Синтез конъюгатов α-фетопротеина человека с противоопухолевыми препаратами для направленной доставки в опухолевые клетки

• Автор: Заболотнев, Дмитрий Викторович
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 109 с.

Содержание

Список сокращений

Введение

1. Литературный обзор Получение и оценка биологической

активности комплексов лекарственных соединений с белкамивекторами

1.1. Введение

1.2. Рецепторопосредованный транспорт химиотерапевтических

препаратов в опухолевые клетки с помощью белковых векторных молекул

1.3. Преимущества и недостатки использования систем направленного

транспорта

1.3.1. Ковалентное связывание

1.3.2. Нековалентное связывание
1.4. Критические параметры использования систем направленного
транспорта
1.4.1. Внутриклеточный транспорт ковалентно связанного с вектором
химиотерапевтического препарата
1.4.2. Внутриклеточный транспорт нековалентно связанного с вектором
химиотерапевтического препарата
1.5. Белкивекторы, используемые для создания систем направленного
транспорта
1.5.1. аФетопротеин
1.5.2. Другие белкивекторы
1.6. Методы получения ковалентных конъюгатов макромолекул и
лекарственных препаратов в целях создания систем направленного транспорта
1.6.1. Конъюгаты содержащие тиоэфирную и дисульфидную связь
1.6.2. Конъюгаты содержащие амидную и сложноэфирную связь
1.6.3. Конъюгаты содержащие гидразоновую, озазоновую или
азометиновую связь в спейсерной группе
Противоопухолевые препараты, используемые при создании систем направленного транспор та
Антрациклиновые антибиотики
Ендииновые антибиотики
Обсуждение результатов
Выделение человеческого афсто протеи на
Исследование статуса аминогрупп в афетопротеине
Восстановление дисульфидных связей в афетопротеине
Определение положения модифицированных остатков аминокислот
Удаление 2тиопиридильной защитной группы с остатков
3меркаптопропионовой кислоты
Конъюгаты доксорубицина и афетопротеина
Получение конъюгата доксорубицина и афетопротеина с использованием
Получение конъюгата доксорубицина и афетопротеина с использованием гидразида 3малеимидобензойной кислоты
Определение содержания нековалентно связанного доксорубицина в конъюгатах
Исследование лигаидрецепторного взаимодействия конъюгата флуоресцеина с афетопротеином
Биологическая активность конъюгатов доксорубицина в опытах i vi
Выделение эсперамицина Аь
Получение конъюгата эсперамицина Аь с афетопротеином
Биологические испытания конъюгата эсперамицина с афетопротеина в опытах i vi и i viv
Экспериментальная часть
Список литературы


Злокачественные опухоли представляют одну из основных причин смертности среди населения нашей планеты, особенно в старших возрастных группах. В последние годы, несмотря на значительный прогресс в области профилактики и лечения рака, наблюдается неуклонный рост заболеваемости этим серьезным недугом. Многие исследователи связывают рост заболеваемости злокачественными новообразованиями со стабильно возрастающим загрязнением окружающей среды. По данным ВОЗ ежегодно заболевает раком свыше 5 млн. В последнее время все большее значение в лечении злокачественных новообразований приобретает так называемая химиотерапия, или воздействие на опухолевый процесс с помощью химических фармакологических, лекарственных веществ с целью его замедления, остановки или обращения. При этом используются вещества весьма разнообразного строения и химической природы. Эти соединения могут оказывать на трансформированную клетку различные повреждающие воздействия. Они модифицируют и повреждают клеточные мембраны, нарушают биосинтез белка, процессы клеточного метаболизма и деления, повреждают ДНК и в конечном счете вызывают гибель злокачественной клетки. Основное условие, которое предъявляется к потенциальным противоопухолевым препаратам ПОП, это более высокая токсичность этих препаратов для трансформированных клеток по сравнению с клетками нормальных тканей человека. Применение современных фармакологических средств при некоторых видах рака позволяет добиться полного излечения пациента, однако в большинстве случаев достигается лишь более или менее продолжительная ремиссия и некоторое улучшение качества жизни пациента со злокачественным новообразованием. Это связано с трудностями диагностики злокачественных новообразований, а также с низкой избирательностью действия и, как следствие этого, с побочными эффектами подавляющего большинства ПОП. Одним из основных недостатков применяемых в настоящее время ПОП является их низкая селективность в отношении опухолевых клеток. Большинство ПОП не обладает избирательным действием на опухолевые клетки. Существенно ограничивает возможности химиотерапии злокачественных новообразований первичная и приобретенная устойчивость опухолевых клеток к действию ПОП. Одно из наиболее перспективных направлений в разработке новых ПОП основано на использовании макромолскулярных носителей для более селективной доставки ПОП в раковую опухоль. Это направление весьма интенсивно развивается в последнее время и подразумевает создание и изучение физикохимических и биологических свойств химерных конструкций, в состав которых с одной стороны входит известный или новый ПОП, а с другой высокомолекулярное соединение, которое с той или иной степенью селективности обеспечивает доставку этого компонента в раковую опухоль или клетку. Среди подобных конструкций можно отметить жидкие или твердые золи или гели различного состава, липосомы, полисахариды, полимерные наночастицы, пептиды и белки. При этом доставка действующего компонента может осуществляться по одному из общих механизмов клеточного транспорта. Среди белковых векторов наиболее часто используют антитела, транспортные белки, гормоны и белковопептидные факторы роста. Так как, наиболее высокоспецифичным взаимодействием является лигандрсцспторнос, характерное для некоторых транспортных белков и факторов роста, применение именно этих молекул в качестве векторов доставки ПОП в опухолевые клетки представляется предпочтительным. В связи с этим представляется актуальной разработка методов получения конструкций для направленного транспорта на основе известных белковвекторов и проведение испытаний их противоопухолевой активности в модельных опытах i vi и i viv.