Новые возможности мицеллярной и микроэмульсионной электрокинетической хроматографии при определении катехинов и катехоламинов в природных объектах

• Автор: Ганжа, Олеся Владимировна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 207 с. : ил.

1.1. Аппаратура

Ш.2. Реагенты

Ш.З. Методы исследования.

1.3.1. Оптимизация условий электрофоретического детектирования.

1.3.2. Использование капиллярного зонного электрофореза КЗЭ для разделения полифенов.
1.3.3. Определение катехинов и кофеина в режиме мицеллярной электрокинетической хроматографии
1.3.4. Мицеллярная электрокинетическая хроматография с обращенной полярностью ОП МЭКХ при одновременном определении полифенолов и кофеина
III. 3.5. Построение градуировочных зависимостей аналитов для количественного анализа реальных объектов

1П.3.6. Расчет констант комплексообразования

Ш.З. 7. Определение полифенолов методом микроэмульсионной электрокинетической хроматографии.

III.3.7.1. Приготовление микроэмульсии

Ш.3.8. Использование метода обращеннофазовой
высокоэффективной жидкостной хроматографии ОФ ВЭЖХ для определения полифенолов и кофеина
1.3.9. Пробоподготовка реальных объектов к электрофоретическому и хроматографическому
анализу.
1.3 Определение хроматографических и электрофоретических характеристик аналитов параметров удерживания, эффективности и факторов селективности разделения и разрешения
1.3 Электрофоретическое разделение биогенных аминов в режиме ОП МЭКХ
III. . i концентрирование в режиме
мицеллярной электрокинетической хроматографии
IV. ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРИРОДНЫХ АНТИОКСИДАНТОВ И КОФЕИНА В РАЗЛИЧНЫХ РЕЖИМАХ КАПИЛЛЯРНОГО
ЭЛЕКТРОФОРЕЗА
IV. Определение полифенолов в капиллярном зонном
электрофорезе.
IV.2. Факторы, определяющие закономерности одновременного электрофоретического определения полифенолов и кофеина в мицеллярной
электрокинетической хроматографии МЭКХ
ТУЗ. Электрофоретическое разделение полифенолов и кофеина в режиме мицеллярной электрокинетической хроматографии с обращенной полярностью ОП МЭКХ
IV,3.1, Влияние органических растворителей на
разделение катехинов и кофеина в режиме ОП МЭКХ.
IV.3,2. Влияние комплексообразующих агентов на
селективность разделения в ОП МЭКХ
IV3.2.1. Роль гидроксикислоты в составе рабочего буфера как конкурирующего комплексообразующего
агента.
IV. 3.2.2. Влияние нейтрального и заряженного циклодекстринов на селективность разделения
полифенолов
IV.3,3. Исследование возможностей
микроэмульсионной электрокинетической хроматографии
МЭЭКХ для определения полифенолов.
VI.3.4. Сравнительные оценочные характеристики режимов МЭКХ, 1 МЭКХ и МЭЭКХ с УФ
детектированием при электрофоретическом определении катехинов и кофеина в природных
объектах
IV. 3.4.1. Использование микроэмульсионной электрокинетической хроматографии МЭЭКХ для определения стероидных гормонов.
V. РАЗДЕЛЕНИЕ БИОГЕННЫХ АМИНОВ МЕТОДОМ МИЦЕЛЛЯРНОЙ ЭЛЕКТРОКИНЕТИЧЕСКОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ОТСУТСТВИИ
ЭЛЕКТРООСМОТИЧЕСКОГО ПОТОКА ОП МЭКХ
V Влияние комплексообразующих и ионпарных агентов на селективность разделения биогенных аминов методом ОП МЭКХ
VI. ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИЛОЖЕНИЕ
У1.1. Электрофоретическое определение полифенолов в
зеленом и черном чае
У1.2. Определение катехоламинов в моче методом мицеллярной электрокинетической хроматографии с
обращенной полярностью
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


