Влияние бактериальных гликополимеров на функционально-метаболический статус лейкоцитов и активность ключевых ферментов метаболизма мышей

• Автор: Фомина, Алла Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.04, 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 149 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Характеристика полисахаридсодержащих материалов, перспективных для активизации иммунной системы человека и животных

1.1.1. Характеристика ЛПС грамотрицательных бактерий

1.1.1.1. Структурные особенности ЛПС, существенные для проявления биологической активности

1.1.1.2. Особенности строения ЛПС азоспирилл

1.1.2. Экзополисахариды как перспективные иммуномодуляторы

1.1.2.1. Особенности строения и свойства экзогликанов бактерий ii x

1.1.3. Растительные полисахариды как неспсцифические модуляторы сравнения

1.2. Основные клеткимишени млекопитающих для полисахаридсодержащих полимеров
1.3. Рецепторы, необходимые для взаимодействия гликонолимеров с клетками макроорганизма .
1.3.1. Внутриклеточные пути проведения сигнала после аюгива
ции молекулой ЛПС
1.4. Процесс фагоцитоза и функциональнометаболический статус фагоцитов
1.5. Медиаторы воспаления цитокины и их основные свойства
1.6. Влияние гликонолимеров на обменные процессы человека и животных . , .
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования
2.2. Выделение полисахаридсодержащих полимеров
2.3. Определение токсичности полисахаридных препаратов с помощью тестобъекта инфузории колподы
2.4. Определение острой токсичности полисахаридных препаратов
на сенсибилизированных лабораторных мышах
2.5. Выделение мышиных макрофагов
2.6. Моделирование процесса фагоцитоза i vi и определение его активности и индекса завершенности
2.7. Постановка теста восстановления нитросинего тетразолия
2.8. Определение активности миелопероксидазы в макрофагах
2.9. Определение индукции образования оксида азота спленоцитами
2 Определение ЛПСиндуцировашюй пролиферации спленоцитов
2 Выделение мононуклеаров и нейтрофилов из периферической крови человека
2 Определение образования АФК клетками цельной крови методом хсмилюминесценции
2 Определение активности кислой фосфатазы в нейтрофилах периферической крови человека
2 Определение продукции цитокинов клетками цельной крови и мононуклеарами человека
2 Определение биохимичес1СИХ и гематологических показателей сыворотки крови белых мышей
ГЛАВА 3. ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Характеристика полисахаридсодержащих препаратов, использованных в исследовании
3.2. Оценка острой токсичности биогликанов
3.3. Влияние полисахаридных препаратов на активность и завершенность процесса фагоцитоза
3.4. Метаболическое состояние лейкоцитов млекопитающих под воздействием биогликанов i vi
3.4.1. Влияние гликополимеров на продукцию лейкоцитами активных форм кислорода
3.4.2. Влияние полисахаридных препаратов на активность миелопероксидазы в макрофагах мышей
3.4.3. Продукция оксида азота спленоцитами под воздействием гликополимеров
3.4.4. Влияние полисахаридных препаратов на акгивность кислой фосфатазы
3.5. Определение индуцированной полисахаридами продукции провоспалительных цитокинов
3.6. Определение ПСиндуцированной пролиферации спленоцитов
3.7. Влияние на активность ключевых ферментов метаболизма белых мышей
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ .
I1ИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ллт аланинаминотрансфсраза
АМФ альвеолярный макрофаг
АСТ аспаргатаминотрансфераза
АФК активные формы кислорода
ИЗФ индекс завершеннос ти фагоцитоза
ИЛ интерлейкин
ИФА иммуноферментный анализ
ЖК жирная кислота
кдо 2кето3дезоксиОманнооктоновая кислота
кк креатинкиназа
кпс капсульный полисахарид
КФ кислая фосфатаза
лдг л актатдегидрогеназа
лпс липополисахарид
лпвп липопротеиды высокой плотности
лпнп липопротеиды низкой плотности
лпонп липопротеиды очень низкой плотности
мпк мононуклеары периферической крови
мло миелопероксидаза
МЭЖК метиловые эфиры жирных кислот
опс Оспецифический полисахарид
ПМФ перитонеальный макрофаг
пс полисахарид .
ФИ фагоцитарный индекс
ФНОа фактор некроза опухоли альфа
ЩФ щелочная фосфатаза
эпс экзополисахарид
Рис фукоза
ва галактоза
вс глюкоза
сЫ глюкозамин
еМ иммуноглобулин класса М
ЖЮ индуцибельная ЫОсинтаза
