Исследование механизма ингибирования гемолиза заряженными субстанциями

• Автор: Андия-Правдивый, Юлиан Энрикевич
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 113 с. : ил.

Оглавление.

Список сокращений.

Введение.

1. Обзор литературы. Эффекторы системы комплемента

1.1. Введение. Роль системы комплемента в организме человека.

1.2. Пути активации системы комплемента

1.2.1. Альтернативный путь активации системы комплемента

1.2.1.1. Белок СЗ.

1.2.1.2. Инициирующая СЗкоивертаза.

1.2.1.3. Связанная СЗС5конвертаза.

1.2.1.4. Узнавание и усиление ответа

1.2.2. Классический путь активации системы комплемента
1.2.2.1. С1. Структура, активация и регуляция.
1.2.2.2. Образование, структура и регуляция СЗС5конвергазы
1.2.3. Пентаксиновый путь активации системы комплемента.
1.2.4. Лсктиновый путь активации системы комплемента
1.2.5. Терминальный этап. Мембраноатакующий комплекс.
1.2.5.1. С5Ь
1.2.5.2. С5Ь
1.2.5.3. С5Ь
1.2.5.4. ПолиС
1.2.5.5. Регуляция образования МАК
1.3. Ингибиторы классического пути
1.3.1. Полипептиды.
1.3.2. Компстатин.
1.3.3. Полиионы.
1.3.4. Бензамидины, гуанидины и сульфоннлфториды
1.3.5. Антранилаты
1.3.6. Производные левопимаровой кислоты
1.3.7. Фенотиазины
1.3.8. Фенилиндандионм
1.3.9. Аминокислоты и их производные
1.3 Диамины
1.3 Производные олеановой кислоты.
1.3 Другие органические соединения различной структуры
1.3 Неорганические соединения.
1.4. Стимуляторы природного С1ингибитора.
1.5. Соединения, которые индуцируют выработку С1ингибитора.
1.6. Ингибиторы альтернативного пути
1.6.1. Полипептиды
1.6.2. Полиионы.
1.6.3. Аминокислоты и их производные
1.6.4. Амидины и гуанидины
1.6.5. Другие органические соединения различной структуры.
1.7. Заключение.
2. Обсуждение результатов.
2.1. Синтез производных бисфенола А с различными анионными группами.
2.2. Синтез дисульфатов бисфенолов, ароматических спиртов и бетулииа
2.3. Конденсация анафтола с карбонильными соединениями.
2.4. Получение дисульфатов орпозамсщсиных производных бисфенола Л
2.5. Получение 2замещенных малоновых кислот.
2.6. Лнтигемолитическая активность полученных соединений.
2.7. Количественная взаимосвязь структураактивность ОБА.
2.8. Синтез амфифильного дисульфата бисфенола и изучение его антигемолитнчсской активности в составе липосомных дисперсий
2.8.1. Синтез амфифильного дисульфата бисфенола
2.8.2. Влияние амфифильного дисульфата бисфенола в составе липосом на гемолитическую систему
2.8.3. Зависимость антигсмолитической активности липосом с дисульфатом 1,1 дн4гидроксифенилгексадекана от его доли в бислое
2.8.4. Оценка расстояния между парами заряженных групп в липосомах с днсульфатом 1,1ди4гидроксифенилгексадекана в бислое
2.9. Оценка влияния синтезированных соединений на систему комплемента
3. Экспериментальная часть.
3.1. Реактивы, растворители, приборы.
3.2. ОКарбоксиметилбисфенол А 3 и днОкарбоксимстилбисфеиол А
3.3. 2,2Бис4фосфонооксифенилпропан
3.4. 2,2Бис4гндрокси3хлорфенилиропан а.
3.5. 2,2Бис4гндрокси3йодфенилпропан а
3.6. 2,2Бис3аллил4гидроксифснилиропан а
3.7. 2,2Бис4гидрокси3проиилфенилпропан а.
3.8. Третбутилирование бисфенола А
3.9 Ацилирование бисфенола А.
3.9.1. ДиОацетил бисфенол А
3.9.2. Перегруппировка диОацетил бисфенола А в условиях реакции Фриса
3 Конденсация аиафтола с ацетоном
3 Конденсация анафтола с пропаналем.
,1Ди4гидроксифенилгексадекан а
3 Синтез дисульфатов бисфенолов 7, ароматических спиртов , бстулииа , сульфата Окарбоксиметнлбнсфенола А
Фенилмалоновая кислота .
Бснзилмалоновая кислота
Цнклопентилмалоновая кислота .
3 Определение биологической активности.
3 Определение функциональной активности компонентов С1г, С1 б методом иммуноферментного анализа
3 Получение липосом из яФХ с дисульфатом 1,1ди4гидроксифеннлгексадекана в бислое
3 Определение влияния дисульфата 1,1ди4гидроксифенилгексадекана в составе липосом на гемолитическую систему.
3 Определение ККМ дисульфата 1,1ди4гидроксифепилгсксадекана
4. Выводы
Благодарности
Список литературы


