Особенности функционирования нейтрофилов крови человека в условиях лазерного облучения

• Автор: Рязанцева, Лариса Тихоновна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Воронеж
• Количество страниц: 155 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
I. ВВЕДЕНИЕ

П. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. Механизмы действия лазерного излучения на биосистемы.

ГЛАВА 2. Нейтрофильные лейкоциты структура, механизм функционирования, основные ферментные системы

2.1. Основные представления о роли нейтрофилов в поддержании гомеостаза организма

2.2. Особенности структуры и функции миелопероксидазы нейтро

фильных лейкоцитов

2.3. Ферментыантиоксиданты структурнофункциональные

свойства и роль в регуляции метаболических процессов

Ш ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 3 Объекты и методы исследования.
3.1. Объекты исследования.
3.2. Методы исследования. .
3.2.1. Выделение нейтрофилов из крови человека
3 .2.2. Определение качественного и количественного состава
суспензии нейтрофильных лейкоцитов
3.2.3. Определение функциональной активности нейтрофилов методом люминолзависимой хемилюминесцснции
3.2.4. Получение супернатанта нейтрофилов.
3.2.5 Определение функциональной активности миелопероксидазы
нейтрофилов.
3.2.6. Определение активности супероксиддисмутазы в нейтрофилах
крови человека
3.2.7. Определение активности каталазы в нейтрофилах
3.2.8. Определение МПОактивности нейтрофилов в процессе срыва фагоцитоза.
3.2.9. Определение каталитической активности Са2АТФазы клеточных мембран нейтрофилов.
3.2 Определение супероксиддисмутазной активности плазмы
методом люминолзависимой хемилюминесценции.
3.2 Получение железопорфирина из гемоглобина человека.
3.2 Определение белка по методу Лоури.
3.2 Качественная реакция на аскорбиновую кислоту
3.2 Облучение образцов светом ШУАв лазера
3.2 Статистическая обработка экспериментальных данных.
РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА 4. Модулирующее действие лазерного облучения крови на функциональный потенциал нейтрофильных лейкоцитов
4.1. Акт ивация хемилюминесцентного ответа нейтрофилов при
лазерном облучении крови.
4.2. Влияние лазерного излучения на ХЛответ нейтрофилов в присутствии плазмы крови.
4.3. Действие лазерного облучения на функциональный потенциал
нейтрофилов в присутствии гематопорфирина
4.4. Влияние ЛО крови на каталитическую активность Са АТФазы
нейтрофилов
ГЛАВА 5 Исследование влияния лазерного облучения 0 нм на функциональные свойства миелопероксидазы в составе нейтрофильных лейкоцитов.
5.1. Активация миелопероксидазы нейтрофилов в условиях лазерного облучения крови
5.2. Влияние лазерного излучения на активность миелопероксидазы нейтрофильных лейкоцитов в присутствии гематопорфирина.
5.3. Роль аскорбиновой кислоты в фотоактивации миелопероксидазы нейтрофилов в условиях действия лазерного облучения
5.4. Особенности функционирования аскорбиновой кислоты, лежащие
в основе проявления сю антиоксидантных свойств.
5.5. Лазсриндуцированный транспорт аскорбиновой кислоты в
нейтрофильные лейкоциты и его последствия
ГЛАВА 6 Изучение влияния низкоинтенсивного лазерного облучения
0 нм крови на некоторые ферменты антиоксидантной системы СОД и катапазу
6.1.Фотоактивация экстрацсллюлярной формы суиероксиддисмутазы
при лазерном облучении крови.
6.2. Влияние лазерного облучения крови на активность супероксиддисмутазы и каталазы в составе нейтрофилов.
6.3. Инактивация ферментов антиоксидантной системы нейтрофилов
в условиях лазерного облучения суспензии клеток
ГЛАВА 7. Исследование влияния излучения азотного лазера 7 нм на
функциональный потенциал нейтрофильных лейкоцитов в условиях
облучения крови
7.1. Влияние излучения Ыглазера на динамику активности миелопероксидазы в составе нейтрофильных лейкоцитов.
7.2. Изучение влияния излучения К2лазера на кинетику генерации активных форм кислорода нейтрофильными лейкоцитами.
IV. ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
V. ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Облучение цельной крови светом азотного лазера 7 нм в течение 1 и 5 мин оказывает модулирующий эффект на такие показатели функционального потенциала нейтрофилов, как генерация активизированных метаболитов кислорода, активность миелопероксидазы и скорость ее выхода из клетки при стимуляции фагоцитов. Схема молекулярного механизма действия низкоинтенсивного лазерного излучения 0 нм на нейтрофилы в системе крови. Диссертационная работа включает 5 страниц машинописного текста, 9 табл. Введения, 7 глав, Заключения и Выводов. Список литературы содержит 3 источника, из них 1 отечественных и 2 зарубежных. Явление усиления света с помощью эффекта вынужденного испускания излучения получило название лазер аббревиатура из начальных букв английского выражения i iii i ii ii. Принципиальной основой работы лазеров является эффект индуцированного излучения, предсказанный Д. Эйнштейном в г. В г. В.А. Фабрикант предложил способ усиления светового излучения путем пропускания его через специальным образом подготовленную усиливающую среду. Принципиальные основы построения лазера были заложены в трудах А. М. Прохорова, Н. Г. Басова и Ч. Таунса в гг. Лазер на алюмоитгриевом гранате с неодимом был сконструирован Г. Гсйзиком в г. Лазер, как генератор светового излучения, должен содержать среду, усиливающую свет, и резонатор, осуществляющий положительную обратную связь между генерируемым светом и усиливающей средой. Рассматриваемый нами лазер на гранате с неодимом работает по так называемой четырехуровневой схеме 5. Роль усиливающей среды в данном случае играет кристалл алюмоиттрисвого граната с неодимом . Ионы неодима, расположенные внутри кристалла граната, имеют систему энергетических уровней, схематически изображенную на рис. Чтобы практически реализовать процесс лазерного усиления, необходимо электроны в ионе перевести с более низкого на верхний энергетический уровень. Число ионов, занимающих более высокий лазерный уровень, должно быть всегда больше заселенности более низкого лазерного уровня, рис. Это явление называется инверсией населенности. Б нормальном состоянии число ионов на уровне 2 больше, чем на уровне 3, и поглощение световой волны превалирует над усилением, г. Рис. Сзн2
метастабильном уровне и через какоето время число 3 превысит 2, т е. Чувствительность клеток млекопитающих к облучению отдельными полосами видимого спектра была известна еще в долазерные времена. В работах х годов уже продемонстрированы эффекты воздействия света на клетки было показано, что отдельные компоненты солнечного спектра могут действовать совершенно иначе, чем суммарный белый свет. Интерес к эффектам воздействия света на биообъекты возобновился в х годах после появления первых лазеров. НеЫелазер исторически первым стал широко доступным источником когерентного света. Наблюдаемые эффекты связывали с уникальными свойствами НеКтелазера высокой когерентностью и монохроматичностью его излучения , 5. В настоящее время лазеры все шире применяются в различных областях науки и в медицине. В биологии лазеры используются для изучения молекулярных процессов спектральными методами, исследования микроструктуры клеток, а также для облучения биосистем различного уровня организации , 9, 6, 9. В медицине впервые лазеры стали применяться при воздействии на поверхность тела, в г. Гольдман использовал лазер в дерматологии 5. В году венгерский хирург Местер сообщил об эффекте лечения ран излучением НеЫелазера малой плотности мощности 5. Местер полагал, что улучшение в залечивании ран достигается за счет стимуляции синтеза коллагена и иммунологического эффекта. В настоящее время лазеры применяют при лечении заболеваний практически всех органов человеческого тела. Следует подчеркнуть, что основоположником современных методов лазерной микрохирургии глаза является советский офтальмолог академик М. М. Краснов. Показания к применению лазера могут быть разделены на несколько основных групп, представленных в таблице 1. Диагностика Идентификация и изучение молекул ДНК и РНК, иммунологические исследования, изучение кинетики и биологической активности микроорганизмов. Эффект влияния лазерного излучения ЛИ на биологическую систему обусловлен взаимодействием фотонов и молекул биоткани.