Исследование роли GSTP1,MDR1 и MRP1 в предрасположенности к хроническим лимфопролиферативным заболеваниям и в формировании устойчивости к химиотерапии

• Автор: Горева, Ольга Борисовна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 147 с. : ил.

Оглавление
Оглавление.

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Множественная лекарственная устойчивость

1.1.1. Возникновение лекарственной устойчивости.

1.1.2. Механизмы лекарственной устойчивости

1.2. Транспортные белки семейства

1.2.1. Ргликопротетi

1.2.2. 1 белок ассоциированный с множественной лекарственной устойчивостью.

1.3. Ферменты биотрансформации ксенобиотиков.
1.3.1. Семейство глутатион трансферов
1.4. Хронические лимфопролиферативные заболевания
1.4.1. Хронический лимфолейкоз.
1.4.2. Неходжкинскиелимфомы
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Реактивы
2.2. Материал исследования.
2.3. Методы исследования.
2.3.1. Анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов
2.3.1.1. Выделение геномной ДИК.
2.3.1.2. Определение концентрации ДНК в образце.
2.3.1.3. Полимеразная цепная реакция
2.3.1.4. Анализ продуктов ПЦР.
2.3.1.5. Ферментативный гидролиз
2.3.1.6. Анализ продуктов рестрикции
2.3.2. Определение функциональной активности Ргликопротеина и .
2.3.3. Статистическая обработка
Глава 3. Результаты
3.1. Роль полиморфизмов гена 1 в 5 3 и 6 С1Т экзонах в предрасположенности к хроническим лимфопролиферативным заболеваниям.
3.2. Роль полиморфизмов гена 1 в 5 3 и 6 С1Т экзонах в формировании устойчивости к химиотерапии у больных хроническими лимфопролиферативными заболеваниями.
3.3. Роль полиморфизмов гена 1 в 6 нитроне Ех9СТ, СТ, и СТ экзонах в предрасположенности к хроническим лимфопролиферативным заболеваниям.
3.4. Роль полиморфизмов гена 1 в 6 интроне Ех9СЯ, СТ, и СТ экзонах в формировании устойчивости к химиотерапии у больных хроническими лимфопролиферативными заболеваниями.
3.5. Роль полиморфизмов гена 1 в экзоне ТС, 9 8 и С нитронах в предрасположенности к хроническим лимфопролиферативным заболеваниям.
3.6. Роль полиморфизмов гена 1 в экзоне ТС, 9 8 и С нитронах в формировании устойчивости к химиотерапии у больных
лимфшфолиферати i iыми заболевай иями.
3.7. Функциональная активность Ргликопротеина в лимфоцитах контрольной группы и у больных неходжкинскими лимфомами и анализ ассоциации с полиморфизмом гена 1.
3.8. Анализ ассоциации полиморфизмов гена 1 с функциональной активностью в лимфоцитах контрольной группы и у больных ХЛПЗ.
Глава 4. Обсуждение результатов.
4.1. Роль полиморфизмов гена 1 в 5 3 и 6 С1Т экзонах в предрасположенности к хроническим лимфопролиферативным заболеваниям.
4.2. Роль полиморфизмов гена 1 в 5 3 и 6 С1Т экзонах в формировании устойчивости к химиотерапии у больных хроническими лимфопролиферативными заболеваниями.
4.3. Роль полиморфизмов гена 1 в 6 интроне Ех9СТ, СТ, и СТ экзонах в предрасположенности к хроническим лимфопролиферативным заболеваниям.
4.4. Роль полиморфизмов гена 1 в 6 интроне Ех9СТ, СТ, и СТ экзонах в формировании устойчивости к химиотерапии у больных хроническими лимфопролиферативными заболеваниями
4.5. Роль полиморфизмов гена 1 в экзоне ТС, 9 8 и С нитронах в предрасположенности к хроническим лимфопролиферативным заболеваниям
4.6. Роль полиморфизмов гена 1 в экзоне ТС, 9 8 и С интронах в формировании устойчивости к химиотерапии у больных лимфопролиферативными заболеваниями.
4.7. Функциональная активность Ргликопротеина в лимфоцитах периферической крови контрольной группы и у больных лимфопролиферативными заболеваниями
4.8. Анализ ассоциации полиморфизмов генов 1 и 1 с функциональной активностью белков Ргликопротеина и 1 в лимфоцитах контрольной группы и у больных ХЛПЗ
Заключение
Выводы.
Список литературы


