Молекулярно-клеточные механизмы стимулирующего действия низкоинтенсивного лазерного (когерентного) и некогерентного (светодиодного) излучений на процесс заживления ран

• Автор: Шураева, Наталия Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 96 с. : 8 ил.

1.1 Применение низкоинтенсивных лазерных и светодиодных источников в медицине

1.2 Гипотезы о механизмах биологического действия низкоинтенсивного лазерного излучения
1.3 Влияние низкоинтенсивного лазерного и светодиодного излучения на процессы в клетках и тканях

1.4 3 аживление ран и влияние лазерного и светодиодного излучения на раневой процесс

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Материалы

2.2 Препаративные методы

2.2.1. Животные

2.2.2. Экспериментальная модель полнослойной плоскостной раны

2.2.3. Получение раневого экссудата и выделение полиморфноядерных лейкоцитов раневого экссудата

2.2.4. Выделение полиморфноядерных лейкоцитов крови человека

2.2.5. Выделение клеток перитонеального экссудата крыс
2.2.6. Культивирование перитонеальных макрофагов и клеток раневого экссудата для определения ионов нитрита ИОг
2.2.7. Получение общей фракции фосфолипидов из желтков куриных яиц
2.2.8. Приготовление многослойных фосфолипидных липосом
2.3 Биофизические методы исследовании и модельные системы
2.3.1. Измерение люминолзависимой хемилюминесценции полнморфноядерных
лейкоцитов крови, клеток перитонеального экссудата крыс, клеток раневого экссудата крыс
2.3.2.0прсделение содержания ионов нитрита Ы по методу Грисса
2.3.3. Определение активности супероксиддисмутазы в клетках перитонеального экссудата
2.3.4. Определение накопления ТБКактивньтх продуктов в раневом экссудате крыс
2.3.5. Измерение антиоксидантной активности раневого экссудата в модельной
системе водногомогенной модельной системы на основе азососдинения АДБА в присутствии раневого экссудата
2.3.6. Измерение антиоксидантной активности раневого экссудата в модельной
системе окисления суспензии фосфолипидных липосом, индуцированного ионами двухвалентного железа
2.4 Изучение морфологии и скорости заживления ран
2.4.1 .Планиметрические исследования
2.4.2. Фотографирование ран
2.4.3. Патоморфологические исследования
2.5 Обработка клеток и экспериментальных ран лазером и светодиодом
2.5.1. Облучение суспензии клеток для определения ЛХЛ и СОД
2.5.2. Облучение перитонеальных макрофагов для определения ионов нитрита
2.5.3.роцсдура облучения ран
2.6 Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
3.1. Сравнительное исследование влияния красного когерентного лазерного и нскогерентного светодиодного излучения на свободнорадикальные механизмы активации фагоцитов
3.1.1. Исследование особенностей влияния светодиодного и лазерного излучения
в красном диапазоне спектра на функциональную активность лейкоцитов периферической крови человека
3.1.2. Изучение механизмов действия ГНЛ и КСД на продукцию оксида азота перитонеальными макрофагами крыс
3.1.3. Изучение механизмов действия ГНЛ и КСД на активность
супероксиддисмутазы перитонеальных макрофагов крыс
3.2. Сравнительное исследование влияния ГНЛ и КСД на
параметры заживления модельных ран у крыс
3.2.1. Определение влияния облучения ГНЛ и КСД на скорость заживления и
морфологию экспериментальных ран у крыс
3.2.2.Изучение действия ГНЛ и КСД на функциональную активность фагоцитов в динамике заживления модельных ран у крыс
3.2.3. Исследование действия лазерного и светодиодного излучении на уровень продукции оксида азота синтетическими лейкоцитами экссудата в динамике заживления ран
3.2.4 Изучение влияние лазерного и светодиодного излучений на
уровень активности СОД в динамике заживления модельных ран у крыс
3.2.5.Изучение действия ГНЛ и КСД на антиоксидантную активность раневого
экссудата и уровень перекисного окисления липидов в процессе заживления модельных ран у крыс
Заключение
Выводы
Список использованной литературы