ЬРВ линополисахаридсвязывающий белок
МСН цветной показатель крови
0 оксид азота
Юа рамноза
тья Топодобный рецептор
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Важным положительным моментом при возможном промышленном производстве препаратов на основе гликополимеров непатогенных бактерий является их полная безопасность для персонала. По материалам диссертационной работы опубликовано пособие Методические рекомендации по изучению биологической активности биогликанов в отношении эукариотических клеток в соавторстве с С. А. Конновой и В. В. Игнатовым, г. Учебномегодической комиссией и одобренные Ученым советом биологического факультета Саратовского государственного университета им. Н.Г. СГУ курсов Основы гликологии и Химия и биохимия углеводов. Гликополимеры ризобактерий ЛПС бактерий рода ii и ЭПС . ЛПС . КВС1 и . ЛПС . Работа выполнена на кафедре биохимии и биофизики ГОУ ВПО Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского и в лаборатории биохимии Института биохимии и физиологии растений и микроорганизмов ИБФРМ РАН и частично поддержана грантом Российского фонда фундаментальных исследований в гг. Игнатов В. Личный вклад соискателя. Экспериментальные результаты, представленные в диссертации, получены лично автором и в совместной работе с сотрудниками лаборатории биохимии ИБФРМ РАН. Выделение ЛПС азоспирилл выполнено совместно с сотрудниками лаборатории биохимии ИБФРМ РАН. НИИ особо чистых биопрепаратов г. СанктПетербург. Эксперименты но определению активности белкового, углеводного и липидного обменов в организме белых мышей проведены совместно с сотрудниками биохимической группы Саратовской научноисследовательской ветеринарной станции РАСХН. На защиту вынесены только те положения и результаты экспериментов, в получении которых роль автора была определяющей. Апробация работы. Основные результаты и положения работы представлены на I и II объединенном иммунологическом форуме Россия, Екатеринбург, г. СанктПетербург, г. Исследование молодых ученых и студентов в биологии Россия, Саратов, СГУ им. Н.Г. Чернышевского, , , гг. XI и XIII Всероссийских научных форумах с международным участием им. В.И. Иоффе Россия, СанктПетербург, , гг. I конференции молодых ученых медикобиологической секции Поволжской ассоциации государственных университетов Россия, Ульяновск, г. Межрегиональной конференции молодых ученых Стратегия взаимодействия микроорганизмов и растений с окружающей средой Россия, Саратов, ИБФРМ РАН, г. Публикации. По теме диссертации опубликовано работ, из них 2 статьи и 3 публикации материалов конференций в журналах из перечня, рекомендованного Высшей аттестационной комиссией Российской Федерации. Структура и объем работы. Работа изложена на 9 страницах, иллюстрирована рисунками и содержит таблиц. Список использованных литературных источников включает 9 наименований, в том числе 9 зарубежных. ГЛАВА 1. Биополимеры, относящиеся к классу полисахаридов, выполняют ряд важных биологических функций они участвуют в построении клеточных стенок и межклеточного матрикса, в регулировании обмена ионами между клеткой и с окружением, являются для клеткиэнергетическим резервом. Углеводсодержащие биополимеры, в основном, представлены биогликанами, которые включают большие группы самых разнообразных полисахаридов и гликоконъюгатов гликопротеинов, протеогликанов, пептидогликанов, гликолипидов, липополисахаридов ЛПС, липополисахаридбелковых комплексов ЛПБК, гликозаминогликанов и др. Большинство биогликанов обладает многоплановой физиологической активностью и относится к большой группе так называемых модификаторов биологического ответа ii ii Оводов с соавт Беседнова с соавт. Турина и Федорова, Ермак, v . К иммуномодуляторам, веществам, оказывающим регулирующее влияние на иммунную систему организма, относятся иммуностимуляторы, обуславливающие усиление иммунного ответа иммуноадъюванты, способные усиливать действие иммуногенов, антигенов и вакцин на иммунную систему человека и животных иммунодепрессанты, обеспечивающие подавление иммунного ответа, необходимое, например, при трансплантациях органов и тканей Смирнов с соавт. В качестве иммунодепрессаитов из биогликанов наиболее известен каррагинан сульфатированный ПС красных водорослей Хасина с соавт.