Активация кислородзависимой биоцидной системы нейтрофильных лейкоцитов при контакте крови с гемосорбентами

• Автор: Эйсмонт, Юрий Александрович
• Шифр специальности: 03.00.04, 14.00.16
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 139 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ.
ОГЛАВЛЕНИЕ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. АКТИВНЫЕ ФОРМЫ КИСЛОРОДА АФК. СИНТЕЗ,

ИНАКТИВАЦИЯ И ГЕМОСОРБЦИЯ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Супероксидный радикал Ог и его генератор оксидаза

Миелопсроксидаза МПО

Механизм каталитического действия МПО.

ОСГ ключевой эффектор биоцидного действия МПО

Индуцибельная синтаза лейкоцитов.

Лактоферрин ЛФ как потенциальный генератор НО
Деструктивная роль АФК лейкоцитов при воспалении
Молекулярные основы повреждающего действия АФК
Окисление липидов в биомембранах под действием
АФК лейкоцитов
Окислительная модификация белков под действием АФК
АФК как редоксмодуляторы функций клеток и компонентов
гуморальных систем
Редоксфакторы модуляторы клеточных функций.
АФК модификаторы гуморальных факторов воспаления
АФК и апоптоз.
Участие АФК нейтрофилов в патологии.
Система антиоксидантной защиты организма
Индукция АФК при эфферентных методах лечения
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Общая структура работы.
2.2. Природа гемосорбентов
2.3. Постановка экспериментов i vi и учет активных форм кислорода АФК i vi и i viv
2.4. Гемоперфузия в экспериментах на животных.
2.5. Гемоперфузия на фоне супероксиддисмутазы.
2.6. Гемоперфузия на фоне церулоплазмина
2.7. Определение общего количества лейкоцитов крови.
2.8. Определение ОСГ выделяемого нейтрофилами крови человека при контакте с гемосорбентами.
2.9. Определение продукции супероксид анион радикала выделяемого нейтрофилами крови человека при контакте с гемосорбентами.
2 Рециркулирующая система для изучения связывания МПО
с ФНагарозой.
2 Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. ОЦЕНКА ИНДУКТИВНОЙ АКТИВНОСТИ СОРБЕНТОВ РАЗЛИЧНОЙ ХИМИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ В СТЕНДОВЫХ УСЛОВИЯХ
3.1. Реактивность нейтрофильных лейкоцитов, выделенных на градиенте плотности.
3.2. Реакция клеточных элементов цельной крови на контакт с сорбционными препаратами i vi.
3.3. Оценка индивидуальной чувствительности больных к гемоконтактным препаратам для гемосорбционных процедур
ГЛАВА 4 .СПОСОБНОСТЬ СОРБЕНТОВ ИНДУЦИРОВАТЬ ГЕНЕРАЦИЮ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА АФК I VIV.
4.1. Индукция АФК лейкоцитами крови морских свинок при гемоперфузии через различные сорбенты.
4.2. Изменение динамики лейкоцитарного пула крови морских свинок в процессе гемоперфузии.
ГЛАВА 5.ВЛИЯНИЕ АНТИОКСИДАНТОВ НА ПРОЦЕССЫ ГЕНЕРАЦИИ
АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА ПРИ ГЕМОПЕРФУЗИИ I VIV
5.1. Супероксиддисмутаза СОД как антиоксидантный препарат при эфферентной гемокоррекции.
5.2. Церулоплазмин как антиоксидантний препарат при эфферентной
гемокоррекции.
ГЛАВА 6. СОРБЕНТ ДЛЯ УДАЛЕНИЯ ЭКСТРАЦЕЛЛЮЛЯРНОЙ МПО
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Патент РФ 8,. Впервые выполнены исследования по количественной оценке продуктов активации оксидазной и миелопероксидазной систем нейтрофилов при их контакте с гемосорбентами. Охарактеризованы селективные сорбционные свойства иммобилизованного на агарозу 4Б ФН в отношении жидкофазной МПО. Высказано предположение о возможности использования сорбента ФН агароза для элиминации экстрацеллюлярной МПО источника реактивных производных кислорода гипогалоидов и свободных радикалов. Теоретическое и практическое значение работы. Работа является экспериментальным исследованием, которое вносит вклад в изучение прикладной научной проблемы связанной с исследованием биосовместимости гемоконтактных материалов медицинского назначения. Работа расширяет теоретические представления об участии нейтрофильных лейкоцитов крови в запуске кислородмодифицирующих систем клетки в возможном создании дисбаланса в системе антиоксиданты прооксиданты в сторону последних на уровне целостного организма при гемоконтактной процедуре. С теоретических позиций проведенные в работе эксперименты i viv могут служить основой при создании экспериментальной модели для изучения синдрома системного ответа на воспаление i I I и компенсаторного ответа организма на генерализованное воспаление ii . Результаты исследования расширяют представления о генезе процессов, разворачивающихся в результате гемоконтактной процедуры на поверхности сорбентов и в перфузируемой крови и связанных с активацией кислородзависимых биоцид ных систем нейтрофильных лейкоцитов. С точки зрения практической значимости в работе предложено два варианта проведения гемоперфузии с целью снижения негативных последствий гиперпродукции АФК. Вопервых, это проведение гемосорбции на фоне постоянного введения антиоксидантов супероксиддисмутазы и церулоплазмина. Второе, предложено использование селективного гемосорбента фибронектин агароза, который специфически связывает и удаляет из циркуляции экстрацеллюлярную МПО продуцента одного из наиболее агрессивных интермедиатов НОС1. Выполненное исследование позволит разработать оптималыше схемы проведения гемосорбции с учетом общего антиоксидантного статуса больного. Основные положения выносимые на защиту. Контакт лейкоцитов крови с гемосорбентами приводит к индукции генерации клетками активных форм кислорода, степень выраженности которой зависит от химической природы сорбента и условий проведения экспериментов i vi и i viv. Взаимодействие нейтрофильных лейкоцитов с гранулами сорбентов сопровождается активацией кислородзависимых биоцидных систем клеток оксидазы и миелопсроксидазы, степень выраженности которой связана с химической структурой гранул. Селективный сорбент фибронектин агароза специфически связывает экстрацеллюлярную миелопсроксидазу. Апробация работы. Научной конференции в честь 0летия 1ВМКГ Актуальные проблемы военноморской и клинической медицины, СПб, I Всероссийском Конгрессе по патофизиологии, М. III Всероссийском съезде гематологов и трансфузиологов, СПб, Международной конференции Свободнорадикальные процессы экологические, фармакологические и клинические аспекты, СПб, Научной конференции Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины, СПб, Научной конференции Дни иммунологии в Санкт Петербурге , СПб, Научной конференции Механизмы типовых патологических процессов, СПб, . Публикации По теме диссертации опубликовано работ, из них 4 статьи в центральных журналах и 3 патента на изобретение. Структура и объем диссертации. Текст диссертации изложен на 9 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, из 4х глав собственных исследований, заключения, выводов и рекомендаций по использованию научных выводов. Библиография включает 1 источников, из которых отечественных и 9 зарубежных. Работа иллюстрирована рисунками и 5 таблицами.