Разработка подходов для изучения механизма действия и поиска новых ингибиторов интегразы ВИЧ-1

• Автор: Королев, Сергей Павлович
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 151 с. : ил.

Праймером для синтеза цспи кДНК служит клеточная , часть которой образует комплементарный комплекс с участком вирусного генома. Далее эта цепь ДНК используется в качестве матрицы для синтеза цепи ДНК. Образовавшаяся двуцепочечная кДНК транспортируется в ядро в составе предиптеграционного комплекса ПИК, включающего ряд вирусных белков интегразу, матриксный белок МЛ, обратную транскриптазу, нуклеокапсидный белок и регуляторный белок V Vi i , , а также клеточные белки , I , и . Ядерная локализация обеспечивается наличием сигналов ядерной локализации у ИИ, МА, V и . После транспорта в ядро ДНК копия ковалентно интегрируется в геном клеткихозяина благодаря каталитической активности ИН с образованием провирусиой ДНК . Поздняя стадии репликативного цикла ВИЧ1 начинается с регулируемой экспрессии интефированного провирусного генома, затем происходит процессинг транслированных вирусных белков вирусной протеазой с последующей сборкой новых вирионов, которые высвобождаются из клетки и инфицируют новые клеткимишени, завершая жизненный цикл вируса 9, . Рис. Репликативный цикл ВИЧ и точки приложения ВААРТ. Для борьбы с ВИЧ1 используется высокоактивная антиретровирусная терапия терапия. На настоящий момент для применения в качестве компонентов ВААРТ одобрены противовирусных препаратов . В основном это нуклеозидные и ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы ВИЧ1 НИОТ и ННИОТ и ингибиторы протеазы ИП, кроме того разработан ингибитор проникновения маравирок, блокирующий взаимодействие 5 Рис. В конце года Управление по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами США iii, одобрило к применению новое средство для лечения СПИДа препарат I или ралтегравир МК, который разработан и производится компанией i 3. Интерес к этому событию обусловлен тем, что ральтегравир является первым разрешенным к применению ингибитором интеграции ВИЧ1. Первые результаты применения ралтегравира в качестве одного из компонентов ВААРТ были многообещающими . Применение ралтегравира привело к значительному снижению вирусной нагрузки ВН количество вирусной РНК снижалось до уровня ниже копиймл, а также к заметному увеличению количества С Тлимфоцитов . Препарат хорошо переносился пациентами, а также не взаимодействовал с другими антиретровирусным препаратами . Еще один ингибитор интеграции ВИЧ1 элвитегравир сейчас находится на последней стадии клинических испытаний и показывает неплохие результаты . Ралтегравир, элвитегравир и все остальные ингибиторы интеграции ВИЧ1, находящиеся на стадии клинических испытаний, являются специфическими ингибиторами одной из стадий интеграции переноса цепи и имеют общий механизм действия. Обзор литературы мы решили посвятить рассмотрению проблем и перспектив использования ралтегравира и других ингибиторов интеграции ВИЧ1, которые находятся на стадии клинических испытаний. Однако, прежде, чем говорить об ингибиторах интеграции, необходимо кратко рассмотреть механизм самого процесса интеграции ВИЧ1, осуществляемого ИМ. Как отмечалось выше, ИМ ВИЧ1 осуществляет встраивание интеграцию вирусной ДНК копии в хромосому зараженной клетки. Процесс интеграции начинается в цитоплазме и протекает в несколько стадий Рис. Вирусная ДНК содержит на обоих концах прямые повторы, состоящие из нескольких сотен пар основашш. Каждый длинный концевой повтор ДКП содержит три участка Ш, II и Ш. На расстоянии двух нуклеотидов от Зконцов каждой цепи ДНК находится консервативный динуклеотид СА, который встречается в ДКП всех ретровирусов. ИН в составе ПИКа узнает нуклеотидные последовательности, расположенные на концах участков Ш и Ш вирусной кДНК, связывается с ними и затем катализирует реакцию Зконцевого процессинга. Эта реакция представляет собой эндоцуклсазное расщепление вирусной кДНК, в результате которого с Зконца каждой цепи удаляется динуклеотид ОТ. Расщепление субстрата происходит в результате нуклеофильной атаки молекулой воды фосфатной группы между 2м и 3м нуклеотидами Рис. Затем ПИК транспортируется в ядро, где ИН катализирует стадию переноса цепи.