Отличие миеломных иммуноглобулинов G от нормальных по ориентации и устойчивости к поверхностной денатурации в мономолекулярных слоях

• Автор: Матвеева, Нина Александровна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 129 c. : ил

1. ВВЕДЕНИЕ .

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ .

Глава 2.1. Строение молекулы иммуноглобулина

I. Роль иммуноглобулинов в иммунном

ответе. Подклассы .

2. Первичная структура молекулы. Дисульфид

ные связи

. 3. Домены и организация фрагментов. Размеры

молекулы г .

4, Миелсмные иммуноглобулины объект, с помощью которого была выяснена структура

молекулы иммуноглобулина

Глава 2.2. Сравнительная характеристика свойств
нормальных и миеломных иммуноглобулинов. I. Общие закономерности, наблюдаемые в строении нормальных и миеломных иммуноглобулинов 2. О некоторых отличиях свойств миеломных иммуноглобулинов от нормальных, обнару
живаемых различными методами
3. Две точки зрения на природу миеломных иммуноглобулинов и их экспериментальное
обоснование
4. Предполагаемый характер различий между нормальными и миеломными иммуноглобули нами и возможность эксперименталь ного изучения этих различий
Глава 2.3. Применение метода монослоев к изучению
белков
I. Сущность метода монослоев
2 Характер информации, получаемой при изучении монослоев белков
3. Монослои иммуноглобулинов.
4. Монослои белков как модель для изучения их поведения на биологических мембранах. Иммуноглобулиновые рецепторы лимфоцитов. 2 5. Монослои белков на границе водамасло.
б. Цели и задачи данного исследования
, ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 3.1. Материалы и методы
I. Измерение поверхностного давления.
2. Измерение поверхностного потенциала
3. Препараты
4. Методика нанесения монослоя. Определение конформации и ориентации молекул из
зависимостей.
Глава 3.2. Результаты и оОсувдение
I. Определение изоэлектрической точки белка в монослое на границе водавоздух. Зависимость конформационной стабильности Уи от водной фазы .
2. Сравнительная характеристика поведения в монослоях поликлональных нормальной сыворотки и более гомогенных противо
гаптенных V антител .
3. Конформационная стабильность и ориентация в монослоях на границе водавоздух миеломных V человека .
4. Изучение монослоев на границе
водамасло
5. Индивидуальные различия между миеломными белками, обнаруживаемые в монослоях
на границе водамасло
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Следует подчеркнуть, что моле
кула на границе раздела водавоздух, и особенно на границе водамасло, находится в условиях,аналогичных в какойто мере ее окружению на биологической мембране. Хотя монослои разнообразных белков изучены достаточно подробно, известно всего несколько работ по монослоям иммуноглобулинов Валено отметить, что подавляющее большинство работ посвящено изучению белковых монослоев, состоящих из молекул, полностью утративших третичную структуру. Целью данной работы является сравнительное изучение поведения нативных молекул нормальных и миеломных иммуноглобулинов в монослоях на поверхностях раздела водавоздух и водамасло . ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Глава 2. I. Роль иммуноглобулинов в иммунном ответе. Иммуноглобулины С наиболее подробно изученный класс иммуноглобулинов. Это объясняется двумя причинами. Вопервых, составляют основную массу иммуноглобулинов сыворотки от общего количества , ,,3 и поэтому представляют собой наиболее доступный ооъект для изучения. Вовторых, что особенно следует подчеркнуть, они выполняют в иммунном ответе две важные функции. Являясь рецепторными белками лимфоцитов иммунологической памяти, они включают клетку в процесс клональной пролиферации ,, 0. Конечным итогом клональной пролиферации лимфоцитов является синтез антител против данного антигена. Молекулы антител ответственны за гуморальный иммунный ответ, то есть за иммобилизацию антигена, его разрушение и вывод из организма. Большая часть антител относится к классу ,,,,,3. Почти у всех подробно изученных вцдов животных имеется несколько подклассов , обозначаемых обычно буквами и и и и п у человека найдено четыре подкласса , Из них белков подкласса i содержится больше всего от общего количества иммуноглобулинов
. Молекулы разных подклассов обладают несколько отличающимися друг от друга биологическими свойствами. Функции и биологическая активность антител тесно связаны с их строением. Изучение строения молекул иммуногло булинов позволило установить причину их высокой специфичности по отношению к соответствующим антигенам. Выяснение генетической основы разнообразия антител имеет огромное значение не только для иммунологии, но и для биологии. Если структурные основы высокой специфичности антител изучены достаточно полно и подробно, то связь конформации молекул о выполняемыми ими эффекторными функциями окончательно не выяснена. Установлена локализация участков молекулы, отвечающих за те или иные эффекторные функции. Неясным остается конкретный механизм конформационных перестроек молекул, происходящих после взаимодействия с антигеном и приводящих к активации центров, связывающих комплемент,или к передаче сигнала о начале клеточной пролиферации от мем бранных 3 к внутриклеточным органеллам. Первичная структура молекулы. Дисульфидные связи. Как и все иммуноглооулины, является гликопротеидом содержание углеводов в нем составляет около 3 ,, ,. Молекулярный вес иммуноглобулинов различных видов животных равен тыс. С 1л цепей примерно 0 аминокислотных остатков, молекулярный вес тыс. Анализ первичной структуры тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов показывает наличие двух резко отличающихся друг от друга областей вариабельной, или изменчивой V Л И постоянной С рис. С областей тяжелых цепей. Аминокислотные последовательности Собластей легких цепей обусловливают различия между двумя типами легких цепей каппа ЭС и лямбда Л. Молекулы иммуноглобулинов определенного класса подкласса и типа отличаются друг от друга только по аминокислотной последовательности Уобластей, зависящей от специфичности антител, тогда как Собласти у них идентичны, за исключением небольших отличий, обусловливающих аллотипические вариации ,6. Различия между аминокислотными последовательностями Vобластей в большинстве своем сгруппированы в нескольких определенных участках гипервариабельных участках. Эти участки, очевидно, играют главную роль в формировании активного центра антител ,. Вариабельные и константные области легких цепей приблизительно равны по длине. Так у каппацепей человека Уобласти строятся из аминокислотных остатков начиная с ДО конца, а на Сбласть приходятся остальные 7 остатков.