Фотолиз мероцианина-540: биологическая активность фотопродуктов

• Автор: Козырь, Людмила Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 121 с. : ил.

1.1. Спектральные свойства мероцианипа

1.1.1. Влияние полярности растворителя

1.1.2. Влияние растворителя

1.1.3. Влияние катионов

1.1.4. Влияние микроокружения

. Типы фотохимических реакций фогосенсибилизаторов

1.3. Фотохимические реакции мероцианина

1.3.1.Биологическая активность фотопродуктов мероцианипа

1.4. Современные представления о механизмах развития реакций замедленного типа ГЗТ и КЧ

Глава 2. Материалы и методы

Глава 3. Результаты и обсуждение

3.1. Спеюграпьные и фотохимические свойства МЦ
3.1.1. Зависимость спектров поглощения и возбуждения флуоресценции МЦ0 от растворителя
3.1.2. Фотолиз МЦ0 в водных и этанольпых растворах
3.2. Действие МЦ0 и его фотопродуктов на эритроциты и метгемоглобин
3.2.1. Гемолиз, индуцированный необлученным и фотоокнеленным МЦ
3.2.2. Превращения метгемоглобина, индуцированные предоблученным МЦ
3.3. Влияние продуктов фотоокислення МЦ0 на реакции гиперчувствительности замедленного типа у мышей
3.3.1 Модуляция фотопродуктами МЦ0 реакции гиперчувствительности замедленного типа ГЗТ к эритроцитам барана
3.3.2. Супрессорное действие продуктов фотодеградации МЦ0 на реакцию контактной чувствителыюсти.КЧ к 2,4линигрофторбензолу ДНФБ и оксазолону у мышей
3.3.3. Выяснение иммунных механизмов супрессии реакции КЧ, обусловленной продуктами фото деградации МЦ
Ослабление функций эффекторов КЧ Активация клеток с супрессорным потенциалом
3.4. Супрессорное действие фотоокислсиного нсоралепа ФОП на реакцию контактной чувствительности КЧ у мышей.
3.4.1. Изучение лозовых зависимостей ФОП на реакцию КЧ
3.4.2. Выявление специфичности супрессорного действия ФОП на
ВЫВОДЫ Список литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АГ антиген
АПК антигенпрезентирующая клетка
ГЗТ реакция гиперчувствительности замедленного типа
ДНФБ 2,4динитрофторбензол
КЧ реакция контактно чувствительности
МЦ0 мероцианин
пМЦ0 предоблученный мероцианин
УФА ультрафиолет диапазона А
ФБР фосфатнобуферный солевой раствор
ФДТ фотодинамическая терапия.
ФОП фотоокисленный нсоралсн
ФС фотосенсибилизатор
ВВЕДЕНИЕ


В литературе предполагается, что противоопухолевая активность ФДТ с использованием МЦ0 может быть следствием действия его фотопродуктов. Гак, например, обнаружено, что продукты фотоокисления МЦ0, полученные путем облучения данного ФС, способны ингибировать пролиферацию, вызывать апоптоз и некроз различных типов опухолевых клеток в культурах i vi. Показано также, что введение фотопродуктов МЦ0 мышам с привитыми опухолями, приводит к замедлению роста и деградации опухолей i . До сих пор остается неясным, могут ли перечисленные биологические эффекты фотопродуктов МЦ0 быть следствием повреждения мембран клеток. В этой связи изучение мембранотоксических свойств фотопродуктов МЦ0 является актуальным. С другой стороны известно, что одним из механизмов противоопухолевой активности ФДТ, например с такими красителями, как порфирины и хлорины, может быть влияние ФДТ на иммунную систему , i , . Известно так же, что проведение ФДТ с упомянутыми красителями часто сопровождается угнетением Тклеточного иммунитета ii . ЛК. В литсрагурс отсутствуют данные о том, могут ли фотопродукты МЦ0 влиять на Тклеточный иммунный ответ i viv. В этой связи изучение эффектов фотопродуктов на иммунную систему также является актуальным. Изучить фотофизические и фотохимические свойства МЦ0 и оценить биологическую активность его фотопродуктов. Изучить методами спектрофотомерии и спектрофлуориметрии влияние растворителя на агрегацию и фотолиз МЦ0. Исследовать мембранотоксические свойства фотопродуктов МЦ0 пМЦ0 на модели гемолиза. Изучить действие пМЦ0 па Тклеточный иммунный ответ i viv в моделях реакций гипсрчувствительносгп замедленного типа и контактной чувствительности у мышей и сравнить с эффектами фотоокисленного псоралена. Для него характерно внутримолекулярное донороакцепторное взаимодействие, при котором происходит перераспределение яэлектронов. При этом у остатка бензоксазила образуется небольшой избыточный положительный заряд, а на остатке тиобарбитуровой кислоты у группы С0 образуется частично отрицательный заряд, и в целом молекула является очень сильным электрическим диполем Сипбегйкоуа В. ЭИсигоуа Ь. Рис. МЦ0 гидрофобное соединение без запаха, плохо растворяемое в воде, но хорошо растворяемое в спиртах, или в смеси спиртвода . В растворах МЦ0 присутствует как в виде мономеров, так и в виде агрегатов. Известны димеры, состоящие из двух мономеров, и агрегаты более высоких порядков ВИвка Р. Физикохимические свойства МС0 в значительной степени определяются составом растворителя и агрегатным состоянием, в котором находится краситель кигоуа Ь. Влияние раствори геля па положение максимумов поглощения и флуоресценции приведены в таблице 1. Растворитель X аь, ИМ ч. Вода 0 3 0. Метанол 4 7 0. Этанол 8 9 0. Ацетон 9 0 0. Пропанол 1 1 . Хлороформ 8 9 0. Таблица 1. X максимум поглощения, ч,максимум флуоресценции Хдлипа волны возбуждающего света 0 им, р квантовый выход флуоресценции, с, диэлектрическая постоянная, п коэфициент преломления. В iv . Из таблицы видно, что с уменьшением полярности растворителя происходит смещение полос поглощения и флуоресценции в длинноволновую область спектра и уменьшается стоксовский сдвиг полосы флуоресценции относительно полосы поглощения. МЦ0 при переходе в возбужденное состояние становится меньше, чем в основном состоянии. Помимо влияния на положение максимумов поглощения и флуоресценции от полярности растворителя также сильно зависит соотношение мономерных и агрегированных форм красителя. В неполярных растворителях преобладает мономерная форма красителя, хотя димеры и более крупные агрегаты тоже присутствуют в небольшом количестве. Р. а. Судя по спектрам поглощения, наибольшее содержание димеров наблюдается в водных растворах. Спектральные параметры водных растворов рассмотрим в разделе 3. Результаты и обсуждение. В метаноле МЦ0 присутствует в основном в мономерной форме, и максимум его флуоресценции располагается около 0 нм. Правило зеркальной симметрии спектра флуоресценции и длинноволновой полосы спектра поглощения соблюдаются не полностью. Давила с соавторами vi . МС0 отличаются друг от друга структурой колебательных уровней.