Сравнительная характеристика цитотоксических белков и апоптотических процессов в клетках лимфоидной и нелимфоидной природы

• Автор: Яшин, Денис Владимирович
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 91 с. : ил.

Оглавление

Список сокращений

Введение

Обзор литерату ры ...и.

Цитолитические лимфоциты Цитолитические Тлнмфоциты

Естественные киллерные клетки ЕКК

Лимфокинактивированные киллеры ЛАК клетки

Механизмы лизиса клетокмишеней

Результаты и обсуждение .

Описание системы

Характеристика механизмов цитотокснчности ЛАК клеток.

Анализ цитотоксических белков ЛАК клеток.
Аноптотическая активность белков ЛАК клеток
Вы воды.
Материалы и методы.
Белки, ферменты и реактивы.
Выделение мембран клеток .
Аффинная хроматография .
Хроматография .
Элекгрофорез и блот.мм .
Вестерн блот анализ
Массспектрометрическнй анализ .
Гельфильтрация
Определение цитолитической активности и.
Определение фрагментации ДНК
Благодарности .
Список литературы


Элекгрофорез и блот. Массспектрометрическнй анализ . Определение цитолитической активности и. Благодарности . Одним из приоритетных направлений современной биологии является изучение молекулярных механизмов иммунитета. Иммунная система защищает организм от инфекций. Различают два типа иммунитета врожденный и адаптивный. Врожденный иммунитет является первой линией обороны против болезней. Клетки врожденного иммунного ответа способны распознавать ограниченный набор молекул на поверхности патогенов и поэтому врожднный иммунитет не может отвечать на некоторые заболевания. Однако его отличает быстрое время реакции на инфекцию. Система адаптивного иммунного ответа базируется на клональном отборе из большого репертуара лимфоцитов, несущих на себе высоко специфичные рецепторы против огромного количества чужих антигенов. Это позволяет иммунной системе распознавать практически любой чужеродный антиген. В адаптивном иммунном ответе антигенспецифичные лимфоциты пролиферируют и дифференцируются в эффекторные клетки для того, чтобы уничтожить патоген. Клетки адаптивного иммунитета способны не только уничтожить патоген, но и, базируясь на клональном отборе, образовать долгоживущую популяцию клеток памяти, способных на более быстрый и эффективный иммунный ответ при повторном заражении. Известно, что ключевую роль в уничтожении опасных для организма клеток, таких как зараженные вирусом клетки и раковые клетки, выполняют цитолитические лимфоциты. Описаны два вида цитолитических лимфоцитов цитолитические Тлимфоциты и естественные киллеры. Однако для всех цитолитических лимфоцитов предполагается существование единых механизмов лизиса клеток. При взаимодействии рецепторов цитолитических лимфоцитов с чужеродными антигенными детерминантами происходит активация эффектора. При этом повышается уровень экспрессии генов цитотоксических белков и происходит встраивание этих белков в мембрану или секреция их в зону контакта. При взаимодействии клетокмишеней с цитотоксическими белками клетки гибнут. На сегодняшний день известно огромное количество цитотоксических белков, выделяемых клетками иммунной системы. Наиболее известными из них являются такие белки как фактор некроза опухолей , I, лиганд, лимфотоксины, уинтерферон, перфорин. Но трудно объяснить цитолитическое действие лимфоцитов лишь описанными белками. Поэтому изучение цитотоксических белков и механизмов их действия может способствовать лучшему пониманию механизмов действия иммунной системы. Обзор литерату ры. Цитолитическне лимфоциты. Защита организма от вредного воздействия патогенных бактерий, вирусов, злокачественных образований осуществляется клетками иммунной системы. Основная роль в уничтожении ставших опасными для организма собственных клеток зараженных вирусом или трансформировавшихся в раковые отводится цитолитическим лимфоцитам. Как уже упоминалось, существует два вида цитолитических лимфоцитов цитолитическне Тлимфоциты и естественные киллеры. Они различаются происхождением, представленными на поверхности антигенами и специфичностью лизиса клетокмишеней. Цитолитическне Тлимфоциты. Тлимфоциты являются важнейшей составной частью адаптивного иммунного ответа. Предшественники Тлимфоцитов генерируются в костном мозге, и несут на себе маркер . Далее предшественник мигрирует в специальный орган иммунной системы тимус, где и происходит созревание, дальнейшее развитие и дифференцировка Тлимфоцитов. Незрелые тимоциты несут на клеточной мембране поверхностные маркеры 2, и , а также экспрессируют ключевой фермент , ответственный за перестройку иммуноглобулиновых генов и генов Тклеточных рецепторов. Ферменты этого семейства ответственны за генерацию Т и Влимфоцитами широкого репертуара рецепторов, потенциально способных к узнаванию практически любых молекул. Разница между иммуноглобулинами и Тклеточным рецептором заключается в том, что Тклеточный рецептор способен узнавать антигены лишь в комплексе с соответствующим комплексом гистосовместимости МНС.