Обнаружение и изучение физикохимических свойств протеолитических ферментов гриба Eremothecum Ashbyii

• Автор: Цветков, Валери Цветков
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Львов
• Количество страниц: 148 c. : ил

Д П Ф диизопропилфторфосфат. ХМБ парахлормеркуробензоат натрия. Т Л X к тозил ь лизилхлорметил кетон. Т X У трихлоруксусная кислота. Традиционно протеинаэы рассматривались как деградативные ферменты, опоообные расщеплять белки на пептиды и аминокислоты, роль которых заключается в переваривании питательного белка или участии в обмене клеточного белка. Недавно, однако, былопоказано что ограниченный протеолиз играет ключевую роль в широком круге клеточных процессов I, 2 что привело к интенсивному изучению протеолитических оиотем многих организмов. В последнее время возрастает интерес исследователей к протеолитическим системам эукариотических микроорганизмовдрожжей и грибов. Протеиназы этих организмов важны по ряду причин. Изучение протеолитических ферментов этих видов помогает понять роль, которую выполняют протеинаэы. Знание свойств. Ь . Поскольку протеолиз может играть роль в патогенезе, например, в проникновении инфекционного агента в. Протеиназы из ряда источников как микробной, так и немикробной природы, широко применяются. В литературе отсутствуют данные о протеолитичеоких ферментах флавиногенного гриба Егешоес1шп азЬЬух являющегося в СССР промышленным продуцентом витамина В. Дрожжеподобный гриб Е. ЬЬу3. С 7 процесс в котором повидимому должны принимать. Однако, до настоящего времени исследования протеолитической оиотемы ЭТОГО гриба не проводились. В.результате проведенных исследований впервые изучена протеолитическая оиотема гриба Е,азЬЬу Показано наличие четырех оптимумов протеолитичеокой активности в мицелии гриба при 4,0 7,5. Л5. В часовой, культуре . Исследовано изменение уровня активности указанных протеиназ в процессе роста гриба. Изучена регуляция биосинтеза кислой и нейтральной протеиназ. Для протеиназ с оптимумом 7, обнаружено наличие термостабильного ых внутриклеточного ых ин
гибитора ов. Проведена очистка протеиназ с оптимумом 7,5. Изучено ряд овойств одного из этих ферментов С протеиназы Е . По анализу свойств п. С кислые нейтральные или щелочные , на оонове. С кератиназы элаотазн, коллагеназы или на основании сравнения их свойств о хорошо характеризованными протеиназами трипсин пепоин, химотрипоин или катепсины млекопитающих 3 . Наиболее удовлетворительной являетоя охема предложенная Хартли С 8 которая основывается на каталитическом механизме С таблица I . Из таблицы следует что признанными являются четыре разных типа протеиназ, которые можно различить между ообой по чувствительности к различным ингибиторам. ТЛХК и ТХК, а также. С 8 . Существует некоторое. Хартли и. Аспарагиновые С карбоксильные протеинаэы активны при кислых значениях , . Металлопротеиназы активны в нейтральной. Термины нейтральная и. Специфические ин Другие гибиторы протеи. Аопарагиновые протеиназы 3. Металлопротеиназы СМ 3. II . Зависимость активности. Казеин лучше гидролизуется при щелочных значениях а гемоглобин при кислых. Следовательно, оптимум может в одинаковой степени характеризовать как субстрат так и протеиназу Субстратная специфичность i vi указывает на круг вероятных протеолитических событий, в которых протеиназа может принимать участие, но эти данные не всегда следует относить к возможному механизму действия на физиологическом оуботрате в клетке. Многие грибы оинтезируютпротеиназы, которые активны при. Длянекоторых из. II . Топография активного. С II . Не вое. Сюда. А из . С З , протеиназы , Аи з из ii ii С I и экстрацеллюлярная протеиназа базидиомицета i . Недавно показано что внеклеточные протеиназы базидиомицетов также нечувствительны к С К . В целом ингибитор пепоина пбромфенацил бромид не ингибирует грибные кислые протеиназы. Многие из них чувствительны к нбромсукцинимиду, 2 и. С ,. Большинство из этих. Да иоключение составляют более крупные молекулы . У i и некоторые углеводоодержащие протеиназы i . Да С . Протеиназы с меньшей молекулярной масоой описаны у . С . Изоэлектрические точки большинства описанных ферментов находятся ниже 5I и. ЮТ . Многие протеиназы. Детальное изучение углеводного компонента проведено для протеиназ ii , ii и . Грибные.