Влияние рибофлавинового статуса организма на обмен и биохимические показатели обеспеченности витамином В-6

• Автор: Харитончик, Лариса Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 133 с.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Обмен витамина В6 и его зависимость от обеспеченности организма витамином В2

2. Биохимические критерии и методы оценки обеспеченности организма человека витамином В6.

2.1. Экскреция 4пиридоксиловой кислоты с мочой

2.2. Содержание пиридоксаль5фосфата в плазме сыворотке крови

2.3. Активность аспартатамииотрансфсразы эритроцитов и степень се активации экзогенным ПАЛФ.

2.4. Функциональные тесты

2.4.1. Тригттофановый нагрузочный тест.

2.4.2. Метиониновый нагрузочный тест.
2.5. Сравнительный анализ методов определения 4пиридоксиловой
кислоты в моче
2.6. Анализ методов определения внтамеров В6 пиридоксаль5фосфата
и пиридоксаля в плазме крови
3. Нарушение обмена витамина В6 при некоторых заболеваниях
3.1. Фснилкстонурия
3.2. Прием препаратов изониазидового ряда
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Экспериментальные модели
1.1. Исследование влияния различной обеспеченности организма
витамином В2 на обмен витамина В6.
1.2. Исследование влияния антивитамина В6 метазнда на обмен
витамина В6 у крыс.
2. Клинический материал
3. Объекты исследования
3.1. Сыворотка крови.
3.2. Плазма крови и гемолизаты.
3.3. Моча
3.4. Кислотноферментативный гидролизат печени крыс
4. Методы определения 4пиридоксиловой кислоты и некоторых других метаболитов в моче.
4.1. Флуориметрический метод определения 4пиридоксиловой кислоты с использованием внешнего стандарта лактона 4ниридоксиловой кислоты
4.2. Флуориметрический метод с использованием внутреннего стандарта
4пиридоксиловой кислоты метод добавок
4.3. Определение 4пиридоксиловой кислоты методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии
4.4. Определение 1 метилникотинамида
4.5. Определение ксантурсновой кислоты.
4.6. Определение креатинина
5. Методы определения витамеров в плазме крови.
5.1. Определение пиридоксалевых коферментов в плазме крови методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии
5.2. Определение рибофлавина методом титрования
рибофлавинсвязывающим белком
6. Определение пнридоксаля и пиридоксамипа в печени крыс.
7. Определение активности ферментов
7.1 Определение активности аспар гатаминотрансфсразы эритроцитов и
величины ПАЛФэффеюа
7.2. Определение активности щелочной фосфатазы.
8. Аналитические методы исследования.
8.1. Спсктрофотомстричсскос определение концентрации рибофлавина,
пиридоксаля, пиридоксамина и пиридоксаль5фосфата и 1метилникотинамида
8.2. Измерение интенсивности флуоресценции.
9. Расчет и определение содержания витаминов В2 и В6 в рационах
. Математическая обработка экспериментальных данных
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
1. Сравнительный анализ методов оценки обеспеченности организма витамином В6.
1.1. Сравнение методов определения 4пиридоксиловой кислоты в моче
1.2. Определение шфидоксалевых коферментов в плазме крови
2. Изменение обмена витамина В6 при алиментарной недостаточности рибофлавина.
2.1. Влияние различной обеспеченности витамином В2 на обмен пиридоксина у крыс
2.2. Зависимость показателей обеспеченности витамином В6 организма
взрослых и детей от их рибофлавинового статуса
3. Установление критериев обеспеченности витамином В6 здоровых
взрослых и детей.
4. Особенности обмена витамина В6 при фенилкетонурии
5. Метазидиндуцируемая недостаточность витаминов В2 и В6 у крыс
и ее предотвращение при использовании комбинированных препаратов мстазида с рибофлавином и пиридоксином
