Синтез ацильных производных 20-гидроксиэкдизона и липосомы на их основе

• Автор: Пшунетлева, Елена Альбертовна
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Сыктывкар
• Количество страниц: 140 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Структура и биологическая активность экдистероидов.

1.1.1. Общие представления об экдистероидах.

1.1.2. Биологическая активность экдистероидов.

1.2. Методы химической модификации экдистероидов

1.2.1. Синтез ацетатов

1.2.2. Синтез производных экдистероидов и высших жирных кислот

1.2.3. Синтез производных экдистероидов и неорганических кислот.

1.2.4. Синтез гликозидов
1.3. Методы анализа и идентификации экдистероидов и их производных
1.3.1. Хроматографические методы анализа экдистероидов и их производных
1.3.2. УФ, ИКспектроскопия экдистероидов и их производных.
1.3.3. ЯМРспектроскопия экдистероидов и их производных.
1.3.4. Массспектрометрия экдистероидов и их производных
1.4. Липосомы.
1.4.1. Методы получения липосом.
1.4.2. Определение размеров везикул.
1.4.3. Стабильность липосомальных дисперсий.
1.4.4. Определение эффективности включения веществ в липосомы
1.5. Липосомальные формы лекарственных препаратов.
1.5.1. Транспорт лекарств с помощью липосом.
1.5.2. Экдистероидсодержащие липосомальные препараты
2. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
2.1. Получение ацильных производных гидроксиэкдизона
2.1.1. Синтез производных гидроксиэкдизона
2.1.2. Идентификация продуктов и промежуточных соединений синтеза ацильных производных гидроксиэкдизона
2.2. Получение и характеристика липосомальных форм ацильных производных гидроксиэкдизона.
2.2.1. Определение размеров липосом
2.2.2. Сравнительное исследование включения ацильных производных гидроксиэкдизона в липосомы.
2.2.3. Определение оптимального соотношения липидсубстрат.
2.3. Гидролиз ацильных производных гидроксиэкдизона под действием ферментов.
2.3.1. Гидролиз 2,3,,тетраацетата гидроксиэкдизона.
2.3.2. Гидролиз 2,3,трипальмитата гидроксиэкдизона.
3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
3.1. Реактивы и оборудование.
3.2. Методы анализа и идентификации ацильных производных гидроксиэкдизона
3.3. Химические синтезы
3.4. Получение липосомальных дисперсий
3.4.1. Очистка фосфатидилхолина.
3.4.2. Методика получения липосом.
3.4.3. Методика получения мицелл
3.5. Подготовка препаратов для микроскопии
3.6. Сравнительное исследование включения методом гельхроматографии.
3.6.1. Подготовка колонки.
3.6.2. Методика гельхроматографии и определения включения
3.7. Определение эффективности включения субстрата в липосомах в зависимости от его исходной концентрации.
3.7.1. Количественное определение липида.
3.7.2. Методика определения оптимального соотношения липид
субстрат.
3.8. Определение устойчивости ацильных производных гидроксиэкдизона по отношению к гидролитическим ферментам i vi
3.8.1. Гидролиз 2,3,,тетраацетата гидроксиэкдизона.
3.8.2. Гидролиз 2,3,трипальмитата гидроксиэкдизона.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОД11.
ЛИТЕРАТУРА


Практическая ценность. Разработаны методики синтеза ацильных производных гидроксиэкдизона, в результате чего получен ряд производных, отличающихся числом, положением и природой заместителей. Среди них ацетат и 2,3,трипальмитат получены впервые, а также существенно увеличен выход ацетата гидроксиэкдизона по сравнению с известными данными. Полученные производные, являющиеся синтетическими аналогами запасных форм гормонов линьки насекомых, могут быть использованы в биохимических исследованиях для оценки влияния производных экдистероидов на рост и развитие членистоногих. Получены липосомальные формы ацильных производных гидроксиэкдизона с высоким содержанием экдистероидов, перспективные для применения в качестве лекарственных препаратов ранозаживляющего действия. Апробация работы. Физиологобиохимические аспекты изучения лекарственных растений Новосибирск, , 2 i i, ii i Париж, Франция, , Йена, Германия, , Рапперсвиль, Швейцария, , III Всероссийском совещании Лесохимия и органический синтез Сыктывкар, , Международной конференции Природные и физиологически активные соединения Новосибирск, , IV, VI и VII Молодежных научных конференциях Актуальные проблемы биологии Сыктывкар, , , . Публикации. По теме диссертации опубликована 1 статья, 2 сообщения в сериях Научные доклады Коми НЦ УрО РАН и Новые научные методики Коми НЦ УрО II и тезисы ти докладов на конференциях. Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 0 страницах машинописного текста и включает введение, литературный обзор, обсуждение результатов, экспериментальную часть, заключение, приложение, содержит таблиц и рисунков. Список цитируемой литературы состоит из 0 работ, в том числе иностранных источников. Экдистероиды представляют собой группу природных полигидроксисоединений, структурно близких экдизону основному гормону линьки насекомых. Первый представитель этого класса соединений экдизон Е был впервые выделен в г. А.Бутенандтом и П. Карлсоном из куколок тутового шелкопряда x i 1,7. В природе экдистероиды синтезируются беспозвоночными для контроля процессов, сопровождающихся сложной перестройкой организма, таких как линька, метаморфоз, диапауза зооэкдистероиды. Гормональный механизм действия экдистероидов, включающий стадии регуляции многих физиологических и биохимических процессов в организме, наиболее хорошо исследован у насекомых 1. Соединения экдистероидной природы широко представлены и в растениях фитоэкдистероиды. Наиболее часто встречаются экдизон и гидроксиэкдизон Е, отличающийся дополнительной гидроксильной группой в ом положении рис. Их содержание в некоторых видах растений довольно высоко и может составлять до 1 2 мае. Считают, что экдистероиды в растениях выполняют защитную функцию, проявляя антифидантную активность по отношению к насекомымфитофагам 1. Экдистероиды представляют собой стероидные гормоны, в структуру которых входят четыре сконденсированных кольцевых ядра и боковая цепь, как у холестерина рис. Характерными особенностями их структуры являются циссочленение колец А и В, наличие агидроксиА76кетоиной 1руппировки
в кольце В, а также большого числа гидроксильных групп как в стероидном ядре, так и в боковой цепи. Жесткость стероидного ядра и подвижность боковой цепи, конформация которой зависит от окружения, обуславливают специфическое связывание этих соединений с рецепторами насекомых и другими макромолекулами 1,7. Рис. С2, С3 и в боковой цепи С, С. Из растений были выделены ацетаты Е ,,, изопропилиденовые производные Е по положениям 2,3 и , ,, бензоаты . В насекомых идентифицированы производные Е и Е с неорганическими кислотами фосфаты, впервые выделенные из яиц саранчи , сульфаты, обнаруженные не только в насекомых, но и в растениях 9,. Гликозиды экдистероидов были выделены из растений, насекомых и нематод 9,,. Показано, что образование сульфатов наряду с образованием фосфатов является важным процессом инактивации Е при его введении в организм извне у некоторых видов насекомых 1,7. Роль изопропилиденовых производных до сих пор не выяснена.