Молекулярно-генетическое изучение миотонической дистрофии в Башкортостане

• Автор: Фатхлисламова, Рита Игоревна
• Шифр специальности: 03.00.04, 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 105 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Глава 1 . ВВЕДЕНИЕ

1.1. Актуальность проблемы.

1.2. Цель и задачи исследования

1.3. Научная новизна.

1.4. Практическая значимость.

1.5. Положения, выносимые на защиту.

Глава II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

II.1. Динамические мутации.

П.2. Клинические и патологические особенности миотонической дистрофии.

.3. Молекулярная основа миотонической дистрофии.

.4. Молекулярные и клеточные последствия экспансии
II.5 Полиморфизм СТО повторов в популяциях и в семьях МД
больных
П. 5. Геномный инпринтинг и феномен антиципации при миотонической дистрофии
Глава III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
III. 1. Материал для исследования
Ш. 2. Методы исследования
Ш.2.1. Выделение геномной ДНК
П1.2.2. Полимеразная цепная реакция синтеза ДНК
Ш.2.3. Реакция кинирования.
Ш.2.4. Проведение денатурирующего элекгрофореза в ПААГ
1.2.5.Проведение блотгибридизации по Саузерну.
Ш.З. Статистическая обработка результатов.
Глава IV. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ
IV. 1 .Анализ полиморфизма СГС повторов юна миотонической
дистрофии в популяциях ВолгоУральского региона.
VI .2. Изучение экспансии СТв повторов у больных миотонической дистрофией.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЛИТЕРАТУРА


В настоящее время такие данные уже получены для некоторых популяций мира , в том числе для ряда этнических групп России и бывшего СССР vi . . . . Иващенко . Э. с соавт. i . i . . . . повторов в норме и патологии, так и по частоте и характеру проявления самого заболевания. ВолгоУральский регион, отличающийся сложным этническим составом, включающим, в основном, финноугорские и тюркские народы, в этом плане ранее не был изучен. В Башкортостане же распространенность МД несколько выше, чем в среднем по России 1,7 на 0 тыс. Магжанов Р. В., . МДмутации вообще, так и оптимизации алгоритма комплексной диагностики МД в Башкортостане. Цепью исследования явилось определение возможностей применения полиморфизма повторов гена миотонической дистрофии в популяционногенетических исследованиях и для анализа механизмов происхождения и распространения их экспансии, ведущей к заболеванию оптимизация методов диагностики МД в Башкортостане. Оптимизировать метод ПЦР синтеза ДНК для определения повторов гена МД. Провести анализ полиморфизма повторов гена МД в популяциях ВолгоУ рал ьского региона. Определить размер экспансии повторов гена МД у пациентов с миотонической дистрофией жителей Башкортостана и членов их семей. Провести анализ генофенотипический корреляции при миотонической дистрофии. С целью определения частоты возникновения спонтанных мутаций и выявления нестабильных вариантов числа повторов гена МД провести анализ их передачи из поколения в поколение в семьях здоровых доноров. Разработать на основе полученных данных подходы пренатальной, пресимптоматической и дифференциальной диагностики миотонической дистрофии в Башкортостане. . Научная новизна. Впервые в десяти популяциях ВолгоУральского региона четыре этногеографические группы башкир, татары, чуваши, удмурты, мари, мордва и коми проведено изучение нормального полиморфизма локуса дистрофии, содержащего повторы, что позволило показать возможность его использования в качестве высокоинформативного маркера популяций. Установлено, что по распределению частот аллелей локуса гена МД ВолгоУральский регион занимает промежуточное положение между популяциями Европы и Азии. Определена частота спонтанного возникновения мутации локуса гена миотонической дистрофии, подтверждена нестабильность повторов гена МД с числом копий . Практическая значимость. Разработаны подходы пресимптоматической, пренатальной и дифференциальной ДНК диагностики миотонической дистрофии в Башкортосгане, которые основаны на определении экспансии числа повторов гена МД, приводящей к заболеванию. Проведенное исследование позволило выявить носителей мутантных хромосом во всех обследованных семьях, провести прссимптоматическую диагностику заболевания у клинически здоровых членов семей, отягощенных МД, подтвердить диагноз заболевания в клинически трудно диагностируемых случаях и провести дифференциальную диагностику от спорадических форм заболевания, имеющих иную генетическую природу, у больных с диагнозом миотоническая дистрофия. Оптимизация метода полимеразной цепной реакции синтеза ДНК для определения нормальных и увеличенных размеров повторов гена миотонической дистрофии. Возможность использования высокополиморфного локуса гена миотонической дистрофии, содержащего повторы, в качестве генетического маркера в популяционных исследованиях. Существование гетерогенности заболевания миотонической дистрофии на основании анализа экспансии повторов гена МД у больных с клиническим диагнозом миотоническая дистрофия и членов их семей. Возможность использования анализа повторов гена МД в качестве высокоинформативного м его да диагностики миотонической дисгрофии, в гом числе пресимптомагической и пренатальной в семьях, отягощенных МД, а также для дифференциальной диагностики от спорадических форм заболевания, имеющих иную генетическую природу. Частота спонтанного возникновения мутации в локусе повторов гена МД составляет 4x2 нестабильными являются повторы с числом копий .