Изменение свойств рибосом при рецессивной сепрессии у дрожжей Saccharomyces Cerevisiae

• Автор: Берестецкая, Юлия Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 175 c. : ил

Таким образом, и доминантность, и аллельная специфичность супрессорных мутации у дрожжей явилась косвенным свидетельством того, что при такого рода супрессии затрагиваются гены, контролирующие структуру тРНК. Параллельно изучению природы суперсупрессии у дрожжей велись работы по идентификации нонсенскодонов. Эти работы проводили с использованием мутагенов с известным молекулярным механизмом действия. Было установлено, что терминирующими кодонаг,ш у дрожжей, как и у прокариот являются Ш и кодоны , . Выводы, сделанные Хоторном, подтвердились последующими исследованиями в лаборатории Шермана. В этой лаборатории изучали аминокислотные замены, происходящие при реверсиях к дикому типу нонсенсмутаций по гену изо1цитохрома С. В том случае, когда у ревертантов возобновлялся синтез цитохрома, в участке, соответствующем нонсенскодону в цепи мРНК, появлялся триптофан , , . На основании того, что из амбер кодона может возникнуть кодон для триптофана и , а из охркодона не может, был сделан вывод об идентичности охр и амбер кодонов дрожжей прокар иотическим кодонамтерминаторам. В этой же лаборатории получили супрессоры охр и амбер мутаций в гене ИЗО1ЦИТОХрома С. При супрессии нонсенсмутаций в изо1цитохроме С тирозин появляется в том участке полипептидной цепи, который соответствует нонсенскодону. На основании этого было сделано заключение о том, что супрессорные мутации этого типа вызывает иамшение тРНК, что позволяет им прочитывать нонсенскодон. Оказалось, что все мутации, приводящие к появлению охр и амбер супрессоров, изменяют изоакцепторные формы тирозиновой тШК. В дальнейшем была определена первичная структура тРНКтир, которая считывала амбер кодон, как кодон для тирозина. В составе мутантной тРНК обнаружили замену нуклеотида в ее антикодоЦе вместо антикодоном является ОГк , Это изменение аналогично мутации в супрессорной тРНКтиР из . В экспериментах i vi при трансляции мИЖ фага , несущей амберкодон, наглядно продемонстрировано, что у супрессорной тРНКтиР появляются новые декодирующие свойства . И1ксер. Существует множество данных о супрессорах нонсенскодонов в дрожжах. Так, , получил опалспецифичные супрессоры, способные считывать кодон . У дрожжей Петергофских линий обнаружен доминантный супрессор 9, подавляющий проявление как нонсенс, так и миссенс мутаций iv . Высказана гипотеза о том, что нонсенсмиссенс супрессия осуществляется тРНК с антикодоном минорное основание псевдоуридин или 5оксиацетилуридин, комплементарным охр, амбер и тирозиновым кодонам Миронова, . Приведенные выше факты говорят о том, что у дрожжей супрессия нонсенскодонов осуществляется за счет мутаций по генам тРНК. Поскольку в геноме. РНК i . РНК в супрессоры нонсенсмутаций. Так, существует по крайней мере 8 генов тРНКтиР, кодирующих молекулы идентичного
нуклеотидного состава i . Одной из отличительных черт дрожжевых супрессоров является их более строгая специфичность по отношению. Обнаружение и свойства рецессивных супрессорных мутаций У Дрожжей vii. В г. ИнгеВечтомовым был полученпринципиально новый класс супрессорных мутаций у дрожжей. Эти супрессоры были обнаружены среди спонтанных ревертантов мутаций по гену I ИнгеВечтомов, . В дальнейшем было установлено, что II4 неидентифицированный вид мутации и i охр мутации могут быть одновременно супрессированы только рецессивными, а не доминантными супрессорами. На основании этого свойства рецессивных супрессоров дрожжей был разработан селективный метод для их выделения, который используется в настоящее время. Прямой мутант, несущий три мутации II4, i и 2I2 подвергают УФ облучению, после чего отбирают ревертанты к прототрофности по аденину и гистидину одновременно. После отбора такого рода мутантов проводят их проверку на рецессивность. Для этого их скрещивают со штаммом, несущим мутацию i . В результате образуется диплоид, гомозиготный по i и гетерозиготный по супрессорной мутации. Если супрессорная мутация доминантна, то диплоид прототрофен по гистидину, если рецессивна то ауксотрофен. Рецессивные супрессорные мутации проявляются как аллель специфичные, но ген неспецифичные, т. Исходя из этого, их относят к информационным супрессорам ИнгеВечтомов, Симаров, .