6. Оценка пнридоксинового статуса и эффективности витаминизации различных групп населения.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Изучено влияние различной обеспеченности организма животных и людей рибофлавином на показатели пнридоксинового статуса. Выявлено, что наиболее чувствительным к недостаточности витамина В2 параметром является экскреция 4ПК с мочой. На основании сравнительного и корреляциошюго анализа выбраны корректные, специфические методы определения витамина В6 в крови и моче, адекватно отражающие обеспеченность им организма. ПК от содержания ПАЛФ в плазме крови во веем диапазоне концентраций ПАЛФ. На основе изучения взаимозависимости этих показателей, а также из зависимости от содержания витамина В6 в рационе установлены пределы концентраций ПАЛФ в плазме крови и величины часовой экскреции 4ПК с мочой, отражающие достаточную обеспеченность организма взрослых и детей разного возраста витамином В6. Выявлены особенности обмена пиридоксина при ФКУ, проявляющиеся в его повышенном содержании в плазме крови и сниженном выведении 4ПК с мочой. Установлено, что показатели обеспеченности витамином В6 больных ФКУ приближаются к таковым у здоровых при дополнительном приеме витамина В2. Показало, что введение противотуберкулезного препарата метазнда, обладающего свойствами антивитамина В6, приводит к развитию недостаточности витамина В2 у крыс. Научнопрактическое значение работы. Показано, что величина экскреции 4ПК дает правильную информацию об обеспеченности витамином В6 только при нормальной обеспеченности организма витамином В2. Определен диапазон концентраций ПАЛФ в плазме крови и пределы экскреции 4ПК с мочой, соответствующие адекватной обеспеченности организма витамином В6 здоровых детей и взрослых. Установлен критерий адекватной обеспеченности витамином В6 по содержанию ПАЛФ в плазме крови для больных ФКУ. Эти показатели используются для оценки ииридоксинового статуса. Полученные результаты использованы при разработке рецептуры комплексного противотуберкулезного препарата, содержащего наряду с витамином В6 рибофлавин. Полученная информация может быть использована в научноисследовательской работе, медицинской и педагогической практике. Разработанные методы и критерия использованы в выборочных обследованиях витаминной обеспеченности различных групп взрослого и детского населения и оценке эффективности витаминизации. Биологические функции витамина В6 в организме отличаются исключительным многообразием 3,4. В форме кофермента он принимает участие более чем в ста реакциях, в том числе в реакциях метаболизма аминокислот и углеводов, биосинтеза и деградации сфинголипидов, биосинтеза гема и нейромедиаторов, а также синтеза многих других жизненно важных молекул 3,2. Термином витамин В6 в соответствии с определением Международной комиссии по номенклатуре по биологической химии обозначают родственные в химическом отношении производные Згидрокси2метклпиридина, обладающие биологической активностью. К ним относят три природные формы, пиридоксин 2метнл3окси4,5бисоксиметилииридин пиридоксаль ПАЛ 2мстил3окси4формил5оксиметилпиридин пиридоксамин 2метилЗокси4аминометил5оксиметилпиридин ПМ и их фосфорилированные производные. Основтгым источником витамина В6 служат продукты, богатые белком мясо, орехи, неочищенные крупы зерно, сыр. Овощи и фрукты содержат очень мало этого витамина. Ежедневная потребность в витамине В6 составляет для женщин 1,6 мг в сутки при потреблении г белка в сутки или более 0,,9 мгг потребленного белка, а для мужчин 2,0 мг в сутки при потреблении г белка в сутки 9,8,4,3. Всасывание витамина В6 в желудочнокишечном тракте осуществляется пассивной диффузией преимущественно в гонком кишечнике в тошей кишке и значительно хуже в подвздошной 4,4,6. Все три формы витамина В6 пиридоксин, ПМ, ПАЛ адсорбируются с равной эффективностью. Фосфорилированные формы этого витамина, поступающие в кишечник с пищей, дсфосфорияируются неспецифической щелочной фосфатазон 6,9. Неясным остается вопрос, какую роль играет процесс дсфосфолирирования при абсорбции витамеров В6, так как было показано, что при пассивной диффузии через базолатеральную мембрану лимитирующей стадией является реакция гидролиза фосфорилированных форм. Однако эти формы тоже могут поглощаться 6.