Физико-химические характеристики липопротеидов высокой плотности человека при дисальфалипопротеидемиях: исследование методом ЭПР-спектроскопии спиновых меток

• Автор: Горшкова, Ирина Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 182 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений, встречающихся в диссертации

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Липопротеиды высокой плотности и атеросклероз .

1.1.1. Основные классы липопротеидов. Классификация, 0елковолипидный состав, метаболизм
1.1.2. Акцепция холестерина с мембран клеток сосудов липопрот еидами высокой плотности

1.1.3. Дисальшалипопротеидеши

1.2. Физикохимические характеристики липопротеидов высокой плотности связь с белковолипидным составом.

1.2.1. Общие черты молекулярной организаии липопротеидов высокой плотности . .

1.2.2. Методы магнитной радиоспектроскопии и флуоресцентной спектроскопии в исследованиях структурных характеристик липопротеидов высокой плотности . .
1.2.3. Термоиндуцированные перестройки в молекулярной организации липопротеидов
1.2.4. Физикохимические характеристики липопрот еидных частиц при дислипопротеидемшх.
1.3. Постановка задач исследования
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДО ИЗСВДОВАНШ.
2.1. Объекты исследования
Стр.
2.2. Выделение липопротеидов и их характеристика
2.3. Спиновые метки. Получение спинмеченых препаратов липопротеидов
2.4. Регистрация спектров ЭПР и анализ их параметров .
2.5. Оценка способности липопротеидных частиц связывать спинмеченые липиды
2.6. Математическая обработка результатов исследования . . . . .
2.7. Использованные реактивы .
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Спектры ЭПР спинмеченых липопротеидов высокой плотности.
3.2. Структурные характеристики липопротеидов высокой плотности при дисальфалипопротеидемиях и ИБС
3.3. Термоиндуцированные изменения параметров вращательной диффузии спиновых меток в липопротеидах высокой плотности.
3.4. Связывание спиновых меток липопротеидами высокой плотности при дисальфалипопротеидемиях и ИБС НО
3.5. Электрические свойства поверхности липопротеидов высокой плотности .
3.6. Спектры ЭПР спинмеченого холестерина в липопротеидах высокой плотности при гипоальфалипопрот еидемии
3.7. Физикохимические характеристики подфракций ЛПВП25 а 1,01,0 гмл и ЛПВПд
а 1,51,0 гмл.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Однако, в настоящее время для исследования структурных характеристик липоцротеидов большинство исследователей и мы в их числе использует деление ЛПВП на два подкласса ЛПВП2 и ЛПВПд. Липоцротеиды разных классов различаются размерами и молекулярной массой частиц, белковолипидным составом, а также концентрацией в плазме ,,8,0. Соответствующие данные представлены в таблице I, из которой видно, что размеры липопротеидов уменьшаются последовательно от ЛПОНП к ЛПВПдХ. В этой же последовательности увеличивается содержание белка и уменьшается содержание триглицеридов. Основную липидную массу ЛПВП составляют фосфолипиды и эфиры холестерина. Исходя из средней молекулярной массы и весового процентного содержания компонентов липопротеидов, Шен и соавт. Для ЛПВП2 и ЛПВПд эти данные представлены в таблице 2. Состав полярных липидов ЛПВПд приблизительно таков молекул фосфатвдилхолина, 5 сфингомиелина, 4 лизофосфатидов, I фосфатидилэтаноламина, I фосфатидилинозита 1. Апопротеины разделяются на группы, обозначаемые по классификации Алауповика буквами А, В, С, в , Е, . Апоцротеины А апо АI и II являются основными белками ЛПВП. Состав и свойства хиломикронов, описанные в работах 0,0, в данном обзоре не рассматриваются. Размеры, молекулярная масса и белковолипидный состав липопротеидов разных классов ,,0. Частща Аминокис лотные остатки Мср. Фосфо липиды Мср. Холестерин свободный 17 Эфиры холестерина Мср. Триглице риды р. ЛПШ. В состав ЛПОНП входят как высокомолекулярный алоцротеин В, так и груша низкомолекулярных апопротеинов С ало С1, С, СШ. ЖШП2 и ЖШПд различаются по составу апопротеинов. Основная часть ало Е связана с ЛПВПд, ало о с ЖШПд 2. Согласно работе , в ЖВПд на одну частицу приходятся в среднем 4 молекулы ало А1 и 2 молекулы ало АП, а в ЖЕВПд 3 молекулы ало А1 и I молекула ало АП. Внутри обоих подклассов встречаются частицы, содержащие ало А1 без ало АП 2,5,9. Биологическая роль апопротеинов определяется их способностью регулировать ферментные системы плазмы крови 7,5. Так, апо А1 и ало АП являются, соответственно, активатором и ингибитором лецитинхолестеринацилтрансферазы ЛХАГ, а апо СП и апо СШ соответственно, активатором и ингибитором липопротеидлипазы. Эти ферменты играют важную роль в метаболизме липопротеидов см. Установлено ,,2, что белковый компонент липопротеидных частиц оказывает определяющее влияние на их организацию. Благодаря этому липопротеиды играют ванную роль в регуляции липидного, в частности, холестеринового обмена в организме ,,5,9,8,2,3,9. Накопление холестерина в гладкомышечных клетках сосудистой стенки ведет к их пролиферации и превращению в пенистые клетки предшественницы и спутницы атеросклеротического поранения артерий ,,3, 2,4. Это один из механизмов влияния липопротеидов плазмы крови на развитие атеросклероза и связанных с ним заболеваний. Схема транспортных путей эндогенного и экзогенного холестерина изображена на рис. I, который отражает также некоторые моменты метаболизма липопротеидов ,0,8,2,5. В стенках кишечника в процессе всасывания экзогенных триглицеридов и холестерина образуются хиломикроны. В кровотоке они подвергаются действию липопротевдлипазы, в результате чего частицы теряют нейтральные липиды, а также часть свободного холестерина и фосфолипидов, которые отщепляются вместе с частью алопротеинов в ввде фрагментов поверхностного слоя 6. Небольшая часть таких хиломикронов переходит в класс крупных ЛПОНП, а оставшиеся ремнантные частицы поглощаются клетками печени 8. Радиоизотопным методом установлен переход фосфолипидов и холестерина от хиломикронов к ЛПВП 1,3. Изза короткого времени жизни хиломикронов, они практически отсутствуют в крови, взятой натощак. ЛПОНП образуются в эндоплазматическом ретикулуме гепатоцитов и являются главной транспортной формой эндогенных триглицеридов. В плазмекрови ЛПОНП подвергаются действию липоцротеидлипазн. Параллельно с гидролизом триглицеридов, фосфолипиды и апоцротеины С и Е покидают частицы, что вызывает уменьшение их размеров и увеличение плотности.