Индукция проницаемости внутренней мембраны митохондрий дрожжей Yarrowia lipolytica

• Автор: Ковалёва, Мария Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СОКРАЩЕНИЯ И ОБОЗНАЧЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ В ТЕКСТЕ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. Аионтоз

Глава 2. Нсспсцифнчсскан Са2зависимая проницаемость митохондрий животных

Глава 2.1. Са2зависимая, циклоспорин Ачувствнтельная пора

Глава 2.2. Са2зависимая циклоспорин Аисчувствнтсльная пора,

индуцируемая жирными кислотами

Глава 2.3. Неспецифическая проницаемость митохондрий дрожжей

Глава 2.4. Влияние жирных кислот на дрожжевые митохондрии

Глава 3. Окислительный стресс. Прооксиданты. Антиоксиданты.
Глава 3.1. Окислительный стресс
Глава 3.2. Активные формы кислорода
Глава 3.3. Источники АФК в митохондриях
Глава 3.4. Митохондриальные системы удаления АФК
Глава 3.5. Проницаемость митохондрий животных в условиях
окислительного стресса
Глава 3.6. Окислительный стресс в клетках дрожжей
Глава 4. Митохондриальный АТРчувствнтельный калиевый канал
Глава 4. 1. Системы транспорта калия в митохондриях животных
Глава 4.2. Системы транспорта калия в митохондриях растений
Глава 4.3. Системы транспорта калия в митохондриях дрожжей
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 1. Материалы и методы исследования
Глава 1.1. Реагенты
Глава 1.2. Организм
Глава 1.3. Условия выращивания
Глава 1.4. Выделение .митохондрий из дрожжей У. Иро1уйса
Глава 1.5. Выделение митохондрий печени крысы
Глава 1.6. Аналитические методы
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Глава 1. В митохондриях дрожжей К Нро1упся не индуцируется
классическая Са2зависимая, циклоспорин Ачувствительная пора Глава 2. В митохондриях дрожжей У. Иро1уйса не индуцируется
Са2пальмнтатзависимая пора
Глава 3. Изучение влияния прооксидантов на митохондрии дрожжей
У. Иро1уНса
Глава 4. Митохондриальный АТРзависимый калиевый канал в
митохондриях дрожжей К Иро1уйса
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Результаты настоящей диссертационной работы дополняют полученные к настоящему времени данные о возможности индукции неспецифичсской проницаемости внутренней мембраны митохондрий дрожжей и е регуляции, и позволяют приблизиться к пониманию того, каким образом дрожжевые митохондрии могут принимать участие в процессе апоптоза. Обнаруженное нами впервые сходство митоКдтр митохондрий животных и дрожжей У. Кканала, которому в настоящее время отводится важная роль в защите сердечной мышцы от последствий ишемии. Глава 1. Апоптоз понимается сейчас как четко отрегулированный, высококоординированный механизм гибели клеток для контролируемого удаления невостребованных, поврежденных, инфицированных, ослабленных, закончивших свой жизненный цикл, потенциально опасных клеток i, , . Согласно рекомендации Номенклатурной комиссии по клеточной смерти, этот вид клеточной смерти отличается от других некроз, аутофагия, митотическая катастрофа и др. ДНК в межнуклеосомных участках, конденсацией хроматина но периферии ядра с последующим распадом ядра на части, фрагментацией клеток с образованием аиоитотичсских телец. Изучение апоптоза находится в настоящее время в центре внимания исследователей начиная с г. Такой интерес предопределен тем, что апоптоз важнейший обязательный механизм онтогенеза, морфогенеза, антираковый защиты организма в ряде случаев может усиливать тяжелые поражения организма, вызывая массовую гибель клеток например, при септическом шоке, инфаркте миокарда, инсульте, нейродегенеративных заболеваниях и т. Установлена центральная роль митохондрий в проведении апоптогениого сигнала. Особая роль митохондрий в системе выбора клетки между жизнью и смертью определяется тем, что они являются и основными генераторами активных форм кислорода часто индукторов апоптоза в клетке, и местом локализации в норме в меж. При повреждении внешней мембраны проапоптотические факторы выходят из митохондрий в цитоплазму, запускают и усиливают каскад реакций, приводящих в конечном итоге к гибели клетки. Для митохондрий животных известны два основных пути выхода апоптотичсских факторов из межмембранного пространства. Вах, члена семейства белков Вс12. Встраивание Вах, как выяснилось, процесс очень сложный см. i . i . Он модулируется митохондриальным комплексом транслоказ внешней мембраны i . . Другой путь включает увеличение проницаемости митохондрий в результате открытия ряда пор во внутренней митохондриальной мембране см. До относительно недавнего времени полагали, что апоптоз свойственен лишь высшим многоклеточным, поскольку считалось, что одноклеточные организмы НС имеют в геноме генов, аналогичных тем, которые кодируют апоитотнческие факторы многоклеточных, и поскольку существовал скепсис относительно физиологической целесообразности и эволюционных преимуществ апоптоза у одноклеточных организмов, в том числе и у дрожжей. Первое указание на возможность клеточной смерти дрожжей по механизму, напоминающему апоптоз, было получено в экспериментах, в которых животные про или антиапоптотические белки были гетерологически экспрессированы в дрожжах . . i . В этих опытах дрожжевые клетки либо умирали, демонстрируя набор физиологических маркеров апоптоза, либо избегали смерти в зависимости от присутствия про или антиапоптогических белков. В г. . vii, несущий точечную мутацию в гене С9С. Этот мутант при непереносимых температурах умирая гто механизму апоптоза с перераспределением фосфатидилсерина в цитоплазматической мембране, конденсацией хроматина, фрагментацией клеток . А в г. . vii был идентифицирован и первый проапоптотический белок, участвующий в апоптозс дрожжей мстакаспаза цистсиновая протсаза, названная дрожжевой мстакаспазой1 . С тех пор были получены многочисленные доказательства смерти дрожжевых клеток в основном, исследования проводились на дрожжах . i . i . . . i i, vi . . .