Полиморфноядерные граиулоциты и макрофаги обладают специфическими рецепторами к мелким фрагментам белков СК СЗа, С5а, которые образуются на поверхности мишеней в результате каскада иротеолитических реакций. Диффундируя в окружающую среду, эти фрагменты привлекают фагоциты хемотаксис и, связываясь с ними, вызывают их активацию. Лизис клеток мишеней. Протеолнтическнй каскад СК завершается погружением гидрофобного зонда в липидный бислой мембраны клеткимишени и се последующим осмотическим разрывом и лизисом. СК отличает свое от чужого. Относясь к факторам врожденного иммунитета, комплемент реализует механизмы, позволяющие отличать свое от чужого. СЗЬ. Потенциально СК может разрушить любую клетку, с которой связались ее инициирующие компоненты. Дя предотвращения деструктивного действия СК по отношению к собственному организму осуществляется ее жесткий контроль при помощи группы структурно и функционально связанных белков, называемых регуляторами активации СК рис. В эту группу входят как белки плазмы, фактор II, С4 связывающий белок, так и мембранные белки клеточных стенок рецептор комплемента тип 1, фактор ускорения распада, мембранный кофакторный белок. Помимо белков группы регуляторов активации СК в контроле каскада комплемента принимают участие С 1ингибитор, карбоксипептидаза и СП. Хотя активация СК и не является первопричиной какоголибо из известных заболеваний, ее нежелательная активация приводит к повреждению тканей при протекании многих из них табл. Существенная роль активации СК была показана на животных моделях заболеваний с использованием комнлеменгдефнцитпых и трапегеипых животных 7. Нарушения и заболевания, связанные с активацией СК, хорошо изучены и рассмотрены в ряде обзорных статей и монографий 8, 9, , . Например, шок при бактериемии, вызванной грамотрицательными бактериями, отчасти обусловлен системной активацией СК эндотоксином. Возникающие при этом в больших количествах СЗа и С5а вызывают активацию и дегрануляцию нейтрофилов, базофилов и тучных клеток. Внутрисосудистая агрегация нейтрофилов приводит к диссеминированному свертыванию крови и задержке образовавшихся мнкроэмболов в капиллярах легких, где продукты лейкоцитарного происхождения включая эластазу и свободные радикалы могут вызвать синдром шокового легкого. Он характеризуется интерстициальным отеком легкого, вследствие повреждения мелких сосудов, образованием нейтрофильпого экссудата в альвеолах и артериальной гипоксемней. Искусственное кровообращение через аппараты сердцелегкие или купрофановыс диализаторы может стать причиной экстракорпоральной активации СК, которая сопровождается временной лейкопенией, примерно такой же, как при агрегации нейтрофилов в легких. Повреждение ткани вследствие ишемического некроза способно вызвать локальную активацию СК и интенсивную фиксацшо мембрапатакуюгцих комплексов на клеточной мембране. Подобный эффект вызывает введение растворимого рекомбинантного 1 . Активация СК имеет существенное значение в патогенезе тканевой деструкции при заболеваниях, обусловленных образованием иммунных комплексов. Формирование таких комплексов возможно в тканях, например, в почечных клубочках при нефропатии, вызванной образованием аутоантитсл к гломерулярной базальной мембране, или на концевых пластинках двигательных нейронов при злокачественной миастении с образованием аутоантител к холипорсцепторам. В других случаях циркулирующие иммунные комплексы могут отлагаться на стенках кровеносных сосудов. Например, при бактериальном эндокардите инфицированный сердечный клапан представляет собой источник образования иммунных комплексов, которые оседают в почках или других участках микрососудистого русла. Этим обусловлено повреждение тканей при мембранозном нефрите, который в эксперименте удастся вызвать антителами к субэпнтелнальиым антигенам. Воспалительную реакцию в этом случае не подавляет устранение нейтрофилов, однако она почти полностью отсутствует у животных, дефицитных по С5. Базальная мембрана, вероятно, служит физическим барьером на пути миграции нейтрофилов, поэтому наблюдаемая высокая протеинурия обусловлена только фиксацией мембранатакующего комплекса.