ИЛ . Электрофорез как метод разделения предложен в х гг. XX в. Тизелиусом Нобелевская премия г. Бурное развитие метода капиллярного электрофореза КЭ началось после демонстрации Йоргенсоном и Лукасом сепарационных возможностей кварцевого капилляра с внутренним диаметром мкм начало х годов XX 1. Метод основан на разделении компонентов сложной смеси в кварцевом капилляре под действием приложенного электрического поля. Качественной характеристикой вещества является время миграции, а количественной высота или площадь пика пропорциональная концентрации вещества. При 2,5 на поверхности кварцевого капилляра находятся диссоциированные силанольные группы, придающие ей отрицательный заряд. При 2 диссоциация силанольных групп практически подавлена, и поверхность становится нейтральной. При наложении продольного электрического поля в капилляре возникает движение носителей электрических зарядов во взаимно противоположных направлениях. В капилляре под действием электрического поля возникает течение жидкости, так называемый электроосмотический поток ЭОП, который осуществляет пассивный перенос раствора внутри капилляра за счет избыточного количества катионов. Скорость ЭОП зависит от раствора. В сильнокислых растворах ЭОП отсутствует, в нейтральных и щелочных скорость его возрастает до максимально возможной. ЭОП имеет плоский профиль потока в отличие от параболического в ВЭЖХ, который при движении зон компонентов внутри капилляра практически не вызывает их уширения. КЭ характеризуется очень высокой эффективностью сотни тысяч теоретических тарелок. Рэоп ПОДВИЖНОСТЬ ЭОП, СМ2ВМИН. В свою очередь, рэф может быть найдена из уравнения . Мэф7 П. Подвижность ЭОП определяют по формуле Н. Цп Н. Катионные компоненты пробы, двигаясь к катоду, будут обгонять ЭОП. Рис. ИЛ. Рис. П.1. Нейтральные компоненты пробы будут перемещаться к аноду со скоростью ЭОП, а заряженные отрицательно со скоростями меньшими, чем скорость электроосмотического потока. Медленно мигрирующие анионы появятся на выходе после ЭОП. Если скорость их миграции превышает по абсолютной величине скорость ЭОП, они будут выходить из капилляра в прианодное пространство. Различают три способа ввода пробы гидродинамический электрокинетический, гидростатический. При вводе пробы давлением в герметичном узле ввода создается небольшое избыточное давление воздуха, которое вдавливает пробу в капилляр. Давление либо повышается в сосуде для пробы, либо снижается на конце капилляра. В коммерческих приборах это наиболее распространенный способ 2. При этом способе ввода сосуд с пробой, в который погружен капилляр, соединяется с источником напряжения, и под действием короткого импульса напряжения компоненты пробы перемещаются в разделительный капилляр. Количество введенной пробы зависит от величины приложенного напряжения и времени, в течение которого оно приложено, а также подвижности компонентов. Электрокинетический ввод пробы находит широкое применение за счет того, что с помощью так называемого электростэкинга удается сконцентрировать пробу от до 0 раз. II. Непосредственно в капилляре, в части, близкой к выходному концу, в режиме реального времени. В зоне детектирования с внешней стенки капилляра снимают защитное полиимидное покрытие. КЭ. II. УФВДетектирование наиболее распространенный вариант детектирования. Для соединений, определяемых с помощью КЭ и не поглощающих в УФдиапазоне, существует возможность регистрации методом косвенного УФдетектирования. В состав рабочего электролита вводят небольшое количество хромофора вещества, поглощающего на нужной длине волны. II. Флуоресцентное детектирование используют для регистрации веществ, обладающих собственной флуоресценцией или для которых возможно получение флуоресцирующих производных. Метод отличается высокой селективностью, а его чувствительность на порядка превышает возможности УФдетектирования. Часть капилляра облучается ультрафиолетовым светом соответствующей длины волны, а испускаемый свет регистрируется перпендикулярно направлению входящего излучения.