Мутационный анализ возможных сайтов фосфорилирования транспортного белка вируса табачной мозаики

• Автор: Каргер, Елена Мировна
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 90 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ОРГАНИЗАЦИЯ ГЕНОМА ВТМ И ВИРУСНЫЙ ЦИКЛ

ПЛАЗМОДЕСМЫ И ТБ ВТМ

ТБОБУСЛОВЛЕННЫЙ ТРАНСПОРТ ВИРУСНОЙ РНК

КЛЕТОЧЫЕ КОМПОНЕНТЫ,УЧАСТВУЮЩИЕ В ТАНСПОРТЕ

Роль телец включения

Роль микротрубочек

Роль микрофиламентов

ДРУГИЕ ХОЗЯЙСКИЕ ФАКТОРЫ, УЧАСТВУЮЩИЕ В
ИНФЕКЦИИ
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ДОМЕНЫ ТБ ВТМ
ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ В РАСТЕНИЯХ
РАТИТЕЛЬНЫЕ МАП КИНАЗЫ
Общая характеристика
МКК
Б1РК и У1РКкиназы. участвующие в ответе на стресс
РАСТИТЕЛЬНЫЕ КАЗЕИНОВЫЕ КИНАЗЫ I И II КК1 и КК2
ФОСФОРИЛИРОВАИЕ ТБ ФИТОВИРУСОВ
ФосФорилипование ТБ ВТМ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
АНАЛИЗ ПЕПТИДОВ
Кинирование белков и получение триптических пептидов
Двумерное картирование пептидов и фосфоаминокислотный анализ
Анализ аминокислотной последовательности пептидов
ВЫДЕЛЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ РАЗЛИЧНЫХ КЛЕТОЧНЫХ
ФРАКЦИЙ
Получение препарата фракции клеточных стенок
Получение препарата фракции РЗО
Получение микпосомальных фракций
АНАЛИЗ МИКРОСОМАЛЬНЫХ ФРАКЦИЙ
Кинированне i vi
Анализ влияния двухвалентных катионов на киназную
активность
Анализ присутствия i
ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ I VI
Протеинкиназа С
Фракция клеточных стенок
КИНИРОВАННЕ В ГЕЛЕ
ПОЛУЧЕНИЕ РНПКОМПЛЕКСОВ
АНАЛИЗ РНП НА НИТРОЦЕЛЛЮЛОЗНЫХ ФИЛЬТРАХ
ВЫДЕЛЕИЕ И ЗАРАЖЕНИЕ ПРОТОПЛАСТОВ
КОНСТРУИРОВАНИЕ ПЛАЗМИД
Получение конструкций с Сконцевыми мутантами
Получение конструкций с мутациями в положении 4
ТРАНСКРИПЦИЯ, ЗАРАЖЕНИЕ РАСТЕНИЙ И АНАЛИЗ
ЗАРАЖЕНИЯ
Формирование РНП
Измерения с помощью
РАБОТА С АГРОБАКТЕРИЯМИ
Трансформация агробактерий
Агроинфильтрация
ИЗУЧЕИЕ СТАБИЛЬНОСТИ БЕЛКОВ
ПОЛУЧЕНИЕ АНТИТЕЛ К i
КРУГОВОЙ ДИХРОИЗМ
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ I ПДА ТБ ВТМ НА СВОЙСТВА РНП
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТРУКТУРЫ КОМПЛЕКСОВ РНКТБ ВТМ
МЕТОДОМ
ИЗУЧЕНИЕ РОЛИ СКОНЦЕВЫХ АМИНОКИСЛОТ ТБ В
ТРАНСПОРТЕ ВТМ
ХАРАКТЕРИСТИКА КИАЗНОЙ АКТИВЮСТИ ЭР
ОБОГАЩЕННЫХ ФРАКЦИЙ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ САЙТОВ ФОСФОРИЛИРОВАНИЯ ТБ ВТМ
МИКРОСОМАЛЬНОЙ ФРАКЦИЕЙ
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ТРЕОНИНА В ПОЛОЖЕНИИ 4 НА
ТРАНСПОРТНЫЕ СВОЙСТВА ТБ ВТМ
ИЗУЧЕИЕ СТАБИЛЬНОСТИ МУТАНТ 1ЫХ ТБ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Б1РК и У1РКкиназы. I. Изучение механизма межклеточного транспорта вирусной инфекции является одной из проблем современной вирусологии растений. В момент заражения растения вирусом лишь незначительное число клеток оказывается инфицированным. Для развития инфекции необходимо, чтобы вирус перемещался от пораженных клеток к здоровым. Межклеточный ближний транспорт вирусной инфекции в растениях осуществляется преимущественно через плазмодесмы, а перенос вирусного инфекционного материала в соседние листья т. Долгое время считалось, что межклеточный транспорт вирусов это генетически пассивный процесс. В настоящий момент доказано, что он кодируется вирусным геномом и осуществляется при помощи одного или нескольких вирусспецифических транспортных белков ТБ v v, v i, . Именно ТБ играют ключевую роль в переносе вирусного генома внутри инфицированной клетки к плазмодесмам, далее в распространении вирусной инфекции через плазмодесмы по клеткам паренхимы и, в случае некоторых вирусов, в транспорте вирусного генома по сосудам флоэмы i . Таким образом, функционирование транспортных белков является необходимым условием развития инфекционного процесса. Очевидно, что прогресс в исследовании вирусных ТБ, их взаимодействий с вирусными нуклеиновыми кислотами и различными вирусными и клеточными белками открывает широкие перспективы для создания новых методов борьбы с вирусными инфекциями растений. Одной из посттрансляционных модификаций ТБ, необходимых для их нормального функционирования, может являться их фосфорилирование. Возможность фосфорилирования фитовирусного транспортного белка была впервые показана . ТБ ВТМ. В течение последующих лет накапливалось много данных о фосфорилировании ТБ вирусов растений i viv и i vi. Однако до сих пор не определен точный механизм фосфорилирования ТБ. Более того, суммируя проведенные исследования, невозможно четко сформулировать роль фосфорилирования в позитивной или негативной регуляции транспорта вирусов растений.