Капиллярное электрофоретическое разделение энантиомеров при использовании олиго- и полисахаридных хиральных селекторов

• Автор: Буданова, Наталья Юрьевна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 161 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. Теория хирального капиллярного электрофореза

1.1. Принципы разделения энантиомеров методом капиллярного 9 электрофореза

1.1.1. Основные определения

1.1.2. Природа энантиоселективности в капиллярном электрофорезе

1.1.3. Факторы, влияющие на энантиоселекгивность

1.1.4. Некоторые особенности использования заряженных хиральных селекторов

1.2. Хиральные селекторы

1.2.1. Циклодскстрины и их производные

1.2.1.1. Тип хирального селектора

1.2.1.2. Органические модификаторы фонового электролита
1.2.1.3. Неводный хиральный капиллярный электрофорез
1.2.1.4. Мицеллярная электрокинетическая хроматография
1.2.2. Полисахаридные хиральные селекторы
1.2.2.1. Нейтральные моно, олиго и полисахариды
1.2.2.2. Ионные полисахариды ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 2. Исходные вещества, аппаратура, техника эксперимента
2.1. Исходные реактивы и растворы
2.2. Хиральные селекторы
2.3. Аппаратура
2.4. Техника эксперимента Некоторые общие замечания по методологии исследования энантиораспознавательной способности новых хиральных селекторов
Глава 3. Влияние хитозана на разделение энантиомеров кислот
3.1. Изучение энантиораспознавательной способности хитозана
3.1.1. Влияние фонового электролита на подвижность энантиомеров
3.1.2. Влияние концентрации хитозана на разделение исследуемых соединений и их энантиомеров
3.1.3. Некоторые возможности применения капилляра, модифицированного хитозаном
Глава 4. Разделение энантиомеров при использовании анионных полисахаридных хиральных селекторов
4.1. Исследование энантиораспознавательной способности нового хирального селектора Л3сульфо3карбоксипропиоиилхитозаиа
4.1.1. Влияние и структуры соединений на энантиораспознавательную способность АЦЗсульфоЗ
карбоксипропионилхитозана
4.1.2. Влияние состава ФЭ на энантиоразделение при использовании Л3сульфо3карбоксинропионилхитозана
4.1.3. Влияние концентрации ЛЗсульфоЗ
карбоксипропионилхитозана на времена миграции и энантиоразделение веществ
4.1.4. Влияние метанола на энантиоразделение при использовании Л3сульфо3карбоксипропионилхитозана
4.1.5. Влияние температуры и напряжения на энантиоразделение при использовании высокомолекулярного ДГ3сульфо3карбоксипропионилхитозана
4.1.6. Влияние молекулярной массы М3сульфо3 5 карбоксипропионилхитозаиов на энантиоразделение
4.1.7. Определение содержания и энантиомерного состава 9 флуоксетина и пиндолола в фармацевтических препаратах
4.2. Использование сульфатов хитозана и декстран сульфата в качестве 2 хиральных селекторов
Глава 5. Исследование энантиораспознавательной способности гептакис6
амино6дезоксиРциклодекстрина для разделения энантиомеров кислот и производных аминокислот
5.1. Разделение энантиомеров кислот при использовании гептакисв
амино6дезоксирциклодекстрина
5.2. Разделение энантиомеров производных аминокислот
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


В электрофоретических разделениях энантиомеров энантиоселективность имеет термодинамическую природу хиральный селектор образует с энантиомерами лабильные диаегерсомерные аддукты различной устойчивости, называемые далее комплексами энантиомер хиральный селектор. Устойчивость комплексов характеризуется константами связывания энантиомеров с хиральным селектором. Модель разделения энантиомеров в КЭ была предложена в году 2. К константа связывания. Оптимальная концентрация хирального селектора выражается только через константы связывания
В интервале рНрКа2 описанная выше модель может усложниться, поскольку хиральное разделение может быть обусловлено не только разными константами связывания с хиральным селектором, но и разной подвижностью комплексов энантиомерхиральный селектор. Определение констант связывания и подвижностей комплексов энантиомерхиральный селекгор методом КЭ основано на использовании уравнения 8. Для вычисления констант применяется метод нелинейной регрессии, при этом неизвестными коэффициентами являются константа связывания и подвижность комплекса 3, или, реже, линеаризация уравнения 8 4. Исходными электрофоретическими данными для вычисления констант являются значения подвижностей энантиомеров, полученные при разных концентрациях хирального селектора. Условия правильного определения констант методом КЭ включают в себя несколько важных аспектов. Прежде всего, необходимо корректировать подвижности энантиомеров вследствие нежелательных эффектов, возникающих при увеличении концентрации хирального селекгора. К этим эффекгам можно отнести увеличение вязкости, ионной силы и температуры ФЭ. Например, если значение констант связывания не превышает 0 М1, уменьшение подвижностей энантиомеров при высоких концентрациях хирального селектора будет происходить не изза большего взаимодействия с хиральным селектором, а, главным образом, вследствие увеличения вязкости ФЭ. В работе 5 отмечается, что, пренебрегая изменением вязкости и температуры, можно недооценить константу связывания на . Еще один важный аспект при вычислении констант отсутствие конкурирующих реакций и взаимодействия хирального селектора, энантиомеров и комплексов с поверхностью капилляра. И, возможно, наиболее существенное условие для определения констант методом КЭ состоит в том, что при измерении подвижностей интервал концентраций хирального селектора обязательно должен располагаться около оптимальной концентрации, чтобы правильно описывать комплексообразование энантиомера с хиральным селектором. Оптимальная концентрация, как следует из , обратно пропорциональна среднему геометрическому констант связывания энантиомеров с хиральным селектором. Для сильного взаимодействия, характеризуемого константами связывания порядка 5 М1 типично для аффинных хиральных селекторов оптимальная концентрация хирального селектора, порядка 0. М, может быть в несколько раз ниже, чем концентрация энантиомеров в пробе обычно около 0. М. При варьировании в данных условиях общей концентрации хирального селектора около 0. М очевидно, что равновесная концентрация хирального селектора, используемая в 8 для вычисления констант, неизвестна. Это означает, что концентрация селектора должна существенно превосходить концентрацию энантиомеров. Таким образом, метод может использоваться для определения низких или средних по величине констант связывания. Правильность определения констант можно проверить двумя способами. Кх и К2, должна совпадать с величиной К,
определяющейся только максимумом разности подвижностей энантиомеров, которому соответствует концентрация хирального селектора Сопт. Вовторых, критерием правильности определения констант методом КЭ является независимость значений констант от концентрации хирального селектора 3. Несмотря на то, что во многих работах упоминается, что различие в подвижностях комплексов энантиомерхиральный селектор потенциальный источник энантиоселекгивности в КЭ, его количественной оценке посвящена только одна работа 6. В 6 исследовано хиральное разделение дансиламинокислот при использовании гидроксипропилРЦЦ ГПрЦД.