Влияние факторов внутреннего пути свертывания крови на пространственную динамику роста сгустка

• Автор: Ованесов, Михаил Владимирович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 164 с.

1.1. Современные представления о коагуляционном звене системы гемостаза

1.1.1. Коалиционное звено системы гемостазаЮ

. 5.2. Внутренние и внешний пути каскада серпываныя крови.

5. 1.2. Па на и положительной обратной свмш и образование комплексов

I. 5. 4. Образование фибриновой сети

1.1.5. Естественные ингибиторы свертывании

1.1.6 Лите фибринового сгустка .

1.2. Математическое описание кинетики свертывания. лытооолновля гипотеза.

1.3. Гемофилии А, В и С.

. 5 Гемофихии дефициты факторов внутреннего пути свертывания

1.2.2. Гипотезы о механизмах нарушения гемостаза при гемофилиях.

1.4. Экспериментальные мод ели гемофилии т гпю
5.4.5. Классификация экспериментальных постановок
1.4.2. Исследования гомогенной кинетики.
5.4.5. И рос трон ственнснраспргдеясн иыг системы.
5.4.4. Пространственная динамикороста сгустка в неперсиешиваемой пяаме крови.
1.5. Постановка задачи.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. .
2.1. Материалы.
2.2. Доноры крови
2.3. Получение плазмы крови
2.4. Стабилизация плазмы молочной кислого.
2.5. Рр.кальцкфнкация плазмы. .
2.6. Стандартные тесты АЧТВ. ПВ и ТВ
2.7. Культурафикробласгов и лимфоцитов
2Л. Восполнении дефицита фШ1 м УГЛЮ .
2.9. Сорбция тромбина и тромбопласгина нл ПВДФ мемьрлну
2.Ю. Определение ВРЕМЕНИ пояужизни ,апмфилл в
2 Экспериментальная система
2.5 5. 5. Конструкция кмееты
. Установка
2 Программный комплекс получения и обработки экспериментальных изображений.
. Получение изображений
. Обрагкнпка экспериментальных кадров.
.1. Сигнал сютсдосссяиля. . . 6
2.2.3. Лл горнм восстановления распределения активных факторов свертывания
2 Численные методым
. Вычисление производных и фильтрация шумов.
. Решение уравнений с диффузией.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. ИССЛЕДОВАНИЕ РОСТА СГУСТКА В НОРМАЛЬНОЙ ПЛАЗМЕ
3.5.5. Рост сгустка, активированный го внутреннему пути свертывания.
3. 5.2. Рост сгустка, активированный по внешнему пути свертывания.
2.5.2. Влияние платности фиброблостов в слое на рост сгустка в нормальной плохие
5.5.4. Влияние системы кхнтактной аюпиещии на пространственный рост сгустка
3.1.4.1. Ингибирование контактной свертывания с помошо КТИ
3.1 Влияние материала и геометри их параметров экспериментальной кюветы на характер роста
2.5.5. Оценка тромбогенности материалов по пространственной динамике формирования
сгустка
3.1.5.1. Модификация поверхности стекла .
3.1 Изучение п уготромбоеннОсги внутривенных каптеров МИНЯЯМНМЮТМЯИНПИ.МН
2.1.6 Активация роста сгустка иммобилизованным тромбином.
3.2. Гост СГУСТКА Н ПЛАЗМЕ больных тяжелой формой ГЕМОФИЛ ИЯ а и В.
2.2.5. Рост сгустка, активированный по внутреннему пути свертывания.
2.2.2 Рост сгустка, активированный по внешнем пути сеертыеания.
2.2.2. Влияние сизы внешней активации ка динамику роста сгустка.
3.3. Рост СГУСТКА 0 ПЛАЗМЕ БОЛЬНЫХ С ДЕФИЦИТАМИ ФАКТОРА X И ФАКТОРА X.
3.4. Изменение динамики роста сгустка при восполнении дефицитов факторов внутреннего яу ти
СВЕРТЫВАНИЯ.
2.4.5. Влияние еысокоочищенного фактора у5 но пространственную динамику роста сгустка е
пло хие больных лемгфилией А
3.4.1.1. Восполнение дефицита Фактора VIII туговиоокоочищениьм фактором VIII неломка
3.4.1.2. Влияние плотности фибробжастов на скорость, роста сгустка при рхшых концентрациях добавленного фУШ м. .
3.4.1.3. Влияние контактной фаты саертыкшия на эффект ф1 на рост сгустка а лмме больных гемофилией .
3.4.1.4. Пространственная динамика свсргыяания в плазме бояыюго гемофилией А фУШ 1 с высоким
титром ингибитор,. Ю
2.4.2. Проверка тромбогенности еысокоочищенного фУШ путем добавления к нормальной пламе
2.4.2. Восполнение дефицита фактора УШ свежей донорской плазмой
3.4.4. Нормализация свертывания препамтаии кАгемфия Аь и вАгсмфил В.
3.4,4.1. Фармакокинетика Агсмфила П. .
3.4.4 2. Динамика роста сгуепа в плагтме больных гемофилией В при лечении Агсмфилом К чишни шнинш 5 3.4.4Л. Динамика роста сгустка ш плюме больных гемофилией А при лечении Агсмфилом А НИПИПМЧЦИ
2.4.5. Корреляция между уровнем дефицитного фактора тяжестью зобдлевгтия и пространственной динамикой роста сгустка
2 4.6 Влияние, фактора Vi на пространственную динамику свертывания.
3.5. ПРОСТРАНСТВЕ ПАЯ ДИНАМИКА РАСПРОСТРАНЕНИЯ ТРОМБИНА ВОВРЕМЯ РОСТА СГУСТКА.
2.5. Методика измерения пространственной динамики активных факторов свертывании
2 Влияние погрешностей входных экспериментальных данных на восстановление
распределений фер ментативной активности,.
2.5.2 Распределения тромбина е ходе роста сгустка в нормальной плохие
2 5 4 Распределения тромбина в ходе рхлна сгустка при ге.менрилиях Ли В
3.6 ГОСРАНСТИЕНАЯЛИНАМИКЛ ЛИЗИСА СГУСТКА
