Разработка метода инверсионно-вольтамперометрического титрования для определения тиольных, дисульфидных групп и сульфидной серы в природных водах и биожидкостях

• Автор: Скиба, Татьяна Васильевна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 150 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОЬЗОР

1.1. Тиоловые соединения в механизме антиоксидантной защиты организма ог окислительного стресса. Тиолдисульфидное соотношение.

1.2. Методы исследования тиолдисульфидной системы и отдельных ее составляющих.

1.2 Л. Спектроскопические методы.

1.2.2. Хроматографические методы.

1.2.3. Электрохимические методы

1.2.4. Прочие методы.

1.2.5. Заключение

1.3. Сероводород и неорганические сульфиды токсиканты экосистем или биологически активые компоненты.

1.4. Методы исследования сульфидионов в природных водных и биообъектах

1.4.1. Классические методы методы визуальной титриметрии.
1.4.2. Спектроскопические методы.
1.4.3. Хроматографические методы.
1.4.4. Электрохимические методы
1.4.5. Прочие методы.
1.4.6. Заключение
Г ЛАВА 2. ИНВЕРСЛ ЮППОВОЛЬТАМПЕРОМЕТРИЧЕСКОЕ ТИТРОВАНИЕ
2.1. Предпосылки к созданию метода инверсионновольтамперометрического титрования ИВТ.
2.2. Инверсионновольтамперометричсское титрование по трем точкам ИВТ3.
2.3. Инверсионновольтамперометрическое титрование но двум точкам ИВТ2
2.4. Заключение
ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
3.1. Аппаратура
3.2. Реактивы
3.3. Приготовление модельных образцов
3.4. Приготовление проб крови и се фракций
3.5. Приготовление проб воды
3.6. Приготовление проб слюны.
ГЛАВА 4. ИНВЕРСИОННОВОЛЬТАМПЕРОМЕТРИЧЕСКОЕ ТИТРОВАНИЕ ОРГАНИЧЕСКИХ ТИОЛОВ И ДИСУЛЬФИДОВ.
4.1. Выбор сигналообразующего реагента
4.2. Инверсиониовольтамперометрическое титрование органических тиолов и дисульфидов до точки эквивалентности
4.2.1. Исследование модельных образцов
4.2.2. Анализ цельной крови и ее фракций
4.3. Ипвсрсиоиновольтамперометрическос титрование тиолов и дисульфидов по трем и двум точкам
4.3.1. Исследование модельных растворов.
4.3.2. Исследование цельной крови и се фракций
4.4. Заключение.
ГЛАВА 5. ИВЕРСЖЛ1НОВОЛЫ АМПНРОМЕТРИЧЕСКОЕ ТИТРОВАНИЕ НЕОРГАНИЧЕСКИХ СУЛЬФИДОВ.
5.1. Инверсионновольтамперомстрический сигнал серебра на стеклоуглеродном рабочем электроде
5.2. Исследование модельных растворов
5.3. Анализ воды.
5.4. Анализ слюны
5.5. Заключение
ГЛАВА 6. СТАНДАРТИЗАЦИЯ ОБРАЗЦОВ СРАВНЕНИЯ НЕУСТОЙЧИВЫХ ВО ВРЕМЕНИ ВЕЩЕСТВ
6.1. Стандартизация образцов сравнения I1 и 2.
6.1.1. Стандартизация образцов сравнения 2 методом
вольтам перометрического титрования по двум точкам.
6.1.2. Стандартизация образцов сравнения 2 и методом инвсрсионновольтампсрометрического титрования по двум точкам
6.2. Стандартизация образцов сравнения хлороводородной кислоты и йодида калия
6.3. Стандартизация образцов сравнения азотнокислого серебра.
6.4. Заключение
СГ1ИСОК IЩТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
БЛАГОДАРНОСТИ.
СОКРАЩЕНИЯ
ДОС система антиоксидантной защиты
ТДС тиолдисульфидный статус, тиолдисульфидное соотношение МВТ инверсиоиновольтамперометрическое титрование
ИВТ1 инверсионновольтамперометрическое титрование до точки эквивалентности ИВТ2 инверсионновольтамперомстрическое титрование по двум точкам И ВТ3 инвсрсионновольтамперометрическое титрование по трем точкам КИВТ комбинированное инверсионновояьтамперометрическое титрование СРО свободнорадикальное окисление
ДТНБ 5,5дитиобис2нитробензоЙная кислота реактив Эллмана
Н глутатион восстановленный глутатион окисленный С8П цистеин СС цистин СуБ гомоцистеин АС8Н ацетил цистеин
ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматорафия
ГХ газовая хроматография
КЭ капиллярный электрофорез
КИВА катодная инверсионная вольтамперометрия
ХМЭ химически модифицированный электрод
ПИА поточноинжекционный анализ
ПО предел обнаружения
ТРАФ т етрартутьацетатфл уоресце и н
ИСЭ ионселективный электрод
АИСЭ сульфидсеребряный электрод
АС аналитический сигнал
РПЭ ртутный пленочный электрод
ОС стеклоуглеродный электрод
ТМГЭ толстопленочпый модифицированный графитовый электрод ЭДТА этилендиаминтетрауксусная кислота и предельный диффузионный ток
1П вольтамперометрический инверсионный максимум тока
ИВА инверсионная вольтам перо метрня
АТ амперометрическое титрование
В А вольтамперометрия
Б, потенциал электролиза
