность глугатионпероксидазы, глутатионредуктазы и концентрация восстановленного глугатиона в мозге, печени и эритроцитах интактных животных, при действии холода и введении ДСИП.
3.2.2.3. Оксидазная активность церулоплазмина в плазме крови интактных животных, при действии холода и введении ДСИП.
3.2.3. Влияние ДСИП на содержание неферментативиых антиоксидантов
в тканях и крови интактных крыс и при действии холода
3.2.3.1. Содержание молекул средней массы в плазме крови, печени и мозге
интактных животных, при действии холода и введении ДСИП
3.2.3.2. Концентрация мочевины и мочевой кислоты в мозге, печени и плазме крови интактных животных, при действии холода и
введении ДСИП.
3 2.3.3. Содержание общего холестерина в мозге, печени и эритроцитах
интактных животных, при действии холода и введении ДСИП
3.3. Влияние ДСИП на структурное состояние и поверхностный заряд мембран эритроцитов интактных крыс и при действии низкой
температуры окружающей среды.
3 3.1. Эффективность безызлучательного переноса энергии с остатков
триптофана мембранных белков на пирен и микровязкость зон белоклипидных контактов мембран эритроцитов интактных животных, при действии холода и под влиянием ДСИП в опытах i viv и i vi.
3.3.2. Относительная микровязкость и полярность липидного бислоя мембран эритроцитов интактных животных, при действии холода и под влиянием ДСИП в опытах i viv и i vi.
3.3.3. Поверхностный заряд мембран эритроцитов интактных животных, при действии холода и под влиянием ДСИП в опытах i viv и i vi
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


По биохимическим и физиологическим показателям стресса и адаптации установлено, что ДСИП в дозе мкг0 г при его периферическом введении повышает устойчивость крыс к действию низкой температуры среды 0 4 иС, участвуя в процессах адаптационной перестройки. Важным звеном в механизме антистрессорного действия ДСИП при холодовом стрессе является повышение устойчивости структуры биологических мембран эритроцитарных, лизосомальных, митохондриальных Кричевская и др. Бондаренко и др. При гипокинезии на фоне совместного действия ДСИП и пирацетама также отмечается значительная активация нейромедиаторных процессов Повилайтите, Ускова. Исследован нейромедиаторный механизм адаптивного действия ДСИП при экспериментальной аудиогенной эпилепсии, вызванной гипокинезией Менджернцкий и др , . ДСИП в дозе мкг0 г задерживает наступление генерализованной судорожной активности и способствует нормализации длинноволнового цикла сна у крыс в условиях гипербарооксигенации путм создания оптимального баланса между возбуждающими и ингибирующими аминокислотными нейромедиаторами и стабилизации структуры мембран форменных элементов крови Бондаренко, , iii . Совместное применение ДСИ и пирацетама подавляет ПОЛ в мозге крыс при гипербарооксигенации, повышает активность Са2АТФазы, обеспечивая стабилизацию мембранных структур нейронов, и понижает активность 7 К АТФазы, что связано с повышением активности тормозной системы синаптической передачи Самецкий, , Лысенко и др. Показано адаптогенное влияние ДСИП на морфофункциональные изменения и моноаминергическую систему мозга крыс при гипотермии и самосогрсваниии Павлов, , . Антистрессорный эффект ДСИП в условиях гипоксии реализуется в повышении скорости окислительного фосфорилирования и сопряжнности окисления и фосфорилирования при добавлении пептида к митохондриям Хватова и др. Коплик и др. Введение смеси аминокислот, составляющих молекулу пептида дельтасна, также приводит, но к менее выраженному повышению выживаемости животных в условиях острого экспериментального эмоционального стресса. Показано восстановление ДСИП эмоциональных стрессорных реакций у крыс с разрушенными лимбическими структурами мозга. Предполагают, что компенсация стрессорных эмоциональных реакций определяется не только действием поступившего извне ДСИП на рецепторы мозговых структур, но и сложными интегративными нейрохимическими перестройками, происходящими в мозге после его введения Коплик, Судаков, . На модели эмоционального стресса у крыс показано, что формирование агрессивнооборонительного поведения сопровождается увеличением содержания кортикостерона и снижением уровня ДСИП в плазме крови. Применение ДСИП вызывает снижение агрессивности животных и уменьшение содержания кортикостерона. Центральная регуляция секреции кортикотропина при стрессе осуществляется адреио, серогонино и холинореактивными системами гипоталаморетикулолимбического комплекса. По данным Стейнер с соавт. АКТГ при стрессе, и норадренергический, тормозящий, опосредуемый а адренорецепторами Можно полагать, что в основе антистрессового действия ДСИП на вентромедиальный гипоталамичсский выход лежит его серотонинергический эффект. Подтверждением высказанного положения являются результаты нейрохимических исследований Ашмарин, Доведова. ДСИП на повышение активности МАО А субстрат серотонин. Уменьшением уровня серотонина в центральных регулирующих кортикотропную активность зонах под влиянием ДСИП можно объяснить и снижение уровня кортикостерона при действии этою пептида Малышенко, Елисеев, . Иммуногистохимические исследования срезов гипоталамуса крыс, продемонстрировавшие наличие ДСИП в аркуатном ядре гипоталамуса, срединном возвышении, ножке гипофиза. ДСИП в нейроэндокринной регуляции на гипоталамическом уровне . Под действием ДСИП происходит снижение высвобождения кортикотропинрилизинг гормона, что приводит к уменьшению секреции АКТГ и высвобождения глюкокортикостсроидов корой надпочечников. Однако данный механизм осуществления антистрессорного эффекта ДСИП поставлен под сомнение результатами исследований Юхананов и др. АКТГ под влиянием ДСИП 0,1 мгкг, но зарегистрировавших снижение уровня кортикостерона в крови крыс. Учитывая, что в передней и промежуточной доле гипофиза иммуногистохимически показано наличие ДСИП .