Синтетические пептиды, взаимодействующие с различными типами холинорецепторов

• Автор: Хрущев, Алексей Юрьевич
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 135 с. : ил.

Содержание

ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Введение.

2. аКонотоксины инструменты для изучения нАХР.

Особенности структуры и специфичность.

3. Особенности синтеза аконотоксинов.

ГЛАВА И. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

1. Походы к синтезу аконотоксинов.

2. Выбор последовательностей природных аконотоксинов

и их аналогов.
3. Синтез аконотоксинов.
4. Исследование взаимосвязи между структурной и
биологической активностью аконотоксинов и их аналогов.
Заключение
ГЛАВА III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Наличие в аконотоксинах двух дисульфидных мостиков позволяет существовать трем дисульфидным изомерам, и как правило, только один из них проявляет активность . Преимуществом первого подхода является отсутствие этапа промежуточной очистки и, как следствие, более высокие выходы целевого продукта . Главным недостатком является неоднозначность в расположении дисульфидных связей. При замыкании дисульфидных связей в пептидах, имеющих последовательность природных аконотоксинов, главный продукт обычно имеет природное расположение дисульфидных связей, тогда как в случае синтеза аналогов аконотоксинов, содержащих замены или делеции аминокислотных остатков, часто в качестве основного продукта реакции образуются изомеры с иным расположением дисульфидов. Целью данной работы было получение новых активных аналогов аконотоксинов, имеющих более высокую избирательность к определенным подтипам нАХР и ацетилхолинсвязывающим белкам, а также разработка оптимальной методики синтеза препаративных количеств аналогов аконотоксинов. В результате этой работы, на основании анализа влияния роли состава и реакционной смеси, а также порядка расположения ортогональных защитных групп остатков цистеина, были разработаны оптимальные условия получения препаративных количеств природных аконотоксинов и их аналогов с требуемым порядком замыкания дисульфидных связей. На основании компьютерного моделирования, а также эмперического подхода к выбору аминокислотной последовательности были получены новые данные о влиянии одиночных, а также множественных аминокислотных замен на эффективность связывания аналогов аконотоксинов Рп1А, 1ш, АгШ, 11А, Ус 1. МП с а7 подтипом нАХР, а также с АХСБ А. Ь. i. Также были получены два новых аналога аконотоксина Рп1А, которые показали более высокое сродство, чем природный пептид, к а7 нАХР и А. Погтса АХСБ. ГЛАВА I. Введение. Конотоксины инструменты для изучения нАХР. Исследование лигандсвязывающих сайтов нАХР с помощью синтетических аналогов аконотоксинов. Ацетилхолинсвязывающие белки модель лигандсвязывающих сайтов нАХР. Структурнофункциональные исследования аконотоксинов и ацетилхолинсвязывающих белков. Подходы к синтезу аконотоксинов. Синтез с одновременным замыканием дисульфидных связей. Синтез с поэтапным замыканием дисульфидных связей. Защитные группы тиольной функции цистеина. Защитные группы, образующие производные тиазолидинов. Защитные группы, образующие дисульфидныс производные. Методы создания дисульфидных связей. Удаление защит и создание дисульфидной связи, исходя из соответствующих 8Нпроизводных пептидов. Замыкание дисульфидных связей через тиолиз или тиолдисульфидный обмен. Замыкание дисульфидных связей на полимерном носителе. Введение. Конотоксины небольшие пептиды, выделенные из яда морских улиток семейства. Структура этих пептидов фиксирована двумя дисульфидными связями, соединяющими 13 и 24 остатки цистеина 14. Природные аконотоксины обладают различной специфичностью к определенным подтипам холинорецепторов и служат инструментами для анализа центра связывания в различных типах никотиновых холинорецепторов 5. В настоящее время аконотоксины используются в ряде лабораторий для широкого спектра физиологических и фармакологических исследований нервных систем как позвоночных, так и беспозвоночных 6. Один конотоксин уже используется в фармацевтической практике для снятия хронической боли, под коммерческим названием Зиконотид i, который является синтетическим соконотоксиномМУИА. В настоящее время это единственное доступное соединение, селективно блокирующее тип кальциевых каналов и не вызывающее привыкания7. Конотоксины исследуются в качестве эффективных средств борьбы с эпилепсией, параличом, психическими расстройствами . Выделение индивидуальных конотоксинов из яда морских улиток является трудоемкой задачей, поскольку цельный яд содержит до. По этой причине химический синтез конотоксинов является в настоящее время актуальной задачей. В настоящем обзоре рассматривается использование аналогов аконотоксинов в исследованиях нАХР, а так же различные стратегии синтеза пептидов, содержащих дисульфидные мостики, описанные в современной научной литературе.