Физико-химические механизмы трансмембранной активации лимфоцитов лектинами

• Автор: Шестакова, Светлана Васильевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 160 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Рецепторы лектинов поверхности плазматических мембран

2. Физикохимические состояния рецепторов митоге

нов в плазматических мембранах

3. Взаимодействие митогенов с компонентами плазматической мембраны

4. Распределение ионов кальция в лимфоцитах

5. Роль трансмембранного переноса ионов в активации лимфоцитов

6. Роль ионов кальция в образовании кэпов

7. Определение трансмембранного потенциала клеток

с помощью флуоресцентных красителей
Глава П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Глава Ш. ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
1. Описание феномена образования кэпов рецепторов КонАФИТЦ
2. Температурная зависимость процесса перераспределения рецепторов
3. Влияние метаболических ингибиторов на образование кэпов
4. Влияние концентрации лектина на процесс образования кэпов
5. Ограничение подвижности рецепторов плазматической мембраны
6. Динамика митогенрецепторных взаимодействий
7. Суммирование сигналов от разных рецепторов
во времени
8. Особая роль клеток, рецепторы которых длительно не исчезают с клеточной поверхности в транс мембранной активации лимфоцитов
9. Количественные характеристики процесса взаимодействия рецепторов плазматической мембраны лимфоцитов меченным радиоактивным тритием КонА
. Количественное определение связывания меченного КонА
. Влияние преинкубации клеток с митогенными концентрациями КонА на последующие связывание меченного лектина обработанными клетками
. Различия в зависимости эффекта стимуляции лимфоцитов от количества рецепторов, оккупированных с самого начала инкубации и от количества рецепторов, оставшихся связанными после взаимо действия с гаптенными углеводами
. Биохимические параметры активации лимфоцитов. Роль ионов кальция в активации лимфоцитов
Использование метода флуоресценции хлортетрациклина для изучения ассоциации ионов кальция с лимфоцитами
. Трансмембранный потенциал лимфоцитов
УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


На основании экспериментальных данных установлено одновременное существование твердой и жидкой фазы липидов ii . . ЗОВЫХ ПереХОДОВ , . Таким образом, вследствие происходящего изза гетерогенности липидов разделения фаз в мембране имеются участки как с твердой, так и с жидкой фазами липидов. Показано, что текучесть липидов имеет, повидимому, важное значение и в механизмах трансмембранной передачи антигенных стимулов, поскольку жидкостность липидов ПМ увеличивается после взаимодействия С митогенами , , а по данным Инбара i, при контролируемом увеличении текучести липидов нормальных лимфоцитов значительно увеличивается активация их митогенами растений. Подвижность компонентов поверхности лимфоцитов, особенно тех структурных компонентов, которые участвуют в механизмах распознавания и активации лимфоцитов молекул иммуноглобулинов, ассоциированных, встроенных в ПМ, а также рецепторов митогенов особенно важно. Существует несколько уровней подвижности I. К этому типу, видимо, следует отнести микрораспределение вертикальную активность, экспонирование на поверхности ранее закрытых рецепторов Ситковский М. В., Макаренко И. Г., Козлов Ю. П., . Подвижности первых трех типов являются причиной изменений топографии поверхности ПМ и приведение пространственного расположения мембранносвязанных ферментативных комплексов в соответствие с уровнем функциональных нагрузок. Внутримолекулярное движение компонентов ПМ иногда имеет важное значение в межклеточных взаимодействиях, однако его следует рассматривать в другой временной шкале. Перераспределение на плазматической мембране рецепторов лектинов и антигенных детерминант характеризует такие физиологические процессы, как деление клеток, ее дифференциацию и трансформацию. Многие из молекул, идентифицированных на поверхности В и Тлимфоцитов могут перемещаться в плоскости ПМ после взаимодействия с соответствующими лигандами. Перемещающиеся в ПМ комплексы лиганда и рецептора могут распределяться в плазматической мембране в виде кластеров, либо агглютинировать в одно место на одном из полюсов клетки с образованием шапок, так называемых кэпов. В дальнейшем мы будем пользоваться именно этим термином, как наиболее употребляемым в современной литературе. Общие выводы, которые можно сделать на основании изучения подвижности компонентов поверхности это зависимость от температуры, поскольку образование кэпов кэпинг происходит при температуре С, НО не происходит вообще при 4С . . Процесс неспецифической активации лимфоцитов лектинами растений митогенез служит удобной моделью для выяснения механизмов активации лимфоцитов на уровне рецепторных молекул плазматических мембран, которая выражается морфологическими изменениями клеток, увеличением синтеза белка, РНК, ДНК, изменением активности различных ферментов, ведущих к митозу и увеличению числа клеток, ставших чувствительными к этому стимулу Фонталии, Певницкий, , , i . Взаимодействие лектинов с плазматической мембраной также вовлекает в действие комплекс метаболических процессов, обуславливающих изменение иммунологической активности пролиферацию, цитотоксическую активность, секрецию антител, лимфокинов и других биологических факторов Vi. . Активация лимфоцитов вызывается различными митогенными стимулами растительной ФГА, КонА, митоген лаконоса п, бактериальной стафилоккоковый токсин, эндотоксин, липополисахариды природы и некоторыми другими перйодат натрия, ионофор I и т. Известно, что для активации лимфоцитов помимо митогенного стимула необходимо участие ростового фактора, выделяемого Тклетками для Вклеток и макрофагами для Тклеток Комиссаренко, i, i, Vi . I0 . I2. Роль необходимости присутствия макрофагов оспаривалась разными авторами vi, , , , . Одни указывали на то, что удаление макрофагов усиливает стимуляцию лимфоцитов , , , Другие указывали на безразличность их влияния на действие лектинов.