I, время электролиза
и скорость развертки потенциала
Ет потенциал пика
ДЦВ дважды дистиллированная вода
ТФМК трнфенилметановый краситель
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Основные результаты работы доложены на шести конференциях IV Международной научной конференции Химия, химическая технология и биотехнология на рубеже тысячелетий Томск, XV Международной научной студенческой конференции Студент и научнотехнический прогресс Новосибирск, VIII Всероссийской научнопрактической конференции студентов и аспирантов Химия и химическая технология в XXI пеке Томск, VII Всероссийской конференции по электрохимическим методам анализа с международным участием ЭМА УфаАбзаково, VIII научной конференции Аналитика Сибири и Дальнего Востока Томск, Съезде аналитиков России Аналитическая химия новые методы и возможности МоскваКлязьма, IX научной конференции Аналитика Сибири и Дальнего Востока Красноярск, . Публикации. По материалам диссертации опубликовано работ 3 статьи в рецензируемых международных и отечественных научных журналах и 7 тезисов докладов. Работа является частью исследований, проводимых в аналитической лаборатории Института неорганической химии СО РАН в рамках решения задач, обозначенных в проекте МНТЦ i vi i i i, а также в интеграционном проекте 6 СО РАН Молекулярные механизмы функционирования защитнорепарационных систем человека разработка дифференциальных комплексных методов диагностики и терапии заболеваний с аутоиммунными, онкологическими патологиями. Объем и структура работы. Работа состоит из введения, шести глав, выводов, списка цитируемой литературы из 8 наименований. Содержит 0 страниц текста, рисунка и таблицы. ГЛАВА 1. Тиоловые соединения в механизме антиоксидантной зашиты организма от окислительного стресса. Тиолдисульфидное соотношение. Возникновение свободных радикалов в клетках и тканях и свободнорадикалъное окисление СРО при их низкой интенсивности результаты протекания нормальных метаболических процессов в организме. Усиленное образование свободных радикалов сигнализирует об экстремальных, патогенных воздействиях на живой организм. Длительная активация и интенсификация СРО способсгвуют развитию окислительного стресса 1, следствием которого являются процессы старения организма, а также развитие патологий различного генеза, таких как ишемическая болезнь сердца, атеросклероз, катаракта, онкологические заболевания, вирус иммунодефицита человека, ряд наследственных аутосомиорсцессивных болезней и другие 2, 3. Естественную защиту организма от вредного воздействия окислительного стресса осуществляет сложная многокомпонентная антиоксидантная система АОС. Она обеспечивает связывание и модификацию радикалов, превращая их. АОС состоит из ферментативного звена ряда ферментов, в том числе антиоксидантных и антиперекисных супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионпероксидаза, глутатионредуктаза и др. А, С, Е, К, биофлаваноиды и др. Общая смма биоантиокислителей органов и тканей организма формирует буферную противоокислительную систему, обладающую определенной емкостью, а соотношение прооксидантных и антиоксидантных систем определяет так называемый антиоксидантный статус организма. По мнению В. АОС, которая тем выше, чем больше смещено влево окислительновосстановительное равновесие в системе 1. Поэтому антиоксидантный статус организма или сопротивляемость живых организмов действию повреждающих агентов было предложено оценивать по величине количественного соотношения между восстановленными и окисленными формами тиоловых антиоксидантов в крови 1 тиолдисульфидному соотношению ТДС и использовать его в качестве показателя состояния неспецифической резистентности организма 1,4. Исследования показали 5, что в период истощения адаптационного резерва, т. ТДС. В период же активации системы адаптации, количество групп уменьшается, а количество БНгрупи увеличивается т. ТДС. Поэтому альтернатива здоровье или болезнь, адаптация или дезадаптация зависит от сохранения или нарушения оптимального ТДС в организме. В таблице 1 представлены значения ТДС в крови человека в норме и при изменениях состояния адаптационной системы организма. Таким образом, ТДС отражает степень повреждающего воздействия окислительного стресса на организм в результате внешнего контакта с патогенным фактором.