Стерины и стериноподобные соединения из некоторых морских беспозвоночных

• Автор: Пономаренко, Людмила Петровна
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 129 с. : ил

Соединения нестероидного характера и фрагментарные ионы в описаниях массспектрометрических фрагментаций пронумерованы обычным способом. Ниже даются структуры и буквенные обозначения тетрациклических ядер идентифицированных в работе стерииов, и аналогичные структуры и обозначения для стеринов, которые, хотя и не были найдены нами, но упоминаются в литературном обзоре или при обсуждении результатов схема 1. Варианты боковых цепей в стеринах и их цифровые обозначения приведены на схеме 2. Схема 1. Тстрациклические фрагменты стеринов и их буквенные обозначения. НМВС i i гетсроядерная многополосная корреляция. Стериновые фракции из морских организмов обычно получают путем экстракции неполярными растворителями и последующей колоночной или препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле. В то же время далеко не всегда при этом удается получить без применения какихто дополнительных процедур очистки фракции, свободные от значительных количеств нестериновых примесей. Подробнее эта проблема будет обсуждена в разделе Обсуждение результатов. Качественный и количественный анализ стероидных фракций обычно проводят хроматографическими методами, преимущественно с помощью газожидкостной хроматографии ГЖХ. Анализ ведут на капиллярных колонках с БЕЗО, ОУ1 и СВР5 в качестве стационарных фаз. Идентификация пиков на хроматограммах осуществляется сравнением времен удерживания анализируемых веществ с временами удерживания стандартных соединений. Удобнее сравнивать не абсолютные времена удерживания, а относительные, рассчитанные относительно стандарта чаше всего холестерина, так как эта характеристика не зависит от условий анализа. Использование нескольких колонок с различными фазами повышает надежность идентификации. Известно, что удерживание молекулы на сорбенте зависит от ее структуры количества атомов углерода, наличия и положения заместителей, двойных и тройных связей. Итох с соавторами 1 установили количественные зависимости между структурой стеринов и относительным временем удерживания ОВУ. На основе анализа 8 ацетатов стеринов и тритерпеновых спиртов растительного происхождения они рассчитали поправочные коэффициенты, отражающие влияние различных двойных связей, алкильных заместителей и других структурных особенностей этих соединений на удерживание этих веществ на колонках . Сравнивая полученные значения с экспериментальными данными, можно сделать выбор наиболее вероятной структуры. Однако даже такой мощный метод разделения, как ГЖХ, часто не позволяет полностью разделить сложные смеси стеринов из морских организмов. Во многих случаях ГЖХанализ таких суммарных стериновых фракций остается поэтому недостаточно надежным и при структурной идещгификации отдельных стериновых компонентов приходится учитывать не только хроматографические, но и спектральные свойства. С этой целью широко применяют сочетание ГЖХ и массспектрометрии ГЖХ МС, что позволяет в процессе хроматографического разделения соотвегствующей фракции немедленно получать массспектры ее компонентов. Наиболее часто для идентификации стеринов применяется массспектрометрия электронного удара. Основные закономерности фрагментации стероидных спиртов были установлены Джерасси 2, Вульфсоном и Заикиным 3 и другими учеными. Массспектрометрическая фрагментация обусловлена в значительной мере положением кратных связей в ядре и в боковой цепи. Для анализа используют как свободные стерины, так и их ацетаты и триметилсилильные производные. Основные особенности фрагментации мы рассмотрим на примере ацетатов стеринов, так как их чаще используют с этой целью. Молекулярную массу соединения устанавливают по сигналу молекулярного иона или иона М АсОН. Нетрудно рассчитать соответствующие значения тг для ацетатов стеринов с различным числом углеродных атомов и двойных связей таблица 1. Характеристичным для массспекрометрии ацетатов стеринов является распад, связанный с отщеплением боковой цепи, части кольца О и уксусной кислоты в случае свободных стеринов отщепляется вода, который приводит к образованию иона номерами 1 обозначены структуры боковых цепей стеринов во вводной части диссертации.