Идентификация секреторного 28 кДа белка из обонятельного эпителия крысы как представителя семейства 1-Cys пероксиредоксинов

• Автор: Камзалов, Сергей Станиславович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 96 с. : ил.

Оглавление

Список основных сокращений и обозначений

Введение

Глава 1. Обзор литературы Пероксиредоксины.

1.1. Общая характеристика семейства пероксиредоксинов история вопроса название, распространенность в природе, классификация

1.1.1. Бактериальные пероксиредоксины

1.1.2. Пероксиредоксины млекопитающих

1.2. Структурнофункциональная организация пероксиредоксинов.

1.2.1. Пероксидазная активность пероксиредоксинов

1.2.2. Восстановление окисленных пероксиредоксинов, регенерация тиоловых групп и активация пероксидазного центра.
1.2.3. Структурная организация пероксиредоксинов как основа их функциональной активности
1.3. Физиологическая роль пероксиредоксинов
1.4. Постановка задачи исследования
Глава 2. Материалы и методы.
Глава 3. Результаты и обсуждения
3.1. Ангиоксидантные свойства белков экстракта обонятельного эпителия крыс .
3.2. Первичная структура кДа белка. Сравнительный анализ с пероксиредоксинами 1Сув и 2СуБ подгрупп
3.3. Антиоксидантные свойства кДа белка
3.3.1 Характеристика металлкатализируемых окислительных
3.3.2 Протекторные свойства кДа белка
защита белков от окисления металлкатализируемой
системой.
3.4 Сравнительный анализ антиоксидантных свойств 1 Суэ
пероксиредоксина кДа и 2СуБ пероксиредоксина кДа
3.5 Роль 8Нгруппы цистеина в осуществлении
функциональной активности пероксиредоксина
кДа и 2СуБ пероксиредоксина кДа
3.5.1 Действие Мэтилмалеимида на антиоксидантные
свойства кДа и кДа белков.
3.5.2 Влияние третбутилгидропероксида на функциональные свойства пероксиредоксина кДа и 2Суь пероксиредоксина кДа.
Заключение
Литература


ТСЛ тилоспецифические антиоксиданты ЭДТА этилендиаминтетрауксусная кислота 1 СуБ, 2Суэ подгруппы ТСА в Б глутаминсинтстаза. ЖТ6 рекомбинантный 1Сув пероксиредоксин. Образование активных форм кислорода АФК нормальный биологический процесс, происходящий в клетках во время метаболизма. Однако образование избытка кислородных радикалов может приводить к повреждению всех основных классов биологических макромолекул. Окислительная модификация белков, вызванная активными формами кислорода, не только изменяет аминокислотные остатки, но и нарушает третичную структуру и даже вызывает агрегацию и денатурацию. В результате снижается или исчезает их многообразная функциональная активность ферментативная, регуляторная, участие в матричных синтезах, транспорт ионов и липидов. Кроме того, один из видов активных форм кислорода, гидроксил радикал ОН, вызывает повреждения ДНК окисление оснований, их модификации, разрывы цепей, повреждение хромосом. При этом сейчас считают, что АФК вызывают больше мутаций, чем другой класс мутагенов алкилирующие вещества. Мутации могут привести к патологии и гибели клеток или к их злокачественному перерождению рак, лейкоз и др. ДНК половых клеток к наследуемым болезням. Все описанные нарушения могут серьезно или полностью дезорганизовать функционирование клеток и организма в целом. Однако в процессе эволюции клетки выработали целый ряд антиоксидантных защитных систем, которые препятствуют накапливанию АФК. Следует отметить, что молекулярные механизмы функционирования этих защитных систем изучены недостаточно. Особенно ограничены наши знания об антиоксидантных процессах в периферической сенсорной системе. АФК в большей степени, чем другие ткани. Следовательно, обонятельный эпителий должен обладать антиоксидантиыми защитными системами. Проведенные исследования показали наличие глутатионпероксидазной и каталазной активности в обонятельном эпителии. Высокий уровень тиолов, включая глутатион ii . i . трансфераз . i . . i . Недавно в лаборатории биофизики рецепции ИБК РАН был открыт новый кДа секреторный белок обонятельного эпителия крысы . . Анализ аминокислотной последовательности белка кДа и поиск гомологов показали, что он является представителем недавно открытого семейства высококонсервативных антиоксидантных белков, названных тиолспецифическими антиоксидантами или пероксиредоксинами семейство . Изучению свойств и функций белка кДа посвящена данная работа. Глава 1. Первым описанным тиолспецифическим антиоксидантом был кДа белок из дрожжей, который специфически предохранял i vi ферменты от разрушающего действия металлкатализируемой окислительной системы, содержащей в качестве донора электронов тиоловые соединения, но не аскорбат i . В частности, было показано, что данный белок защищал глутамине и нтетазу от окисления тиоловой системой Ре3ДТТ, в которой в качестве донора электронов использовался нефизиологический дитиотреитол. Поскольку в описанных экспериментах кДа белок проявлял протекторную активность только против окислительного действия тиолсодержащей, но не аскорбатной металлкатализируемой системы, белок был назван тиолспецифическим антиоксидантом iii ixi. Физиологический донор электронов этого белка и его точная биологическая функция в клетке оставались неизвестными. Параллельно в другой лаборатории была очищена еще одна антиоксидантная система гидропероксидредуктаза из ii, состоящая из двух белков кДа и кДа , которые вместе катализируют КАГРНзависимое восстановление органических пероксидов и Н2О2 . Предложенный механизм антиоксидантного действия этой системы включал в себя восстановление пероксидов с помощью за счет окисления двух его сульфгидрильных групп с образованием дисульфидной связи и последующую регенерацию с помощью донора электронов , функционирование которого сопряжено с окислением.