Регуляция концентрации внутриклеточного кальция и метаболизма арахидоновой кислоты при действии на клетки

• Автор: Строкин, Михаил Львович
• Шифр специальности: 02.00.15, 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 132 с.

1. Введение.

2. Обзор литературы.

2.1. Физиологическая роль к распределение полиненасышснных жирных кислот в организме

2.1.1. Основные свойсгва полиненасышснных жирных кислот

2.1.2. Жирные кислоты семейства п

2.1.3. Жирные кислоты семейства п

2.1.4. Жирные кислоты семейства п

2.1.5. Жирные кислоты семейства п

2.2. Белки переносчики жирных кислот и их роль в метаболизме жирных кислот

2.2.1. Белки переносчики жирных кислот

внеклеточного пространства.

2.2.2. 1елки плазматической мембраны.связывающие
жирные кислот ы,.Л.,Г
2.2.3. Внутриклеточные белки переносчики жирных кислот
2.3. Современные модели процессов включения жирных
кислот в клетки
2.4. Особенности включения в клетки арахидоновой кислоты.
2.5. Регу ляция метаболизма арахидоновой кислоты
2.5.1. Свойства и регуляция активности секреторной фосфолнназы А
2.5.2. Свойства и регуляция активности цитозольной фосфолнназы Л
2.6. Физиологическая активность арахидоновой кислоты
2.7. Участие арахидоновой кислоты в регуляции внутриклеточного кальция.
2.8. Заключение.
3. Экспериментальная часть.
3.1. Реактивы и препараты.
3.2. Среды и растворы.
3.3. Буферы
3.4. Используемые методы.
3.4.1. Методы получения и культивирования макрофагов мыши
и астроцитов крысы.
3.4.2. Методы изучения метаболизма арахидоновой кислоты
с использованием радиоактивно меченых веществ
3.4.3. Метод флуоресцентной цифровой микроскопии определения внутриклеточного кальция.
3.4.4. Моделирование процессов включения арахидоновой кислоты
в клетки.
. Результаты и их обсуждение.
4.1 Участие арахидоновой кислоты в регуляции
внутриклеточного кальция.
4.1.1 Прямая стимуляция арахидоновой кислотой вызывает
вход Са2 в астроциты
4.1.2 Влияние арахидоновой кислоты на изменения
концентрации внутриклеточного кальция, вызванные тромбином и АТФ
4.1.2.1 Прямая с тимуляция выброса арахидоновой
кислоты из астроцитов тромбином.
4.1.2.2 Амплитуда изменения концентрации внутриклеточного кальция в астроцитах стимулированных тромбином уменьшается при одновременном внесении
арахидоновой кислоты.
4.1.2.3 Амплитуда изменения концентрации внутриклеточного кальция в астроцитах стимулированных тромбином уменьшается после мин инкубации клеток с арахидоновой кислотой.
4.1.2.4 Влияние различных путей метаболизма арахндоновой кислоты на стимулированные тромбином ответы
астроинтов.
4.2 Кинетические закономерности метаболизма
арахндоновой кислоты в клетках.
4.2.1 Включение арахндоновой кислоты п клетки
4.2.2 Влияние экзогенной арахндоновой кислоты на высвобождение
арахидоновойжислоты из внутриклеточных запасов.
4.2.3 Моделирование включения арахндоновой кислоты в клетки
4.2.3.1 Равновесная модель включения арахндоновой
кислоты в клетки.
4.2.3.2 Стационарная модель включения арахндоновой
кислоты в клетки.
4.2.4 Влияние белков переносчиков жирных кислот
на включение арахндоновой кислоты
4.2.5 Изучение путей активации высвобождения арахндоновой кислоты из внутриклеточных запасов клеток при стимуляции экзогенной арахндоновой кислотой
5. Заключение.
6. Выводы
7. Список литературы.
Список используемых


Поэтому исследование влияния экзогенной арахндоновой кислоты на концентрацию внутриклеточного кальция в астроцитах и модуляции чувствительности этих клеток к действию тромбина и АТФ представляю собой актуальное направление современных исследований. Таким образом, цслыо данной работы является 1 изучение развития во времени процессов метаболизма арахндоновой кислоты в макрофагах и астроцитах 2 Исследование действия экзогенной арахндоновой кислоты на метаболизм эндогенной арахндоновой кислоты 3 Участие арахндоновой кислоты в регуляции внутриклеточного кальция. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Физиологическая роль и распределение полиненасмщеннмх жирных кислот в ор1аииме. Арахндоновая кислота АК относится к классу полинснасышснных жирных кислот ПНЖК, которые играют важную физиологическую роль в организме. Основные свойства полиненасышенных жирных кислот. ПНЖК, входящие в класс жирных кислот, используются в организме по трем основным направлениям 1 Они входят в состав мембранных липидов, которые являются основным структурным компонентом биологических мембран 2 Жирные кислоты в составе гриацилглицеринов жиров играют роль главного запаса энергии в организме животного 3 ПНЖК служат субстратом при синтезе таких физиологически активных веществ как просганонды. Кроме того, некоторые ПНЖК сами являются биорауляторами. Природные ПНЖК могут содержать до шести двойных связей. Двойные связи в них всегда разделены метиленовой 1рупиой и практически всегда находятся в цис конформации 1. Для этих соединений принята упрощенная номенклатура. Строение жирной кислоты ЖК при помощи нее описывается в виде аббревиатуры МКп1 Где М количество атомов углерода. I. позиция первой двойной связи относительно мстильной группы алкильного конца цепи. Основными компоненгамн мембраны эукариотов являются глицсрофосфолнпиды и сфинго. В г. В ефннголипидах жирные кислоты связаны амидной связью с остатком сфпнгозина Рис. Рис. Липиды клеточных мембран, содержащие наибольшее количество ГТНЖК а название глицерофосфолилида, содержащею ооаток К 6название сфинюлипила. По типу метаболизма ПМЖК делятся на семейства в зависимости от предшественника, из которого они синтезируются в организме. У животных главными предшественниками являются линоленовая 3п, линолевая 2п6, пальмитиновая 1п7 и олеиновая 1п9 кислоты Рис. Лино. Их дефицит в диете приводит к возникновению различных патологических симптомов. Синтез полиненасыщенных жирных кислот осуществляется в организме при помощи реакций элонгации и десатурации. Жирные кислоты семейства п3. Наиболее распространенными представителями семейства линоленовой кислоты п3 являются эйкозапентаеновая ЭПК 5п3 и докозагексаеновая ДГК 6п3 кислот, наибольшие количества которых находятся в коре головного мозга, сетчатке глаз, везикулярных железах и мышцах. Состав ПНЖК в липидах в значительной степени определяется диетой . Существенное влияние на этот состав оказывают особенности обмена и метаболизма ЖК отдельных индивидуумов 6. Потребление с пищей различных п3 ЖК приводит к изменению пропорций жирных кислот в сосгаве фосфолипидов мембран клеток. Обычно увеличение их содержания происходит за счет уменьшения количества п6 кислот изза лимита общего содержания ПНЖК в клеточных мембранах. Группы людей, получающие диеты, обогащенные п3 кислотами, менее подвержены ишемической болезни сердца и имеют меньшую свертываемость крови, что связывают с ослабленной агрегацией тромбоцитов 8,9. Клинические исследования показывают положительный эффект присутствия в нище п3 кислот на уменьшение агрегации тромбоцитов, понижение кровяного давления, ослабление циркуляции трнацилглицеринов и холестерина. Помимо сердечнососудистой системы показаны положительные эффекты этих ЖК при артритах и нарушении функций почек, сочетающихся с нарушенными иммунным и воспалительным ответами организма . Жирные кислоты семейства п6. Арахидоновая кислота 4п6 главный представитель семейства п6. Как в свободном виде, так и составе различных фосфолипидов она встречается в большинстве органов и тканей млекопитающих. Наиболее богата АК печень. В нормальном состоянии из семейства п6 только 4п6 и 2п присутствуют в организме в заметных количествах.