Исследование роли растворимого Fas-рецептора в патогенезе аутоиммунных заболеваний, ревматоидного артрита и системной красной волчанки

• Автор: Телегина, Екатерина Сергеевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 101 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СОДЕРЖАНИЕ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Система

Структурнофункциональные особенности рецептора.

Структурнофункциональные особенности лиганда.

Механизмы передачи апоптотического сигнала через рецептор

Механизм формирования сигнального комплекса

Механизм передачи сигнала, опосредованный комплексом Молекулярные механизмы передачи сигнала, опосредованные
взаимодействием рецептора с другими белками
Механизмы устойчивости к опосредованному апоптозу
Обратная сигнализация, запускаемая рецепторами семейства ФНО.
Дефекты апоптоза при системной красной волчанке и ревматодном артрите
Система при СКВ и РА
ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ БОЛЬНЫХ, МАТЕРИАЛЫ И
Общая характеристика больных РА
Общая характеристика больных СКВ.
Получение экспериментального материала и методы исследования.
Оборудование и реактивы
Методы.
Разработка тестсистемы на основе МКА для исследования концентрации
в сыворотке крови.
Исследование экспрессии генов и в лимфоцитах крови
МТТ тест.
Анализ цитотоксичности по прокрашиванию клеток нейтральным
красным
Анализ растворимого рецептора в сыворотке крови
Исследование экспрессии на поверхности клеток синовия и
лимфоцитов крови.
Статистическая обработка.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Разработка тест системы типа сэндвич на основе моноклональных антител для
определения концентрации растворимого рецептора в сыворотке крови
Исследование концентрации рецептора в сыворотке крови больных РА, СКВ и
здоровых доноров.
Взаимосвязь уровня в сыворотке крови больных РА и СКВ с клиническими
характеристиками больных.
Исследование структурных особенностей и цитотоксической активности растворимого
рецсптора в сыворотке крови
Выявление типов клеток потенциальных мишеней для у больных РА и СКВ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


В настоящей работе была предпринята попытка изучить возможную роль , как индуктора лиганд опосредованной обратной сигнализации в патогенезе таких аутоиммунных заболеваний, как системная красная волчанка и ревматоидный артрит. Цель работы заключалась в исследовании роли растворимого Разрецептора в патогенезе ревматоидного артрита и системной красной волчанки. Разработать тестсистему типа сэндвич на основе моноклональных антител МКА для определения уровня зРаз в сыворотке крови. Проанализировать концентрацию и форму олигомерная или мономерная зРаз в сыворотке крови больных в сравнении со здоровыми донорами и выявить источник его экспрессии. Исследовать возможную корреляцию уровня зРаз в сыворотке крови с клиническими параметрами больных РА и СКВ для выяснения возможности использования анализа зРаэ в целях диагностики и прогноза заболеваний. Исследовать биологическую активность сывороток больных, содержащих высокий уровень зРаэ, на культуре клеток. Выявить типы клеток потенциальных мишеней для эРаз у больных РА и СКВ. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Система Структурнофункциональные особенности рецептора. В г. . Белки клеточной поверхности, распознаваемые этими антителами, были названы антиген и АРО1 антиген, соответственно. Антитела к оказались иммуноглобулином М I, тогда как антитела к АРО1 классифицировали как I3. Ген рецептора локализован на длинном плече хромосомы. Ген имеет длину порядка тысяч пар оснований и содержит 9 экзонов I . Промоторная область гена рецептора содержит последовательности для таких транскрипционных факторов, как 1, АР1, СР2, , и кВ . является трансмембранным белком Iго типа Рис. Молекула рецептора включает в себя концевую область в экстраклеточной части, содержащую сигнальный пептид, трансмембранную область и Сконцевой участок, находящийся в цитоплазме I, . Зрелый белок состоит из 7 аминокислот. В состав внутриклеточной части входит так называемый домен смерти, характерный для некоторых членов семейства ФНОрецепторов, участвующий в специфической передаче апоптотического сигнала в клетку I, . Внутриклеточный домен, содержащий Сконцевых аминокислот, участвует в регуляции экспрессии рецептора . Экстраклеточная часть рецептора содержит 3 домена, обогащенные цистеином. Такие домены содержат около аминокислот, имеют вытянутую структуру, стабилизированную 3 цистеиновыми связями. Область, ответственная за взаимодействие с лигандом, содержит второй и третий цистеинобогащенные домены ii . Также в экстраклеточной области рецептора был обнаружен домен i , включающий первый цистеинбогатый домен, ответственный за самоассоциацию рецепторов до связывания с лигандом . i . Было показано, что домен ответственен за гомоолигомеризацию трансмембранных рецепторов и их растворимых форм, а так же за гетероолигомеризацию трансмембранной и растворимой форм между собой . Различными группами было показано существование 9 мРНК вариантов рецептора, образующихся в результате альтернативного сплайсинга . i . . i . Некоторые варианты не содержат трансмембранную область, являются растворимыми и экспрессируются во внеклеточное пространство. В x6 сплайсинг 6 интрона не нарушает открытую рамку считывания. Данный белок не содержит трансмембранную область, является растворимым и экспрессируется во внеклеточное пространство рис. Все изоформы рецептора в экстраклеточной области содержат одинаковую последовательность, состоящую из аминокислотных остатков, что свидетельствует о физиологической роли данного домена и о функциональной активности различных вариантов сплайсинга i . Механизмы, используемые клетками для регуляции сплайсинга мРНК рецептора, и, как следствие, для изменения чувствительности к опосредованному апоптозу, еще предстоит исследовать. Анализ экспрессии рецептора показал, что он широко представлен во многих тканях и линиях клеток i .