Производные нуклеиновых кислот, содержащие модифицированные звенья 2'-О-алкильного типа: 2'-аминокислотные и 2'-альдегидные олигонуклеотиды

• Автор: Казанова, Евгения Викторовна
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 142 с. : ил.

Центральная роль как иммунорегулятора иллюстрируется сю консервативностью в процессе эволюции. В клеточном ядре транскрипционный фактор связывается через трансактивационныс домены с кВучастком ДНК, который содержит пар оснований 5 где А или , Т или С, , , Т, С 7,8,9. Следует отметить, что нуклеотидная последовательность некоторых функционально активных кВучастков можег отличаться от указанной. Согласно данным РСА разрешение 2. А комплекса гомодимера р и олигонуклсотидиого дуплекса, содержащего кВучасгок пептидные петли белка образуют обширную поверхность контактов с гетероциклическими основаниями в большой бороздке ДНК и углеводофосфатным остовом рис. Рис. Структура комплекса гомодимера субъединицы р кВ человека с кВсодержащим олигонуклеотидным дуплексом по данным РСА 7. Точные белковонуклеиновые контакты в системе кВДНК в растворе были охарактеризованы с помощью химической модификации биополимеров, использования мутантных форм белка и ковалентного белковонуклеинового связывания с последующим выделением пептидного фрагмента, участвующего в комплексообразовании ,. Ьыло показано, что кВучасткн локализованы в промоторах многих генов, кодирующих провоспалительные белки и белки иммунного и стрессового ответов цитокины, включая интерлейкины II, I2, I6, II. Iго класса гистосовместимости, ферменты, факторы роста, факторы транскрипции, регуляторы апоптоза . Iii i i, I. Антиапоптозные белки активно воздействуют на сигнальные пути, регулирующие программируемую клеточную смерть и врожденный иммунитет, что. Главными активаторами кВ являются внешние стимулы гормоны, цитокины, факторы роста и физические воздействия. Активированный кВ, связываясь с промоторами своих геновмишеней регулирует биосинтез десятков белков и факторов, ответственных за физиологические и патофизиологические клеточные процессы . Основное его предназначение заключается в переключении клеток с одной программы развития на другую в целях сохранения функции органа и всего организма. Известно, что только Вклеткн и клетки плазмы крови млекопитающих используют для своего развития . В других клетках находится в цитоплазме в неактивном состоянии в виде комплекса с ингибиторными белками 1кВ. Семейство ингибиторов включает белки кВа, кВ, кВу, кВ8, кВ и Вс. В нестимулированных клетках белки 1кВ специфически связываются с обеими субъединицами , что препятствует их транспорту в ядро ,. Предполагается, что кВ не только маскирует участок , ответственный за транслокацию последнего в ядро, но и содержит специфический участок ядерного экспорта, благодаря которому вновь синтезированные молекулы кВсс, проникая в ядро, могут извлекать уже находящийся там фактор и возвращать его в цитоплазму. Такой способностью к ядерному экспорту не обладают молекулы 1кВр и кВ. На эмбриональных фибробластах мышей, нокаутированных по различным типам 1кВ, изучена роль каждого из ингибиторных белков в регуляции активности . Диссоциация комплекса 1кВ с белками происходит в результате фосфорилирования ссрииовых остатков и кВ протеинкиназами ,,. Высвобожденный поступает в ядро, где участвует в процессах инициации транскрипции генов, кодирующих сигнальные, защитные белки, провоспалительные цитокины и др. В связывается с белком убиквитииом, что служит сигналом для его деградации 8протеосомами. Высокомолекулярный киназный комплекс I состоит из каталитических субъединиц 1ККа и 1КК3 и регуляюрпой субъединицы ККу или , i . Нокаут по различным типам субъединиц киназного комплекса позволил выявить их значение для активации . Выло показано, что выведение из строя I или 1ККа приводит к летальному исходу или существенным нарушениям биологических процессов соответственно. Пара I и ККу обеспечивает канонический путь активации через стадии фосфорилирования и деградации кВ ,,, в то время как I включена в альтернативный путь, приводящий к ядерпой трамслокации димера ,. Этот путь существенен для развития лимфоидных органов и адаптивного иммунного ответа, но не для других кВзависимых функций, таких как ингибирование апоптоза и врожденный иммунитет. Общая схема активации сигнального каскада кВ представлена на рис.