Впервые показано, что полиморфные варианты I гена 1 и ТТ гена 1 ассоциированы с устойчивостью к хроническим лимфонролиферативным заболеваниям, а 1СТ и СС генотипы с предрасположенностью. Впервые показано, что полиморфные варианты 3 гена 1 и ТТ, ТТ гена 1 ассоциированы с устойчивостью, а генотипы 3АА, СТ с чувствительностью к химиотерапии у больных хроническими лимфопролиферативными заболеваниями. Комбинация генотипов ТТТТ в и экзонах гена 1 у больных хроническими лимфопролиферативнымп заболеваниями увеличивает в раз риск возникновения лекарственной устойчивости к проводимой химиотерапии в сравнении с больными, имеющими другие генотипы. При исследовании полиморфизмов ТС, 8 и 6I гена 1 не выявлено достоверно значимых ассоциаций полиморфных вариантов гена с риском возникновения лимфопролиферативных заболеваний и развитием устойчивости к химиотерапии у больных с этими заболеваниями. Впервые показано, что функциональная активность Ргликопротсина у больных неходжкинскими лимфомами ассоциирована со степенью злокачественности опухоли достоверно более высокий уровень активности показан для больных с высокой степенью злокачественности. Показано, что уровни функциональной активности Ргликопротеина и 1 не связаны с полиморфизмами СТ, СТ, , СТ гена 1 и ТС, 8, гена I соответственно ни у здоровых европеоидов Западной Сибири, ни у больных хроническими лимфопролиферативными заболеваниями. Настоящая работа вносит вклад в развитие фундаментальных знаний о роли полиморфизмов генов 1, I, 1 и функциональной активности транспортных белков Ргликопротеина и 1 в предрасположенности к хроническим лимфонролиферативным заболеваниям и в формировании лекарственной устойчивости у больных с такими заболеваниями. Полученные данные могут быть использованы для оценки как индивидуального, так и популяционного риска развития онкогематологических заболеваний, а так же разработки дифференцированных программ их первичной профилактики. Выявление полиморфных вариантов генов, ассоциированных с устойчивостью к химиотерапии, позволит выработать рекомендации по оптимизации химиотерапии. С предрасположенностью к хроническим лимфопролиферативиым заболеваниям связаны полиморфизмы С1Т в 6 экзоне гена 1 и СТ в экзоне . С формированием устойчивости к химиотерапии у больных хроническими лимфопролиферагивиыми заболеваниями связаны полиморфизмы 3 в 5 экзоне гена 1, в экзоне и СТ экзонах гена 1. Уровень функциональной активности Ргликопротеина в лимфоцитах периферической крови у больных неходжкинскими лимфомами связан со степенью злокачественности опухоли. Уровни функциональной активности Ргликопротеина и 1 у здоровых европеоидов Западной Сибири и у больных хроническими лимфопролиферативными заболеваниями не связаны с полиморфными вариантами генов 1 СТ, СТ, и СТ и 1 ТС, 8 и соответственно. Результаты работы были представлены на следующих конференциях i ii , , i, 1 Международный симпозиум Стресс и экстремальные состояния, Феодосия, Украина, Ii , , , iii i iii i , v, I, iii i i ii ivii. V, I, 8 ii, , , РоссийскоНорвежская конференция по вопросам гематологии, СанктПетербург, III Конференция молодых ученых России с международным участием Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины, Москва, 8ая Международная Путинская школаконференция молодых ученых Биология наука XXI века, Пущино, 9 ii, v, i, ii, i, , XII Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых Ломоносов, Москва, Региональная конференция молодых ученыхокологов Актуальные вопросы экспериментальной и клинической онкологии, Томск, Ii i i, i, , Совместная российскоамериканская конференция по проблемам гематологии и трансплантации костного мозга, . Автор благодарит Мельникову Евгению Владимировну и Воронцову Елену Владимировну за помощь в проведении экспериментальной части работы, а также зав. Новосибирской областной клинической больницы Мухина Олега Викторовича и д. НМГУ Домникову Наталью Петровну за предоставление клинического материала, а также весь коллектив ПИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН.