Электрофоретическое разделение и тест-определение L-α- аминокислот в водных и организованных средах

• Автор: Селифонова, Екатерина Игоревна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 176 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ аАМИНОКИСЛОТ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Высокоэффективная жидкостная хроматография.

1.2. Газожидкостная и газовая хроматография.

1.3. Тонкослойная хроматография.

1.4. Ионообменная хроматография аминокислот.

1.5. Капиллярный электрофорез.

1.6. Спектрофотометрия

1.7. Титриметрические методы

1.8. Оле гетрохимические методы.
1.9. Проточные методы определения ааминокислот.
1 Сенсоры на аминокислоты.
Глава 2. РЕАГЕНТЫ, АППАРАТУРА, ТЕХНИКА ПРОВЕДЕНИЯ
ЭКСПЕРИМЕНТА.
2.1. Исходные вещества и реагенты.
2.2. Аппаратура и методика эксперимента.
Глава 3. ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
И ОПТИМИЗАЦИЯ ПАРАМЕТРОВ ПОЛУЧЕНИЯ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКИХ ТЕСТОВ.
3.1. Особенности бумажных носителей как поддерживающей среды
для проведения зонального электрофореза ааминокислот
3.2. Выбор оптимальных буферных растворов
для электрофоретического разделения ааминокислот на целлюлозной поддерживающей среде
3.3. Выбор оптимальных условий визуализации электрофоретически разделенных ааминокислот
на целлюлозной поддерживающей среде
3.4. Подвижность, параметры эффективности и селективности
электрофоретического разделения ааминокислот
Глава 4. ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ аА МИН ОКИС Л ОТ В КИСЛЫХ СРЕДАХ
4.1. Взаимосвязь электрофоретического поведения ааминокислот
с их протолитическими свойствами.
4.2. Другие факторы, влияющие на электрофоретическое поведение ааминокислот на целлюлозной поддерживающей среде.
4.2.1. Электроосмотический поток.
4.2.2. Ток буфера и сифонный эффект
4.2.3. Адсорбция аминокислот на фильтровальной бумаге
4.2.4. Влияние времени электрофореза
на параметры эффективности выделения аминокислот
4.2.5. Некоторые примеры электрофоретического разделения смесей аминокислот.
4.2.6. Цветометрическая обработка
полученных элсктрофореграмм аминокислот.
Глава 5. ФИЗИКОХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ
СМЕШАННЫХ ВОДНЫХ РАСТВОРОВ аАМИНОКИСЛОТ.
5.1. Система смешанных водных растворов валим лизин
5.2. Система аланин лизин Но О.
5.3. Система валим аргинин Н.
5.4. Система аспаргиновая кислота аргинин Н
Глава 6. ОСОБЕННОСТИ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОГО РАЗДЕЛЕНИЯ
аАМИНОКИСЛОТ В ОРГАНИЗОВАННЫХ СРЕДАХ НА ОСНОВЕ АНИОННЫХ ПАВ.
6.1. Влияние предмицеллярных концентраций ПАВ
на электрофоретическое поведение ааминокислот на целлюлозной поддерживающей среде
6.2. Дифференцирующий эффект организованных сред аПАВ
при разделении ааминокислот методом зонального электрофореза на целлюлозной поддерживающей среде.
6.3. Определение констант связывания и констант распределения катионов ааминокислот с мицеллярными фазами ДДС.
6.4. Изучение влияния мицеллярной псевдофазы додецилсульфата натрия на ионизацию ааминокислот
но аминогруппе
Глава 7. ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ
РАЗРАБОТАННЫХ МЕТОДИК.
7.1. Тесты на присутствие основных и кислых аминокислот
в их смешанных растворах
7.2. Идентификация пролина и триптофана в смешанных растворах
с помощью реактивных индикаторных бумаг РИБ.
7.3. Новые возможности разделение в мицеллярных средах
7.4. Определение основного вещества в препаратах аминокислот .
7.4.1. Определение основного вещества в препарате Глицин
7.4.2. Определение основного вещества
в препарате Метионин
7.4.3. Определение глицина и глутаминовой кислоты
в препарате Элтацин.
ВЫВОДЫ
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


В. Электрофоретическое отделение и цветометрическое определение лизина в смеси ааминокислот Химия под знаком СИГМА исследования, инновации, технологии Тез. Веерос. Омск, мая г. Омск Б. Иванов Д. Н., Пысина М, Селифонова Е. И., Косырева И. Р.К. Спектроскопия диффузного отражения в анализе визуализированных электрофореграмм ааминокислот Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии Межвуз. VII Всерос. Саратов Издво КУБиК, . С. . Селифонова Е. И., Косырева И. В., Пысина М. В., Чернова Р. К. Мицеллярная экстракция анионными ПАВ в электрофоретическом разделении и цветометрическом определении ааминокислотЭкстракция органических соединений ЭОС Каталог докл. IV Междунар. Воронеж, сент. Воронеж Издво ВГТА, . С. 8. Селифонова Е. И., Новиков А. М., Чернова Р. Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии Межвуз. VIII Всерос. Сара. Издво КУБиК. С. . Пысина М. В., Селифонова Е. И., Чернова Р. К. Влияние протолитических свойств Ьааминокислот на их электрофоретическое поведение Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии Межвуз. VIII Всерос. Саратов Издво КУБиК. С. . Джурасва , Селифонова Е. И., Пысина М. В., Жукова Д. В., Чернова Р. Межвуз. VIII Всерос. Саратов Издво КУБиК, . С. . Пысина М. В Селифонова Е. И. Электрофоретическое отделение и денситометрическое определение гистидина в смесях аамипокислот Химия в современном мире Материалы V Всерос. СПб. С. . Чернова Р. К., Селифонова Е. И., Пысина М. Краснодар, . С. 3. Глава 1. Задача быстрого, селективного и чувствительного определения ааминокислот в их разделенных и не разделенных смесях до настоящего времени актуальна, несмотря на достаточно большое количество работ, выполненных в этом направлении и разнообразие применяемых методов анализа. Анализ публикаций по соответствующим методам анализа за последние лет представлены ниже. Проведенное исследование показало, что для определения осам инокислот в настоящее время применяют различные варианты хроматографии, капиллярный электрофорез, спектрофотометрию, титриметрию, электрохимические, сенсорные, проточноинжекционные и тестметоды анализа, относительная частота каждого из методов представлена на рис. Рис. Хроматографические методы. Большинство работ по определению аминокислоз в сложных смесях посвящено различным вариантам хроматографии см. ВЭЖХ, тонкослойную ТСХ, жидкостную ЖХ, газожидкостную ГЖХ, ионообменную ИОХ виды хроматографии. Данный метод получил широкое распространение при определении состава смесей аминокислот до и более в биологических объектах, поскольку . В специальном обзоре 3 обобщено более библиографических ссылок, посвященных пробоподготовке биологических образцов, методам предколоночной дериватизации, в варианте обращеинофазовой ВЭЖХ для определения аминокислот в биологических образцах и валидации этого метода применительно к определению аминокислот. В работах 4, 5 показано, что, несмотря на возможность применения градиентного режима элюирования, все же предпочтительнее для разделения аминокислот изократический режим, поскольку он обеспечивает стабильность базовой линии, параметров удержи ва имя, большую воспроизводимость результатов определения и, как следствие, снижение стоимости серийных анализов. В ВЭЖХ применительно к определению аминокислот описано два подхода предколоночная или послеколоночлая их дериватизация и применение обращенных фаз. В случае электрохимического детектирования для дериватизации аминокислот чаще всего применяют офталевый альдегид нафталин2,3дикарбоксиальдегид 7фтор4нитробензо2окса1,3диазол, производные которых с аминокислотами обладают электрохимической активностью . В единичных работах описан дансил хлорид и 9флуоренилметил хлороформиат. Так, в работе 9 описаны методики определения аминокислот методом ВЭЖХ с обращенными фазами в виде их производных с нилгидрином, Офталевым альдегидом, и хлористым дансилом, причем дана их сравнительная характеристика как дериватизирующих агентов непосредственно в колонке и до ввода в колонку. Отмечены преимущества офталевого альдегида как дериватизирующего агента. Применен флуоресцентный детектор.