Наследственные заболевания человека как часть проблемы изменчивости генома эукариот

• Автор: Патрушев, Лев Иванович
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 51 с. : ил.; 20х14 см

Работа выполнена в Институте биоорган и ческой химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии Наук и Всероссийском научном центре молекулярной диагностики и лечения.

Официальные оппоненты

Ведущая организация

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Защита состоится ноября года в часов на заседании специализированного Совета Д 2.9. по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора биологических наук при Институте биооргапической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН по адресу ГСП7, Москва В, ул. МиклухоМаклая .
С диссертацией в виде научного доклада можно ознакомиться в библиотеке Института биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН.

Диссертация в виде научного доклада разослана октября г.

членкорреспондент РАН, профессор доктор биологических наук, профессор доктор биологических наук, профессор
С.В. Разин

В.В. Месянжинов Н.К. Янковский

Ученый секретарь Специализированного совета доктор химических наук, профессор

Актуальность


Направленным мутагенезом проведена замена двух аминокислотных остатков в полипсп гидной цепи фермента, что резко повысило его сродство к дидсзоксирибонуклеозидтрифосфатам терминаторам синтеза ДНК, используем,i при секвенировании ДНК но методу Сонгера. ПЦРанализа марксров в геномной ДНК человека. На основе препаратов рекомбинантной и модифицированной ТяДНКполимеразы создана универсальная высокоэффективная система ПЦРанализа точковых мутаций в геномной ДИК. Один из новых вариантов системы аллельспецифической ПЦР, в которой используются разработанные нами универсальные аллельспецифичсскис праймеры, позволяет обнаруживать неизвестные точковые мутации, небольшие делении и вставки в гомозиготном состоянии и у гаплоидных организмов iiv, v, , Зыкова и др. Патрушев и др. Разработанная система ПЦРанализа маркеров была впервые использована для анализа распространенности среди здоровых лиц г. Москвы, а также пациентов московских клиник трех мутаций, ассоциированных с тромбофилнями V i в гене фактора V, 0 в гене протромбина и С7Т в гене МТГФР Шполяиская и др. Озолиня и др. Патрушев и др. Впервые установлено, что вышеупомянутые мутации широко распространены среди населения г. Москвы, которое по этому показателю занимает промежуточное положение между популяциями Восточной Азии и Западной Европы. Разработанные системы ДНКдиагностики в настоящее время активно используются в клинической практике, что способствует предотвращению развития тромбозов и проведению их адекватного лечения Макаров и др. Бокарев и др. Решетник и др. Варданян и др. В результате теоретического анализа молекулярных механизмов спонтанного мутагенеза в геноме человека и других эукариот, разработана количественная модель, раскрывающая новую, неизвестную ранее функцию некодирующих последовательностей их генома v, , Патрушев, , Патрушев, Минкевич, . Показано, что данные последовательности обеспечивают многоуровневую защиту кодирующих последовательностей генома от химических главным образом эндогенных мутагенов. Полученные результаты указывают на возможный путь эволюции эукариотического генома, а также создают основу для разработки новых подходов к предотвращению возникновения мутаций в жизненно важных генах человека, а следовательно, его врожденных и приобретенных заболеваний. Апробацин полученных результатов. Российской Федерации Новые направления биотехнологии, Пущино на Оке, Всероссийском симпозиуме Молекулярнобиологические подходы к диагностике тромбофилий Москва, Первой всероссийской научнопрактической конференции Применение полимеразной цепной реакции для диагностики инфекционных заболеваний. Методы лечения Сочи, i i i i i i , , Третьей всероссийской конференции Тромбозы, геморрагии, ДВСсиндром. Проблемы лечения Москва, м, м, м м и м Конгрессах международного общества по исследованию тромбозов и гемостаза I , Вашингтон, США, , Париж, Франция, , Бирмингем, Великобритания, , Сидней, Австралия, на 4х, 5х, 6х и 7х чтениях, посвященных памяти академика Ю. А.Овчинникова МоскваПущино, , , , 2м Российском форуме Мать и дитя Москва . Основные результаты работы и выводы изложены в обобщенном виде в настоящем докладе. Работа выполнена в гг. Публикации. По материалам диссертации опубликовано работ 2 мошлрафии, 1 глава в книге, статей в рецензируемых журналах. Личный вклад автора. Автору принадлежит основная роль в выборе направления исследований, разработке и экспериментальной проверке предложенных в настоящей работе путей решения поставленных целей и задач, обсуждении, обобщении и оформлении полученных результатов. В работах, выполненных совместно с врачамиклиницистами, автор осуществлял и координировал проведение молекулярногенетической части исследований. Работа, результаты которой изложены в настоящем автореферате, заключает в себе три основных этапа 1 разработку универсальной системы ПЦРдиагностики для выявления толковых мутаций в геноме человека 2 использование разработанных систем ДПКдиагностики для исследования частот встречаемости мутаций, ассоциированных с тромбофилиями, у пациентов московских клиник при разных патологиях 3 разработку количественной модели, выявляющей новый механизм контроля возникновения спонтанных мутаций в геноме человека и других эукариотических организмов.