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ
4 1. ПРОСТРАНСТВЕННЫЕ ФАЗА ИНИЦИАЦИИ И ФАЗА РОС А ФИБРИНОВОГО СГУСТКА
4.1.1. Характеристика v системы.
4.1.2 Фим проепцганс пни много сщтыеания плазмы крови
. Нарушение фазы роста сгустка при дефицитах факторов внутреннего пут св тьвання
4.3. НОРМАЛИЗАЦИЯ ПРОСТРАНСТВЕННОГО ЮСА СГУСТКА ПРИ ВОСПОЛНЕНИИ ДЕФИЦИТА ФАКТОРОВ ВНУТРЕННЕГО ПУШ СВЕРТЫВАНИЯ.
4.4. Механизм нарушения i усгка при тмофилиях
4.5 ПРОСТРАНСТВЕННАЯ ДИНАМИКА СВЕРТЫВАНИЯ КАК НОВЫЙ МРЛОД ИССЛЕДОВАНИЯ.
выводы
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Эти данные, и гот факт, что до сих пор не найдено физиологического активатора контактной фазы, который бы эффективно инициировал свертывание при повреждении сосуда, в последнее десятилетие привели исследователей гемостаза к мнению, что i viv в образовании нормального гсмостатического ответа внутренний путь не участвует 1,7,8,1. Другой механизм образования сгустка запускается трансмембранним гликопротеином тканевым фактором ТФ ,7. Показано, что ТФ отсутствует на мембране тех клеток, которые в норме соприкасаются с плазмой крови на клетках крови и эндотелия ,2. На всех остальных клетках ТФ присутствует, поэтому, когда нарушается эндотелиальный барьер, и кровь вступает в контакт с поверхностью субэндотслия т. ТФ оказывается экспрессированным в кровь 2, и только в месте повреждения сосуда. С этого момента запускаются реакции внешнего пути свертывания крови, начиная с образования комплекса фМаТФ ,0. Известно, что небольшая часть 0 молекул фактора VII циркулирует в крови уже в активированной форме, но сам по себе фУИа обладает исчезающе малой коагуляционной ферментативной активностью ,8. После сборки на фосфолипилиой мембране, фермой гкоферментный комплекс фП1аТФ внешняя теназа, xii X станонится способным быстро активировать факгор X и, с меньшей скоростью 2 раз, фактор IX ,9 см. А. Фактор Ха, в свою очередь, активирует протромбин, и оба эти фактора фХа и фПа 5,1 расщепляют неактивную молекулу фУН с образованием активного фермента фУИа. Таким образом, число инициирующих свертывание комплексов фТ1аТФ быстро растет в результате рабогы положительных обратных связей фХафМ1з и тромбинф1а. При этом, хотя фХа и активирует ф в 0 раз быстрее, чем тромбин , из значительной разницы в концентрациях фХа и тромбина, в фазе инициации свертывания i vi основную роль играет последняя реакция . Дальнейшие реакции, необходимые для образования сгустка, являются одинаковыми для внутреннего и внешнего путей. Эти реакции включают усиление работы каскада спсртывания через петли положительной обратной связи и образование крайне активных фахторкофакторных комплексов. На последних ступенях каскада происходит образование фибрина и формирование полимерной сети, аусгка. Известно, что петли обратной связи существенно меняют кинетику ферментативных каскадов 8. Для системы свертывания известно, что тромбин, последний фермент каскада, является не только ферментом, превращающим фибршниен в фибрин, но и катализатором своего производства . Молекулы тромбина, образованные на первых стадиях работы каскада свертывания, осуществляют три петли положительной обратной связи, активируя факторы V 8,2, VIII 2,3 и XI 2,5 рис. А. Последняя реакция активации фактора XI довольно медленна ,5,2, и мнотс исследователи предполагают, что на кинетике образования первичного сгустка, i первых этапах роста тромба, она должна сказываться слабо ,8. Однако, экспериментального доказательства или опровержения этого утверждения пока не получено. Что касается первых реакций, то активированные тромбином факторы V и VIII сами по себе не обладают ферментативной активностью 1, но участвуют в образовании двух ферменткофсрмс1ПТ1ых комплексов протромбишзы фХафа и внутренней тсназы ф1Хаф1а ,5,8,9. Формирование этих комплексов является ключевым этапом процесса свертывания, т. Н и фХ. Ха и 1Ха соответственно . Сборка и структура лротромбиназы и тсназы имеют ряд общих закономерностей 8. В качестве несиецифичной подложки для комплексов системы свертывания i выступать любые фосфолмпиднмс слои, содержащие отрицательно заряженные фосфолипиды большое значение также имеет относительный состав липидов 8. Как показали исследования ряда авторов, в первую очередь работы группы К. О. Маппа 5,8,9,8,9, сборка нротромбиназы начинается со связывания фХа или фУа с фосфолипидной мембраной. Затем на плоскости мембраны происходит образование комплекса фХафУа. Субстраты тсназы и лротромбиназы, фактор X и протромбин, могут сначала связываться с фосфолипидами, и потом входить в комплекс со своим активатором, или из объема плазмы сразу вступать в тройные комплексы фХф1ХафУ1а и ффХафУа. В любом случае, каждый из грех компоненгов субстратфсрмскткофсрмснтного комплекса оказывается связан с мембраной.