Молекулярно-биологические основы взаимодействий между вирусами растений

• Автор: Тальянский, Михаил Эммануилович
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 359 c. : ил

Однокомпонентные вирусы могут быть определены как вирусы, полная генетическая информация которых заключена в единственной полинуклеотидной цепи РНК. Молекулы РНК с длиной , меньшей полной длины генома, обнаруживаемые иногда в препаратах однокомпонентных вирусов например, субгеномные РНК, не являются компонентами, необходимыми для репродукции вируса. К этому типу вирусов относятся тобамо, потеке, ПОТИ, ТИМО, карла и некоторые другие фатопатогенные вирусы. У мультикошонентных вирусов генетическая информация распределена меаду двумя или более физически независимыми молекулами фрагментами РНК. Каждый фрагмент в отдельности содержит только часть информации, необходимой для репродукции вируса. Инфекционностыо, таким образом, обладает только полная смесь всех геномных фрагментов РНК мультикомпонентного вируса. К вирусаг с фрагментированный геномом относятся бромо, кукумо, комо, непои многие другие фитовирусы. П. 1. Одним из наиболее изученных вирусов этого типа является ВТМ. РНК ВТМ служит эффективной матрицей при трансляции в бесклеточной белоксинтезирующей системе из бактериальных, животных и растительных клеток, а также в ооцитах амфибий . Основным продуктом трансляции РНК ВТМ как в ооцитах, так и в бесклеточной системвыявляется белок с мол. РХЗО1 2. Б меньших количествах синтезируется I 2. Сумма молекулярных весов двух указанных белков превышает кодирующую емкость генома, что указывает на вероятное перекрывание нуклеотидных последовательностей для синтеза этих белков. Б системе из лизата ретикулоцитов, содер

жащей о метионин, было показано, что оба белка синтезируется

в одной фазе. Использование формилметионина позволило установить, что Аконцевые пептиды у двух белков совпадают иными словами, синтез I и I инициируется в одном к том же участке РЖ 0. При добавлении в систему амберсупрессорной тРЖ синтез I резко возрастает 3. IIвидимому, этот белок образуется в результате проскока амбер терминирующего кодона гена I. Важно, что белки, аналогичные I и I, были обнаружены также в растениях и протопластах, зараженных ВТМ 6. Идентичность белков, образуемых иг i и щ, i , была подтверждена при сравнительном анализе цианбромированных пептидов в полиакриламидном геле 9. Многочисленные, но безуспешные попытки, предпринимавшиеся в течение ряда лет с целью обнаружить структурный белок при трансляции геномной РЖ ВТМ 3 5, позволили предположить, что геномная РЖ ВТМ не является эффективной матрицей для трансляции гена структурного белка, хотя и содержит этот ген. В дальнейшем для удобства белкипродукты трансляции будут обозначаться аналогичными символами. Например, белок с мол. I5, а белок с мол. Ххб как I. БТМ. Эти обстоятельства стимулировали поиск мРНК, активно направляющей синтез структурного белка ВТМ. Такая мРНК Рыла найдена в зараженных растениях и обозначена как СР мРНК. СР мРНК содержит кэпструктуру на конце и состоит из 3 нуклеотидов 3 5. Ее первичная структура расшифрована и соответствует аминокислотной последовательности белка оболочки 5. Важным аргументом в пользу информационных свойств СР мРНК было обнаружение ее во фракции полирибосом зараженных ютеток 4. СР мРНК, выделенная из растений, инфицированных ВТМ, транслируется Сь бх. ВТЫ 3 4 5. СР мРНК соответствует 3хконцевому участку молекулы РНК ВТМ состоящему из 3 нуклеотидов5. Следует отметить, что СР мРНК обычного штамма ВШ ТЛ не включается в состав вирусных частиц, что, очевидно, связано с отсутствием в СР мРНК участка инициации сборки 0а , расположенного на расстоянии 0 нуклеотидов от 3хконца молекулы РНК I I 5. С другой стороны, существуют штаммы ВТМ например, бобовый штамм, у которых СР мРНК включается в состав вирусных частиц 0 1. Недавно установлено, что участок инициации сборки этих штаммов смещен и расположен на расстоянии нуклеотидов от 3хконца молекулы РНК и присутствует, таким образом, в составе СР мРНК 8 9. Наряду с геномной РНК и СР мРНК в клетках, зараженных различными штатами ВТМ , К, бобовый штат обнаруживается гетерогенная популяция вирусспецифических РНК, по крайней мере, часть из которых имеет дискретные размеры . РНК с мол. РНК 2 РНК, РНК с мол. НРНК . Сооьб ръооп, структурный белок.