Исследование роли фуриноподобных протеиназ и металлопротеиназы МТ1-ММР в патологических процессах

• Автор: Чеканов, Алексей Владимирович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 97 с. : ил.

Общие представления о нротеазах и их роли в биологических процессах. Протеазы. Роль протсолиза в бактериальных инфекционных заболеваниях. Связывание РА с клетками мешенями. Ферментативная активность. Матриксная металлопротеиназа мембранного типа МТ1ММР. Антитела, белки и клеточные линии. Разделение цитоплазматической и ядерной фракций. Определение цитотоксичности Л7. Интернализация биотинмеченых РА и ЬТ. Экспрессия и очистка белков. Расщепление протеиназой белковых субстратов. Гидролиз пептидов протеиназой . Определение протеолитической активности с помощью флюоресцентных пептидов. Модель рака молочной железы в иммунодефицитных мышах. РЕЗУЛЬТАТЫ. Расщепление РА пропротеинконвертазами. Эндоцитоз и расщепление РА. Интернализация смешанных РАРА гептамеров мышиными макрофагами. Иммунофлуоресцентная микроскопия. Серпины и пептиды на основе аргинина как ингибиторы 3. Определение хромосомной нестабильности в эпителиальных клетках молочной железы человека 4В5. Роль МТ1ММР в хромосомной нестабильности и онкогенезе. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ. ИА. У4. МЗР основной белок миелина. ВВЕДЕНИЕ. Протеолиз и участвующие в нем протеиназы регулируют важнейшие этапы жизнедеятельности и метаболизма клетки. Протеиназы важны для всех живых организмов, включая вирусы, бактерии и эукариотические организмы. Кроме того, протеолиз является неотъемлемой частью, а в ряде случаев и причиной многих патологических процессов. Так вирулентные протеазы играют важную роль в инфекционных заболеваниях, вызываемых бактериями и вирусами. Многие вирусы, такие как ВИЧ, гепатит С, вирусы Лихорадки Западного Нила, Желтой Лихорадки, полиомиелита и гриппа содержат гены протеиназ, необходимые для жизненного цикла вируса, преодоления механизмов клеточной защиты и контроля над метаболизмом клеток. Секреторные протеиназы патогенных бактерий зачастую являются их важнейшими вирулентными факторами. Протеиназы активируют белковые токсины бактерий. Абнормальный протеолиз характерен для роста и метастазирования злокачественных опухолей. Цель нашей работы состояла в исследовании роли фуриноподобных протеиназ и металлопротеиназы МТ1ММР в патологических процессах. Первой задачей нашей работы являлось исследование взаимодействия человеческих фуриновых протеиназ с транспортными белками и ферментами, определяющими токсичность летального токсина сибирской язвы. Эта система включает токсин сибирской язвы, рецепторы токсина, находящиеся на поверхности человеческих клеток, и человеческие фуриновые протеиназы, необходимые для процессинга компонентов токсина и его последующей интернализации человеческой клеткой.