Закономерности гидролиза легумина вики эндогенными протеиназами

• Автор: До Нгок Лань, 0
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Кишинев
• Количество страниц: 130 c. : ил

Высокомолекулярный остаток легумина, обнаруживаемый в прорастающих семенах, представляет собой конечный продукт его превращений как белка. Продукты дальнейшего гидролиза, имеющего исключительно поодиночный характер, уже являются пептидами. Основными природными субстратами карбоксипептидазы С являются промежуточные продукты расщепления ЗБ эндопептидазами. Вклад карбоксипептидазы С в мобилизацию ЗБ на разных стадиях развития этого процесса определяется, главным образом, соотношением карбокси и эндопептидазной активностей в прорастающих семенах. Настоящая работа выполнялась в проблемной лаборатории химии белка Кишиневского государственного университета им. В.И. Ленина в связи с плановой темой Исследование белков семян культурных растений, разработка основ повышения их качества и методов получения белковых изолятов для пищевых целей номер госрегистрации . Современные представления о механизме мобилизации ЗБ, ферментах, осуществляющих этот процесс, и его регуляции сформировались, главным образом, на основе исследований, проведенных в течение последнего десятилетия. И i vi. Основные ЗБ в семенах бобовых легуминоподобный белок и вицилиноподобный 7 белок подробно охарактеризованы в ряде обзоров 9,,,7. Имеются несколько типов кислых и основных полипептидных цепей 2 субъединиц. Каждая из кислых цепей соединена дисульфидной связью со специфическим партнером из числа основных цепей и образует одну из 6 3 субъединиц. Легуыиноподобные белки бобовых гомологичны ,,. Запасные Б белки, сходные с легуминоподобныыи белками бобовых по четвертичной структуре, составу и свойствам, присутствуют в семенах ряда других двудольных 8,, и овса ,,0. Повидимому, гомологичны все легуыиноподобные 3 белки цветковых растений. Нике мы приводим сведения об Б белке вики легуыине, основном объекте наших исследований. По данным Вайнтрауба и Нгуена Тхань Туена молекула легумина вики 0 кД состоит из 6 основных субъединиц ,3 кД, яконцевой глицин, 4 кислых субъединиц с нконцевыы лейцином ,6 кД и 2 кислых субъединиц с концевыы треонином ,6 кД. Приведенные значения получены при седиыентационном исследовании субъединиц, разделенных хроматографией на ДЭАЭцеллюлозе в присутствии мочевины. При исследовании субъединичного состава легумина вики зобэлектрофорезом обнаружены 2 типа основных субъединиц с яконцевым глицином ,3 кД и ,9 кД и кислые субъединицы с ыконцевыми лейцином и треонином, не отличающиеся по молекулярной массе ,0 кД. На электрофореграымах присутствовала зона ,5 кД, которую идентифицировать не удалось. Возможно, она соответствует еще одной кислой субъединице легумина, аналогичной субъединице Б белка сои ,0 кД 9. Вицилиноподобные белки бобовых молекулярная масса кД, повидимому, также гомологичны . Две из них уже после сборки четвертичной структуры 7 белка подвергаются частичному протеолитическоыу расщеплению. Образующиеся фрагменты остаются связанными нековалентно в молекуле. Этим и объясняется, очевидно, множественность субъединичного состава и концевых аминокислот, как правило, обнаруживаемая при исследовании вицилиноподобных белков из зрелых семян . ЗБ синтезируются в созревающих семенах на гранулярном эндоплазматическом ретикулуме и переносятся в центральную вакуоль, из которой в результате обезвоживания формируются алейроновые зерна ,9,0. Основные этапы распада ЗБ происходят внутри алейроновых зерен, мембрана которых остается интактной ,2. Образующиеся при распаде ЗБ аминокислоты и, вероятно, короткие пептиды ,0 выносятся в цитоплазму. По мере опустошения алейроновые зерна сливаются, вновь образуя центральную вакуоль ,0,2. Значение содержимого алейроновых зерен в прорастающих семенах бобовых, вероятно, близко к 6 По данным прямого измерения, значение в алейроновых зернах прорастающих семян клещевины находится в интервале 5,,9 5. На начальных этапах прорастания после полного набухания семени наблюдается более или менее продолжительный период, в течение которого содержание ЗБ и общего белка остается неизменным ,. Распад ЗБ происходит неравномерно в отдельных частях семядолей.