Контактные взаимодействия и пролиферативная активность клеток в легком у мышей in vivo

• Автор: Касаткина, Наталия Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 135 c. : ил

1.1. Регуляция пролиферации в нормальных

тканях

1.1.1. Контактное торможение размножения тл

клеток

1.1.2. Кейлонытканспщфйчски йнгйбй

торы деления клеток.

1.1.3. Эндогенные стимуляторы деления клеток

1.2. Свойства межклеточных контактов и реакция на уретан тканей мышей инбредных линий, отличающихся по генетической предрасположенности к возникновению ои

спонтанных опухолей .

1.2.1. Предрасположенность мышей инбредных

ЛИНИЙ К возникновению опухолей .

1.2.2. Свойства межклеточных контактов в тканях, отличающихся по генетической предрасположенности
1.2.3. Реакция на уретан тканей, отличающихся по генетической предрасположенности к возникновению спонтанных опухолей
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Экспериментальные животные
2.2. Объекты исследования печень и легкие
мышей инбредных линий
2.3. Препараты
2.3.1. Уретан.
2.3.2. Конгактин
2.4. Методы
2.4.1. Метод измерения силы сцепления
клеток
2.4.2. Метод диспергирования .
2.4.3. Метод радиоавтографии .
2.4.4. Индукция опухолей уретаном .
2.5. Примечание, математическая обработка.
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Изменение механических свойств клеток в стенках альвеол у мышей чувствительной А и резистентной СБ7В1 линий в ответ на однократное введение уретана .
3.2. Изменения силы сцепления клеток и числа выделяемых ядер в печени у мышей линии АНе и СВА в ответ на введение уретана
3.3. Пролиферативная активность легкого в чувствительной АНе и резистентной СВ1 линии после введения уретана .
3.5. Динамика реакции на удетан лимфоидных органов мышей линии АНе .
3.4. Корреляционный анализ изменений механических свойств и пролиферативной активности легких у мышей
3.6. Действие контактна из легкого на силу сцепления и пролиферативную активность клеток стенки альвеолы i viv .
3.6.1. Определение активных концентраций препаратов контактина .
3.6.2. Действие контактина на синтез ДНК
i viv .
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. Оценка изменений прочности межклеточных контактов и клеточной поверхности по силе сцепления клеток и числу выделяемых ядер
4.2. Связь между сцеплением клеток и интенсивностью пролиферации клеток в ткани легкого i VXV .
4.3. Отличия в динамике пролиферативной активности клеток и механических свойств тканей, генетически предрасположенных и устойчивых к возникновению спонтанных опухолей, после введения уретана
4.4., Заключение
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


На тканевом уровне рецуляция пролиферативной активности осуществляется с помощью межклеточных взаимодействий. Взаимодействие клеток в тканях может осуществляться как локально с помощью межклеточных контактов, так и дистанционно с помощью специфических веществ, выделяемых одними клетками и переносимыми по кровяному руслу к другим клеткам. В настоящее время обнаружено влияние обоих типов клеточных взаимодействий на пролиферативную активность ткани. Локальная регуляция пролиферативной активности клеток была обнаружена при изучении роста монослойных культур i vi, и в настоящее время продолжается изучение этого вопроса в основном на тех же системах клеточных культурах. Представление о существовании тканеспецифических ингибиторов деления клеток кейлонов сложилось при изучении вопроса о том, каким образом в тканях поддерживается постоянство клеточного состава. В I0 году О. Иверсен впервые предложил для объяснения этого явления применить принцип отрицательной обратной связи. Суть этой гипотезы заключается в том, что каждая ткань состоит из пролиферирующих и дифференцированных клеток, и для поддержания равновесного состояния между ними необходима связь . Согласно О. Предполагается, что в этом случае концентрация ингибитора клеточного деления становится определяющей в поддержании тканевого гомеостаза. Действительно, уменьшение концентрации ингибитора, которое может быть вызвано гибелью или старением клеток, приводит к немедленному увеличению пролиферации и последующему восполнению дефицита. Таким образом, принцип отрицательной обратной связи явился теоретическим обоснованием существования кейлонов, которые впоследствии и были открыты. Долгое время исследования двух аспектов регуляции деления клеток в тканях с помощью межклеточных контактов и специфических веществ развивались независимо и практически не пересекались. Мы рассмотрим основные результаты каждого из этих направлений и остановимся на данных, указывающих на возможную связь между ними. При изучении жизнедеятельности клеток в монослойной культуре было установлено, что вслед за латентной фазой, когда клетки не пролиферируют, и фазой роста, когда идет быстрое часто экспоненциальное увеличение числа клеток, наступает стационарная фаза. В этой фазе число клеток остается на постоянном уровне число делящихся клеток урановешивает число гибнущих II. Плотность популяции в этой фазе получила название конечной плотности, плотности насыщения, максимальной плотности, а снижение пролиферации при переходе в стационарную фазу зависимым от плотности торможением размножения, топоингибированием или контактным торможением размножения КТР , , , . При уменьшении плотности клеток при пассировании или удалении части монослоя клетки размножаются до тех пор, пока вновь не достигнут
указанной плотности. Плотность насыщения является характерным свойством каждой линии культуры клеток. Торможение размножения, зависимое от плотности, в культуре, рассматривается как отражение регуляции размножения клеток i viv, например,при заживлении ран. Характерной особенностью контактного торможения размножения является то, что регуляция размножения носит локальный характер. Наиболее четкие доказательства локального характера регуляции плотностью были получены в опытах с ранением монослоя. Если удалить часть пласта плотной стационарной культуры, не меняя среды, то на освободившееся место в рану мигрируют клетки в отличие от нетронутых частей монослоя эти клетки начинают синтезировать ДНК и делиться. Этот феномен был продемонстрирован для разных типов культур эпителиальных и фибробластоподобных клеток II, 7, 8. В пределах одной культуры также была обнаружена зависимость доли ДНКсинтезирующих клеток от локальной плотности монослоя . КТР есть локальный эффект, действующий на расстояниях, не превышающих 0 мкм, т. Отсюда следует, что КТР должно существенно зависеть от морфологии культуры, от локальных взаимоотношений между клетками. Однако, пока не установлено, какие именно морфологические черты культуры связаны с КТР. В настоящее время механизмы КТР неясны и являются предметом оживленных дискуссий.