Влияние психолептиков на активность основных карбоксипептидаз в тканях самцов крыс

• Автор: Правосудова, Наталья Александровна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 156 с. : ил.

1.1. Влияние психолептиков на пептидергические системы.

1.1.1. Нейропептиды при действии диазепама.

1.1.2. Нейропептиды при действии галоперидола

1.2. Основные карбоксипептидазы и их роль в процессинге регуляторных пептидов.

1.2.1. Протеолитические ферменты обмена регуляторных пептидов при действии психолептиков.

1.2.2. Карбоксипептидаза Н.

1.2.3. Карбоксипептидаза М.

1.2.4. ФМСФингибируемая карбоксипептидаза.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследования

2.1.1. Схема эксперимента

2.2. Методы исследования.
2.2.1. Метод определения активности карбоксипептидазы Н
2.2.2. Метод определения активности карбоксипептидазы М
2.2.3. Метод определения аюгивности ФМСФингибируемой карбоксипептидазы
2.2.4. Статистическая обработка результатов исследования.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
3.1. Активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс в норме и при
действии психолептиков.
3.1.1. Распределение активности карбоксипептидазы Н в тканях интактных крыс.
3.1.2. Влияние физиологического раствора на активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс
3.1.2.1. Влияние однократного введения физиологического раствора на активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс.
3.1.2.2. Влияние хронического введения физиологического раствора на активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс.
3.1.3. Активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс при введении диазепама
3.1.3.1. Влияние однократного введения диазепама на активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс
3.1.3.2. Влияние хронического введения диазепама на активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс
3.1.4. Активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс при введении галоперидола.
3.1.4.1. Влияние однократного введения галоперидола на активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс
3.1.4.2. Влияние хронического введения галоперидола на активность карбоксипептидазы Н в тканях крыс
3.2. Активность ФМСФингибируемой карбоксипептидазы в тканях крыс в норме и при действии психолептиков.
3.2.1. Распределение активности ФМСФингибируемой карбоксипептидазы в тканях интактных крыс
3.2.2. Активность ФМСФингибируемой КП в тканях крыс при введении физиологического раствора
3.2.2.1. Влияние однократного введения физраствора на активность ФМСФингибируемой КП в тканях крыс.
3.2.2.2. Влияние хронического введения физиологического раствора на активность ФМСФингибируемой КП в тканях крыс
3.2.3. Активность ФМСФингибируемой КП в тканях крыс при введении диазепама
3.2.3.1. Влияние однократного введения диазепама на активность ФМСФингибируемой КП в тканях крыс
3.2.3.2. Влияние хронического введения диазепама на активность ФМСФингибируемой КП в тканях крыс
3.2.4. Активность ФМСФингибируемой КП в тканях крыс при введении галоперидола
3.2.4.1. Влияние однократного введения галоперидола на активность ФМСФингибируемой КП в тканях крыс
3.2.4.2. Влияние хронического введения галоперидола на активность ФМСФингибируемой КП в тканях крыс
3.3. Активность карбоксипептидазы М в тканях крыс в норме и при введении психолептиков
3.3.1. Распределение активности карбоксипептидазы М в тканях интактных животных
3.3.2. Активность карбоксипептидазы М в тканях крыс при введении физиологического раствора.
3.3.2.1. Влияние однократного введения физраствора на активность карбоксипептидазы М в тканях крыс.
3.3.2.2. Влияние хронического введения физиологического раствора на активность карбоксипептидазы М в тканях крыс
3.3.3. Активность карбоксипептидазы М в тканях крыс при введении диазепама.
3.3.3.1. Влияние однократного введения диазепама на активность карбоксипептидазы М в тканях крыс.
3.3.3.2. Влияние хронического введения диазепама на активность карбоксипептидазы М в тканях крыс.
3.3.4. Активность карбоксипептидазы М в тканях крыс при введении галоперидола
З.З.4.1. Влияние однократного введения галоперидола на активность карбоксипептидазы М в тканях крыс.
3.3.4.2. Влияние хронического введения галоперидола на активность
карбоксипептидазы М в тканях крыс
3.4. Активность основных карбоксипептидаз I VI при действии
психолептиков.
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ЛИТЕРАТУРА
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АКТГ адренокортикотропный гормон
АПМЯК аминопропилмеркаптоянтарная кислота
АПФ ангиотензинпревращающий фермент
БДрецепторы бензодиазепиновые рецепторы
ГАМК уаминомасляная кислота
ГТРг гонадотропинрилизинг гормон
ГПЯК гуанидинопропилянтарная кислота
ГЭМЯК гуанидиноэтилмеркаптоянтарная кислота
ДАрецептор дофаминовый рецептор
ОВ ингибитор связывания диазепама
ДСИП дельтасон индуцирующий пептид
КП карбоксипептидаза
КПА карбоксипептидаза А
КПВ карбоксипептидаза В
КГТМ карбоксипептидаза М
КПЛ карбоксипептидаза
КП Н карбоксипептидаза Н
КРФ кортикотропинрилизинг фактор
МСГ меланоцитстимулирующий гормон
СЮЛ октадеканейропептид
ПБР периферический бензодиазепиновый рецептор
ПОМК проопиомеланокортин
ПХМБ пхлормеркурийбензоат
ТТЛ триаконтатетраиейропептид
ФМСФ фенилметилсульфонилфторид
ФМСФКП фенилметилсульфонилфторидингибируемая карбоксипептидаза
ЭДТА этилдиаминтстрауксусная кислота
ВВЕДЕНИЕ


