Потенциометрия в исследовании антиоксидантной активности объектов растительного происхождения

• Автор: Шарафутдинова, Елена Николаевна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Екатеринбург
• Количество страниц: 138 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
Введение

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Механизмы образования свободных радикалов.

1.1.1. Активация кислорода в ферментативных реакциях.

1.1.2. Радикальные окислительные процессы.

1.2. Основные механизмы защиты организма от активных форм

кислорода
1.2.1. Взаимодействие низкомолекулярных тиольных антиоксидантов с активными формами кислорода.

1.2.2. Взаимодействие низкомолекулярных фенольных антиоксидантов

с активными формами кислорода

1.3. Методы исследования составляющих антиоксидантной защиты.
1.4. Методы исследования общей антиоксидантной
активности
1.4.1. Спектрофотометрические и люминесцентные методы исследования
1.4.2. Электрохимические методы определения антиоксидантов.
1.4.3. Другие методы определения антиоксидантной
активности
Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Аппаратура.
2.2. Реактивы.
2.3. Объекты исследования.
2.4. Методы исследования
2.4.2. Фотохемилюминесцентный метод
2.4.3. Исследование противорадикальной активности с использованием стабильного радикала 2,2дифенил1пикрилгидразила
2.4.4. Метод хемилюминесцентного определения сверхслабого свечения продуктов перекисного окисления липидов ПОЛ, накапливающихся в мембранах липосом.
2.4.5. Метод ФолинаЧокальтеу.
2.4.6. Метод циклической вольтамперометрии
Глава 3. ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ ПРИРОДНЫХ И СИНТЕТИЧЕСКИХ АНТИОКСИДАНТОВ
3.1. Исследование злектрохимических процессов окислениявосстановления природных и синтетических антиоксидантов методом циклической вольтамперометрии.
3.2. Исследование АОА потенциометрическим методом с использованием медиаторной системы.
3.2.1. Обоснование выбора медиаторной системы
3.2.2.0птимизация условий определения АОА.
3.2.3. Исследование взаимодействия медиаторной системы с природными водорастворимыми антиоксидантами.
3.2.4. Исследование взаимодействия медиаторной системы с водорастворимыми синтетическими антиоксидантами
3.2.5. Исследование взаимодействия медиаторной системы с жирорастворимыми антиоксидантами.
Глава 4. КОРРЕЛЯЦИОННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
4.1. Определение корреляции АОА и общего содержания фенольных соединений в вине
4.2. Определение АОА потенциометрическим методом и методом перекисного окисления липидов
4.3. Хемилюминесцентные и потенциометрические исследования АОА лекарственных настоев и бальзамов
4.4. Противорадикальная и антиоксидантная активность водных и водноэтанольных экстрактов лекарственных трав.
Глава 5. ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИОКСИДАНТНО АКТИВНОСТИ ОБЪЕКТОВ СО СЛОЖНОЙ МАТРИЦЕЙ.
5.1. Метод введенонайдено
5.2. Исследование антиоксидантной активности некоторых продуктов
питания.
5.2.1. Антиоксидантная активность соков фруктов и овощей.
5.2.2. Исследование антиоксидантной активности чая.
5.2.3. Антиоксидантная активность алкогольсодержащих напитков
5.3. Определение метрологических характеристик потенциометрического измерения антиоксидантной активности продуктов питания
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ.
ЛИТЕРАТУРА


Установлены пределы определения АОА в водном растворе и мицеллярном растворе атокоферолвода. Определена АОА ряда продуктов питания. Установлены количественные метрологические характеристики измерения АОА продуктов питания. Обсуждается возможность использования этого параметра как одного из показателей качества продуктов питания. Обоснование применения нового потенциометрического метода исследования АОА веществ с использованием медиаторной системы. Результаты исследования взаимодействия природных и синтетических АО с медиаторной системой КзРеС1Мб К4НеСЫ6. Результаты корреляционных исследований антиоксидантных свойств предложенным методом и методами фотохемилюминесценции, фотоколориметрии с использованием стабильного радикала 2,2дифенил1пикрилгидразила и методом определения сверхслабого свечения продуктов перекисного окисления липосом, а также корреляции АОА и общего содержания фенолов в вине. Результаты исследования АОА объектов со сложной переменной матрицей продуктов питания растительного происхождения, препаратов лекарственного сырья. Апробация работы. Основные результаты работы доложены на VI Всероссийской конференции по электрохимическим методам анализа с международным участием ЭМА, г. Уфа, на научнопрактическом семинаре Методы оценки антиоксидантной активности биологически активных веществ лечебного и профилактического назначения, Институт биохимической физики им. Н.М. Эммануэля РАН, г. Высокоэффективные пищевые технологии, методы и средства для их реализации, г. Москва, на II Международной конференции Современное приборное обеспечение и методы анализа почв, кормов, растений и сельскохозяйственного сырья, г. Москва, на Всероссийской научной конференции с международным участием Электроаналитика, г. Екатеринбург, на 8м Международном семинарепрезентации инновационных научнотехнических проектов Биотехнология, г. Пущино, . Глава 1. Нг пероксид водорода, О гидроксильный радикал, ОС1, ЯОг и др. Многие из них имеют неспаренный электрон и являются свободными радикалами. Избыток именно этих соединений считают ответственным за развитие окислительного стресса. Применительно к биологическим системам понятия свободные радикалы и активные реактивные формы кислорода не всегда совпадают. Неспаренный электрон может быть локализован на атомах углерода, серы, азота. С другой стороны, многие содержащие кислород молекулы, такие, как пероксид водорода, синглетный кислород, гипогаллоиды, не будучи радикалами, взаимодействуют с органическими молекулами через радикальные механизмы. Для обозначения таких химических соединений используют понятие активированные кислородные метаболиты АКМ, под которыми подразумевают широкий класс кислородсодержащих соединений радикальной и нерадикальной природы 1. Рис. Таким образом, АКМ это высокореакционноспособные кислородсодержащие соединения, образующиеся в живых организмах в результате неполного восстановления молекулярного кислорода. Генерация АКМ это характерный физиологический процесс, возникший в результате эволюционного отбора вместе с изменением содержания молекулярного кислорода. Увеличение содержания кислорода в атмосфере привело к появлению организмов, у которых в основе обеспечения энергией лежит процесс восстановления кислорода до воды в результате окислительного фосфорилирования. Этот процесс сопровождается постоянным образованием АКМ, которое может происходить разными путями. В живых организмах в процессе эволюции выработались специализированные ферментативные системы восстановления молекулярного кислорода посредством переноса электронов, названные оксидазами. Все ферменты, восстанавливающие молекулярный кислород, представляют собой металлопротеины с активным центром, включающим один или несколько ионов металла переменной валентности Ре, Си, Мо, Со. Входящие в активный центр ионы служат донорами электронов для кислорода. В результате активации образуются ионы кислорода, которые включаются в реакции окисления. В таблице 1 кратко представлены основные типы металлопротеинов, обладающие оксигеназной активностью и способные восстанавливать молекулярный кислород 2, 3.