Меченный фосфором-32 3'-азидо-3'-дезокситимидин-5'-холинфосфат - ингибитор репликации ВИЧ, его получение и метаболизм в клетке

• Автор: Январёв, Дмитрий Васильевич
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 74 с. : ил.

1. Список сокращений.стр.

2. Литературный обзор. Методы получения нуклеозид 5монофосфатов и их применение для синтеза Рмеченых нуклеотидов

2.1 Прямое фосфорилирование действием фосфорной кислоты и е солей.стр.

2.2 Фосфорилирование через активацию гидроксильной группы

2.2.1 Активация арилсульфохлоридами стр.

2.2.2 Активация металлорганическими соединениями стр.

2.3 Этерификация моноэфирами фосфорной кислоты стр.

2.4 Триалкилфосфиты как фосфорилирующие агенты.стр.

2.5 Галогениды фосфора стр.

2.6 Агенты, активирующие фосфорную компоненту

2.6.1 Карбодиимиды стр.

2.6.2 Арилсульфохлориды.стр.
2.7 Другие фосфорилирующие реагентыстр.
2.8 Биосинтетические и ферментативные методы фосфорилированиястр.
3. Результаты и обсуждение
3.1 Синтез 3 азидо2 ,3 дидезокситимидин5 холинРфосфата.стр.
3.2 Изучение внутриклеточного метаболизма
3азидо дидезокситимидин5холинРфосфата стр.
3.3 Оценка ферментативной стабильности.стр.
4. Экспериментальная часть.стр.
5. Список литературы.стр.
6. Приложение. Исследование противовирусной активности и
цитотоксичности 3азидоЗгдезокситимидин5холинфосфата.стр.
Список сокращений
1. кИ 3 азидодидезокситимидин
2. ВизЫ тринбутиламин
3. 5СМР цитидин5монофосфат
4. 3СМР цитидин3монофосфат
5. ОСС дициклогексилкарбодиимид
6. ВАЬН диизобутилалюминийгидрид
7. ИМР диметилформамид
8. ИМБО диметилсульфоксид
9. 5ШР инозин5дифосфат .3ГОР инозин3дифосфат
. 5ЧМР инозин5монофосфат
. ЗЧМР инозин3монофбсфат
. МзС,4,6триметилбензолсульфохлорид .5ЫиМР 5нуклеозидмонофосфат
.3шМР Знуклеозидмонофосфат
. Ш8 Агидроксисукцинимид
. Ру пиридин
.5ЛЮР 5 тимидиндифосфат .5ТМР5тимидинмонофосфат .3ТМРЗтимидинмонофосфат
. ТР8С1 2,4,6триизопропилбензолсульфохлорид
. 5иМР уридин5монофосфат
. Тритил трифенилметил
. ХФА2Т Зазидо дидезокситимидин5холинфосфат
. ТЕАВ бикарбонат триэтиламмония
. ТСК трихлорацетонитрил
. Ии нуклеозид
. Ю концентрация, при которой наблюдается подавление вируса .1С концентрация, при которой наблюдается подавление вируса . СС концентрация, вызывающая гибель неинфицированных клеток . индекс селективности. СС 1С
. ЕЫ нитроэтан
. 4 полинуклеотидкиназа фага Т
. 2,4,6триизопропилбензолсульфокислота
. ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография
. МСС морфолиноэтил циклогексил карбодиимид
. i метилимидазол
2. Литературный обзор. Методы получения нуклеозид 5монофосфатов и их применение для синтеза Рмеченых нуклеотидов
Введение


Работа выполнена в Лаборатории химического и биологического анализа биополимеров и клеток Института молекулярной биологии им В. Широкова Е. Туницкая В. Институт молекулярной биологии им. В.А. Лебедев Ю. Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю. Защита диссертации состоится . Диссертационного совета Д 2. Институте молекулярной биологии им В. А. Энгельгардта РАН по адресу , Москва, ул. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института молекулярной биологии им В. Автореферат разослан года. Крицын А. Список сокращений. Литературный обзор. Прямое фосфорилирование действием фосфорной кислоты и е солей. Активация арилсульфохлоридами стр. Активация металлорганическими соединениями стр. Этерификация моноэфирами фосфорной кислоты стр. Триалкилфосфиты как фосфорилирующие агенты. Галогениды фосфора стр. Карбодиимиды стр. Арилсульфохлориды. Другие фосфорилирующие реагентыстр. Биосинтетические и ферментативные методы фосфорилированиястр. Синтез 3 азидо2 ,3 дидезокситимидин5 холинРфосфата. Рфосфата стр. Оценка ферментативной стабильности. Экспериментальная часть. Список литературы. Приложение. Згдезокситимидин5холинфосфата. ИМР диметилформамид
8. ШР инозин5дифосфат . МзС,4,6триметилбензолсульфохлорид . ЛЮР 5 тимидиндифосфат . ТМР5тимидинмонофосфат . Ю концентрация, при которой наблюдается подавление вируса . С концентрация, при которой наблюдается подавление вируса . СС концентрация, вызывающая гибель неинфицированных клеток . Литературный обзор. В живых организмах содержание фосфора достигает 1. Большая часть находится в костных, нервных и мышечных тканях. Фосфор активно участвует в энергообмене клетки, входит в состав мембран и многих клеточных ферментов. В настоящее время химическое фосфорилирование находит широкое применение для решения различных биохимических задач, например, для модификации фосфором природных соединений, синтеза природных соединений, имеющих в свом составе атом фосфора, а также для изучения метаболизма соединений в клетке и организме с помощью радиоактивного изотопа фосфора. Высокая специфическая активность, простота детекции и доступность исходных соединений, содержащих Р, делают этот изотоп удобным инструментом в исследовательской работе. Незначительно проигрывая в энергии частицы, изотопР имеет вдвое больший период полураспада, но его высокая стоимость ограничивает его использование в биохимии. Нами ставилась задача рассмотреть различные методы создания фосфоэфирной связи, классифицировать их и выбрать наиболее перспективные с точки зрения радиоактивного синтеза.