Таким образом, ГАМК, связываясь с рсубъединицей, вызывает конформационные изменения белков ионофорного канала, приводящие к усилению тока СГ. Алостерическая модуляция этих изменений обусловлена связыванием лигандов с асубъединицей рецептора ,9. Наличие на синаптических мембранах нервных клеток высокоаффинных мест связывания для бензодиазепинов свидетельствовало о существовании эндогенного лиганда этих рецепторов. Ндиазепама с синаптическими мембранами 2, 3. Было определено, что эндогенный лиганд представляет собой полипептид с Мг , который был назван I ингибитор связывания диазепама англ. В структуре 1 преобладают основные аминокислоты, конец пептида защищен Сконец определяет биологическую активность при взаимодействии пептида с рецептором . ЕРЫ. Все эти пептиды содержат одинаковую последовательность на Сконце ГлнАлаТреВалГлиАспВалАснТреАспАргПроГлиЛейЛейАспЛейЛиз 2. ЭВ1 и его фрагменты объединяют термином эндозепины. Они являются негативными аллостерическими модуляторами ГАМКАрецептора, снижающими эффективность взаимодействия ГАМК с рецептором 8, 2, и относятся к анксиогенным соединениям, усиливающим состояние тревоги, страха и проконфликтные ответы в тесте Фогеля 8,2. Эндозепины найдены в тканях человека, крысы, свиньи, быка, лягушки Ляпа псНЬипба, форели 9, 4, 0. ЭВ1 мМ в коре больших полушарий, гиппокампе, мозжечке, гипоталамусе, миндалине , 3. У человека самые высокие концентрации были найдены в мозжечке, миндалине, гиппокампе, гипоталамусе и черном веществе, а также в спинном мозге и спинномозговой жидкости 3. На клеточном уровне, ЭВ1 был обнаружен в нейронах и клетках глии, тогда как СЮЫ и ТТЫ были главным образом найдены в нейронах , 3, 0. Наиболее высокие уровни мРНК ЭВ1 были найдены в мозжечке и эпендиме третьего желудочка мозга крысы, промежуточные уровни в обонятельной луковице, дугообразном ядре, эпифизе и гипофизе . С помощью электронной микроскопии показано присутствие ОЭЫ в перикарионе нейронов, эндоплазматическом ретикулуме, аппарате Гольджи, микротрубочках, свободных рибосомах . В окончании нейронов БВ1 и СЮЫ накапливаются в синаптических везикулах , 2. К одновременно с ЭВ1 высвобождаются ГАМК и энкефалины, что указывает на их сосуществование в одном пресинаптическом окончании. Кстимулируемый
выброс БВГ зависит от присутствия Са 2. Есть данные, согласно которым эндозепины влияют на рост клеток глии через аутокринпые механизмы 9. ДНК в глиальных клетках крысы, действуя через центральный тип бензодиазепиновых рецепторов. I и его производные широко распространены в тканях, содержащих периферические бензодиазепиновые рецепторы и участвующие в липидном обмене , , 8, 8. Количество в этих тканях составляет пмольг сырой массы 8. Кроме того, эндозепины обнаружены в клетках Шванна . Присутствие мРНК I в периферических органах крысы , и человека 2 позволяет заключить, что эндозепины синтезируются и в периферических тканях. Здесь I выполняет иные функции, чем в нейронах он не высвобождается из срезов периферических органов при деполяризации 2. Через рецепторы, расположенные на мембране митохондрий, эндозепины могут осуществлять рефляцию внутриклеточного метаболизма , 4. В частности, I транспортирует холестерол к внутренней мембране митохондрий 3. Взаимодействие I с периферические бензодиазепиновыми рецепторами усиливает вход холестерола в митохондрии с последующим усилением синтеза предшественника стероидов прегненолона. Этот процесс наблюдается как в клетках коры надпочечников , ИЗ, 1, так и в глиальных клетках мозга 3, 4. В надпочечниках это АКТГзависимый процесс. Идентичность I и белка, связывающего ацилкоэнзим А, выделенного из ткани печени 0, 3, указывает на способность I опосредовать синтез жирных кислот. Таким образом, I играет существенную роль в синтезе стероидных гормонов в различных тканях за счет регуляции лимитирующей стадии 2. Уровень I в надпочечниках зависит от уровня АКТГ в организме. Удаление гипофиза у крыс вызвало уменьшение концентрации I и ПБР в надпочечниках, введение АКТГ уменьшило этот эффект, то есть существует положительная корреляция между уровнем I и ПБР в надпочечниках и уровнем кортикостерона в плазме крови , 1.