Клонирование и анализ генов, вовлеченных в развитие коры головного мозга млекопитающих

• Автор: Британова, Ольга Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 89 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ.
Введение

X.Литературный обзор

1.1. Анатомический аспект развития головного мозга

1.2. Структура коры головного мозга

1.3. Нсжейралъные типы клеток в коре головного б мозга

1.4. Формирование слоев коры ГМ

1.5. Роль митоза в детерминации клеточного ю фенотипа

1.6. Клеточная судьба и клеткипредшественники

1.7. Роль глиальных клеток в развитии коры

1.8. Типы миграций в коре

2.9. Модели детерминации региональной клеточной судьбы в коре головного мозга
1.Ю.Морфогены в определение клеточной судьбы в коре
1 Етх2 и Рахб два градиента
1 Молекулярные маркеры слоев коры ГМ
1 Нарушение развития коры головного мозга и болезни коры головного мозга
2. Результаты и их обсуждения
2.1. Подходы и модели, использованные в работе
2.1.1. Применение метода дифференциального дисплея на модели коры ГМ хорька
2.1.2. Применение вычитакаей гибридизации ка модели коры ГМ мыши
2.2. Анализ дайденнкк генов
2.2.1. Клонирование гомолога гена РТТб крысы из
хорька и мыши
2.2.2. Анализ экспрессии РТТС мыши в эмриогенезе
2.2.3. Идентификация гена 1а4 мыши
2.2.4. Анализ экзонинтронной организации гена
1а Г4 мыши
2.2.5. Анализ сплайсформ мРНК гена 1а4 мыши, экспрессирующихся в постнатальный и эмбриональный
период
2.2.6. Анализ паттерна экспрессии 1а4 в эмбриональной и лостнатальной ткани мозга
2.2.7. Идентификация нового гомеобокссодержащего
гена экспрессирующегося в коре ГМ
2.2.8. Анализ аминокислотной последовательности Ббх
2.2.9. Геномная структура Бх Б
2.2 Анализ паттерна экспрессии ix
2.2 Получение антител против Ббх
2.2 Анализ распределение белка Бтх в развивающейся ЦНС
3. Экспериментальная часть
3.1. Материалы и оборудование
3.2 Методы исследования
Выводы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Многие серьезные заболевания, например, болезнь Паркинсона, лизенцефалия и шизофрения в первую очередь связаны с нарушениями в работе переднего мозга. Часто эти нарушения Сазируатся ка ошибках, произошедших в ходе развития нервней ткани. До сих лор остается много нерешенных вопросов, связанных с процессом развития коры млекопитающих. Одним из наиболее эффективных подходов к решению этой проблемы является поиск и исследование геков, вовлеченных в подобные процессы. Целью настоящей работы была идентификация и анализ новых генов, которые могут быть вовлечены з регуляцию развития коры головного мозга ГМ. Для решения этой задачи мы использовали лве различные стратегии, которые основывались на применении принципиально различных методов дифференциальный дисплей и вычитакхиая гибридизация на нескольких моделях развития коры ГМ кора ГМ . ГМ. Были проведены исследования экспрессии выявленных генов в коре ГМ. Ряд обнаруженных генов являются молекулярными маркерами, которые могут быть использованы как инструмент для изучения развития коры ГМ млекопитающих. Три из них РТТО, 1а С1Х были подвергнуты более детальному анализу, в том числе структурному. Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. Анатомический аспект развития головного мозга. Ка ранних стадиях развития образуются три первичных мозговых пузыря прозекцефалон, мезенцефалон и ромбенцефалон, которые впоследствии преобразуются в передний, средний и задний мсзг 1. Формирование коры головного мозга происходит после так называемой стадии пяти мозговых пузырей, когда передний мозговой пузырь прозе. Латеральные пузыри теленцефалона дорзальная его часть представляют собой будущую кору головного мозга. С образованием латеральных желудочков нейроэпителий, выстилающий их стенки, начинает продуцировать нейроны и глию. Основные этапы развития теленцефалона являются сходными для всех видов млекопитающих. Однако различными являются временные рамки, когда происходят те или иные события. Так, у грызунов развитие коры происходит быстрее, чем у приматов, а также внутри самой группы грызунов наблюдается определенный временной сдвиг. Так, например, временная разница между событиями, происходящими в развитии кортекса крысы и мыши, составляет 1. Она окружена филогенетически более лревними тканями, такими как дрезняя кора, старая кора архи, палеокортекс, соответственно и лимбическая кора атлас либо развитие хоры. Наше внимание в дальнейшем будет сосредоточено в оснсзком на событиях, связанных с развитием новой коры рис. Рисунок 1. А. Сбший план строения конечного мозга. Б. Развернутый вид сверху полусферы коры ГМ. Он состоит из шести основных клеточных слоев. Тангенциально кору или кортекс подразделяют на ряд областей, обладающих характерной функцией. Например, выделяют зрительную область, сенсомоторную, слуховую и т. Нейроны 4го слоя единственные получают информацию изза пределов кортекса. Сюда приходят аксоны, из талямуса. Кроме того, из 23 слоя нейроны посылают свои аксоны в 5тый слой. ЦНС 2. Ненейральные типы клеток в коре головного мозга. Помимо нейронов в коре головного мозга присутствуют глиальные клетки радиальные глиальные клетхи, слигсдендроциты и астроциты, а также зпидемальные клетки и микрохлия. Долгое время считалось, что функция глиальных клеток заключается лишь в поддержание жизнеспособности нейронов 3. Однако в последнее время появились данные о важной роли, по крайней мере, одной из разновидностей глиальных клеток в развитие коры см. Функция другой разновидности глиальных клеток, олигодендроцитов, представляется вполне понятной. Оборачиваясь вокруг аксонов, они создают изоляционные мкелиновые оболочки, что существенно влияет на скорость передачи сигнала по аксонам 4. Еще один многочисленный тип клеток астроциты. Их функция пока мало понятна, но предполагается, что они могут быть вовлечены в регуляцию сообщения между кровью и мозгом. Они имеют контакт не только с нейроном, но и с эндотелиальными клетками кровяных сосудов 6. Другой тип клеток кортекса микроглия, по сути, эквизалентна макрофагам иммунной системы. Они обладают способностью к фагоцитозу и являются производными клеток крови 5.