Респираторный взрыв и особенности его регуляции в периферических нейтрофилах при росте опухоли in vivo

• Автор: Мальцева, Валентина Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 138 с. : ил.

Содержание
Введение

Глава I. Обзор литературы

1.1. Иммунная система и опухоль

1.1.1. Общая характеристика опухолевых клеток, их особенности

1.1.2. Классификация опухолей

1.1.3. Компетентность иммунной системы в отношении опухолей

1.1.4. Способы избегания клетками опухоли надзора иммунной системы

1.1.5. Влияние опухоли на компоненты иммунной системы

1.1.6. Теории взаимодействия опухоли и иммунной системы. Роль стромы опухоли

1.2. Пол им орфноя дерные не йтроф ильные грануло циты нейтрофилы 1.21. Общая характеристика
1.2.2. Мембранные рецепторы нейтрофилов
1.2.3. Респираторный взрыв и его регуляция
1.2.3.1. Структура КАИ оксидазы
1.2.3.2. Активация ИАИРНоксидазы, сигнализация
1.3. Двойственное поведение активных форм кислорода А ФК
1.3.1. Характеристика А ФК 5
1.3.2. Системы генерации и инактивации активных форм кислорода
1.3.3. А ФК польза или вред 5
1.3.4. Участие А ФК в процессах канцерогенеза
1.3.5. Влияние активных форм кислорода на сигнальные системы
1.4. Неоднозначность роли нейтрофила в канцерогенезе
1.4.1. Антиопухолевая активность 5
1.4.2. Проопухолевая активность
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Материалы
2.2. Биологический объект
2.2.1. Изоляция перитонеальных нейтрофилов мыши
2.2.2. Подготовка проб крови
2.3. Модель экспериментальной опухоли
2.3.1. Линии клеток
2.3.2. Формирование солидной формы опухоли
2.4. Регистрация хемилюминесценции
2.4.1. Хемипюминометр, программы и режим измерения
2.4.2. Измерение хемилюминесценции цельной крови
2.4.3. Измерение хемилюминесценции изолированных клеток
2.5. Микроскопия клеток
2.6. Гистологический анализ тканей
2.7. Анализ спектра белков методом электрофореза
2.8. Обработка результатов
Глава 3. Результаты
3.1. Модель экспериментальной опухоли на мышах
3.2. Оценка статуса лейкоцитов периферической крови
3.2.1. Популяционный состав клеток крови
3.2.2. Продукция А ФК клетками крови
3.3. Анализ меток, изолированных из очага острого воспаления
3.4. Морфологические изменения нейтрофилов
3.5. Функциональные изменения нейтрофилов
3.5.1. Оценка адгезивных свойств
3.5.2. Продукция А ФК периферическими нейтрофилами мыши
3.5.2.1. Спонтанная продукция АФК
3.5.2.2. Активированная ФМЛФ продукция А ФК
3.5.2.3. Оценка вклада отдельных активных форм кислорода в спонтанную и активированную продукцию А ФК
3.6. Ингибиторный анализ регуляции респираторного взрыва нейтрофилов
3.6.1. Оценка вклада рецепторов ФМЛФ с разным сродством в инициацию респираторного взрыва
3.6.2. Ингибирование киназ
3.6.2.1. Действие тирфостина , ингибитора тирозиновых
протеинкиназ
3.6.2.2. Влияние СЕ Х ингибитора протеинкиназы С
3.6.2.3. Действие , ингибитора р МАРК
3.6.2.4. Действие вортманнина и ЬУ, ингибиторов фосфатидичинозитЗкиназы
3.6.2.5. Влияние ортованадата натрия, ингибитора тирозиновых протеинфосфатаз
3.7. Оценка количества и спектра белков периферических нейтрофилов
3.7.1. Роль синтеза белка в способности нейтрофилов продуцировать АФК
3.7.2. Количество и спектр белков в цитоплазматической и ядерной фракциях
3.8. Сравнение функциональной активности нейтрофилов на моделях солидных опухолей
Глава 4. Обсуждение результатов
Выводы
Список литературы


Впервые установлены общие закономерности изменения параметров воспалительной реакции при развитии солидных опухолей разной этиологии. Получены новые факты о характерных особенностях изменений продукции АФК и роли киназ в зависимости от типа опухоли и фазы ее развития. Результаты работы свидетельствуют о модификации периферических иммунных клеток во время роста опухоли. Научнопрактическая ценность. Исследование молекулярных механизмов, лежащих в основе модификации функциональной активности клеток иммунной системы, включая нейтрофилы, относится к фундаментальным проблемам биологии клетки и онкоиммунологии. Полученные результаты существенно расширяют представление о взаимоотношениях между клетками иммунной системы и растущей в организме опухолью. Считается, что важнейшей задачей современных исследователей в области онкологии является поиск новой стратегии в лечении онкологических заболеваний, которая будет основана в значительной степени на иммунотерапии, усиливающей противоопухолевый иммунитет и подавляющей процессы, которые способствуют развитию опухоли. Полученные в ходе данного исследования результаты помогают понять механизмы модификации клеток иммунной системы и найти новые терапевтические подходы к лечению онкологических заболеваний. Апробация работы. i i i Бельгия, отчетная годичная научная конференция ИБК РАН Пущино, ii i i ii i xiiv Венгрия, Международный междисциплинарный Конгресс Прогресс в фундаментальных и прикладных науках для здоровья человека Украина, III съезд биофизиков России Воронеж, IXXI Всероссийский научный форум с международным участием Дни иммунологии в СанктПетербурге СанктПетербург, i ii i , 2ая Международная конференция Наука бизнес образование Пущино, I Съезде физиологов СНГ Сочи, Научная школаконференция Сигнальные системы клетки рецепторы, ионные каналы, вторичные мессенджеры физиологические функции и роль в онтогенезе биостанция Кропотово, Московская область, 2 Венгрия, v i i i i Греция, . Публикации. Но материалам диссертации опубликовано печатных работ, из них 3 статьи 1 статья в печати. фактор роста тромбоцитов. Глава 1. Обзор литературы . Опухолевая клетка потомок нормальной клетки, утратившей контроль над собственной пролиферацией и дифференцировкой. Считается, что злокачественные опухоли возникают из единственной клетки, подвергшейся трансформации и сформировавшей клон злокачественных клеток. Клетки опухоли в процессе трансформации приобретают ряд свойств, отличающих их от нормальных клеток организма способность к бесконтрольному делению и росту, утрата специфической структуры и функции, изменение антигенного состава, агрессивный рост с разрушением окружающих тканей и способность активно противостоять системе иммунитета i . Приобретение клетками вышеуказанных свойств носит название опухолевой конверсии трансформации. В процессе опухолевой конверсии клетки приобретают характерные признаки и вовлекаются в описываемые далее процессы. Опухолевым клеткам свойственен тканевый и клеточный атипизм, т. Автономность клеток опухоли характеризуется отсутствием контроля над пролиферацией и дифференцировкой клеток организмомопухоленосителем Коган, . Клетки продолжают делиться в условиях, когда нормальные клетки не делятся. Это связано с уменьшением потребности в ростовых факторах, которая определяется переходом на аутокринный или паракринный механизм регуляции роста, либо к синтезу дополнительного числа рецепторов к ростовым факторам и специфическим хемокинам , . Рецептор инсулиноподобного фактора роста сверхэкспрессируется на различных опухолевых клетках миеломных, клетках опухоли простаты и молочной железы . Высокий уровень инсулиноподобного фактора роста в крови человека коррелирует с риском развития солидной опухоли.