Действительно, по данным работы 6 обнаруженные автором отличия в эффектах красного и инфракрасного лазерного света на заживление ран зависели не только от длины волны лазера, но и от когерентности излучения. В то же время, в работе 4 было показано, что пролиферацию фибробластов можно регулировать с помощью некогерентного излучение светодиодов. В исследовании 1 также был показан стимулирующий эффект некогерентного света на заживление ран, однако опять же излучение было в инфракрасном диапазоне. В работе 6 было показано положительное влияние красного лазерного излучения на заживление ран, в то время как излучение диодов действия не оказывало. Кроме того, известно, что в процессе заживления ран активное участие принимают клетки лейкоцитарного звена 0. Однако большинство работ посвящено действию когерентного лазерного излучения на лейкоциты 7, 8, 1, в то время как эффектам некогерентного света вообще не уделено должного внимания. В связи с изложенным выше, в настоящей работе, возникла необходимость провести сравнительное исследование действия когерентного лазер и некогерентного светодиод излучений на лейкоциты и на процессы заживления кожных ран у крыс. И на основании полученных данных выяснить эффективность действия некогерентного излучения на эти биологические объекты. Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлось изучение некоторых звеньев молекулярноклеточных механизмов стимулирующего воздействия лазерного и светодиодного излучений на лейкоциты и на процессы заживления ран. Изучить особенности влияния низкоинтенсивного оптического излучения в красном диапазоне спектра на функциональную активность лейкоцитов в динамике заживления модельных ран у крыс. Исследовать влияние лазерного и светодиодного излучений в красном диапазоне спектра на уровень продукции оксида азота лейкоцитами экссудата в динамике заживления ран. Изучить влияние лазерного и светодиодного излучений в красном диапазоне спектра на уровень активности ферментаантиоксиданта СОД в динамике заживления модельных ран у крыс. Определить влияние облучения ГНЛ и КОД на скорость заживления и морфологию экспериментальных ран у крыс. Научная новизна. В лабораторных условиях на лейкоцитах, перитонеальных макрофагах крыс и модельных ранах у крыс изучена роль и вклад свободнорадикальных, молекулярноклеточных и иммунохимических механизмов на процессы заживления ран при лечении их с применением низкоинтенсивного лазерного и светодиодного излучений. Установлено, что оптимальной стимулирующей дозой для лазерного и некогерентного излучения является 1,5 Джсм2. Светодиодное излучение оказывают такое же стимулирующее действие на фагоцитарную активность лейкоцитов, продукцию оксида азота, активность супсроксиддисмутазы перитонеальными макрофагами крыс, на скорость заживления модельных ран у экспериментальных животных как и когерентный лазерный свет. Практическая значимость. В результате проведнной работы было установлено, что облучение экспериментальных ран у крыс лазерным и светодиодным излучением позволяло ускорить заживление ран по сравнению с контрольной группой животных в 1,4 раза. Результаты и подобранные оптимальные дозы облучения, полученные в данном исследовании, позволят разработать схемы комплексной терапии применения светодиодной аппаратуры и традиционных методов лечения. Что в свою очередь позволит сократить сроки очищения ран от гноя и некротических масс и соответственно ускорить заживление ран у больных людей в клинике и как следствие, уменьшить время пребывания пациентов в стационаре, что имеет важное медикосоциальное и экономическое значение. Все обнаруженные эффекты светодиодного и лазерного излучений свидетельствуют о том, что такие специфические свойства когерентного лазерного излучения как когерентность, поляризуемость и высокая степень монохроматичности для формирования клеточных ответов нс обязательны. Помимо этого, светодиодные медицинские приборы обладают рядом преимуществ и значительно дешевле лазерных аналогов, что может быть поводом для более широкого применения их в клинической практике. Апробация диссертации.