Определение карбоновых кислот в фармацевтических препаратах методом ионоэксклюзионной хроматографии

• Автор: Кузьменко, Алексей Николаевич
• Шифр специальности: 02.00.02, 15.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 149 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Основные принципы ионоэксклюзионной хроматографии

1.2. Основные физико химические свойства карбоновых

кислот.

1.3. Факторы, влияющие на удерживание органических кислот

в ионоэксклюзионной хроматографии

1.3.1. Степень ионизации сорбата

1.3.2. Зависимость времени удерживания кислот от их значений рКа

и элюента.
1.3.3. Размер молекул сорбата.
1.3.4. Гидрофобные взаимодействия между сорбентом и подвижной
1.3.5. Ионообменная емкость сорбентов.
1.3.6. Температура
1.4. Сорбенты для ионоэксклюзионной хроматографии.
1.5. Элюенты для ионоэксклюзионной хроматографии
1.6. Детекторы, применяемые в ионоэксклюзионной
хроматографии
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Реактивы и оборудование
2.2. Ионоэксклюзионное определение карбоновых кислот
2.2.1. Выбор сорбента.
2.2.2. Выбор размера колонки
2.2.3. Выбор элюента
2.2.4. Выбор скорости подачи элюснта.
2.3. Гемоконсерванты и инфузионные растворы
2.3.1. Цитратсодержащие гемоконсерванты.
2.3.2. Инфузионный раствор Мафусол.
2.3.3 Инфузионный раствор Рингера ацетат
2.4. Плазмозаменитель Альбумин.
2.5. Препараты на основе ацетилсалициловой кислоты
2.6. Лекарственные растения.
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Результаты исследований докладывались на IX Российском национальном конгрессе Человек и лекарство Москва, , Всероссийском симпозиуме Современные проблемы хроматографии Москва, , X Российском национальном конгрессе Человек и лекарство Москва , Третьем международном симпозиуме 0 Москва , на научных коллоквиумах лаборатории хроматографии кафедры аналитической химии химического факультета МГУ. По материалам диссертации опубликовано 8 работ в виде статей и тезисов докладов. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, шести глав экспериментальной части, выводов, списка цитируемой литературы, приложения. Материал диссертации изложен на 9 страницах текста, содержит рисунок и таблиц, в списке цитируемой литературы 4 наименования. Название ионная эксклюзия говорит само за себя. Подразумевается, что сорбент действует на отрицательно заряженные ионы кислотных остатков так, что они отталкиваются от поверхности сорбента и проходят, не задерживаясь. Это явление получило название Доннановской эксклюзии и известно уже довольно давно. Работы проводились еще в е годы, когда было достигнуто отделение сильных кислот от слабых на колонках, заполненных ионитами. Основы механизма удерживания в ИЭХ описаны в нескольких современных обзорах 13. Считается, что сорбент ведет себя подобно полупроницаемой мембране, помещенной между подвижной и неподвижной жидкими фазами. При этом неподвижный элюент заключен между частицами сорбента. Эта модель проиллюстрирована на рис. Анионы не могут проникнуть в неподвижную фазу, продолжают двигаться с потоком элюента и выходят с мертвым объемом. Недиссоциированные молекулы задерживаются на сорбенте на различное для каждой кислоты время. В результате распределение веществ между внутренней и внешней жидкими фазами описывается
коэффициентом распределения Кл , где Св концентрация частиц в фазе
ионита, а Сб их концентрация во внешнем растворе. Хроматографическое разделение зависит от факторов, влияющих на коэффициент распределения константы диссоциации кислоты, температуры, концентрации раствора, степени сшивки и емкости ионита, элюента 4. Кроме Доннановской эксклюзии, по крайней мере, еще два фактора влияют на механизм удерживания гидрофобные взаимодействия и ситовой эффект. Раствор
Рис. Схема механизма ионной эксклюзии 3. С ростом гидрофобности молекулы удерживание возрастает. Это хорошо видно в ряду простейших алифатических карбоновых кислот от уксусной до, например, капроновой. С ростом молекулярной массы время удерживания увеличивается 5. Гидрофобные взаимодействия также играют весьма важную роль при разделении ароматических кислот. Считается, что эффект адсорбции играет основную роль для разделения гидрофобных кислот, тогда как для гидрофильных кислот, к которым, в основном, относятся кислоты с низкой молекулярной массой, главную роль играет эффект ионной эксклюзии 68. Эта закономерность была проверена с помощью изменения концентрации серной кислоты, которая использовалась как элюент. Для алифатических кислот было отмечено увеличение времени удерживания при возрастании концентрации серной кислоты, в то время как это влияние для ароматических кислот было намного меньше рис. Это означает, что изменение степени ионизации и связанный с этим процесс эксклюзии для ароматических кислот не столь важен. Кроме изменения концентрации кислого элюента, эта зависимость подтверждалась и при добавлении органических модификаторов, таких, как ацетонитрил, в кислый элюент. Такая добавка уменьшает гидрофобные взаимодействия изза увеличения гидрофилыюсти поверхности смолы. Время удерживания ароматических кислот при этом понижается, причем для наиболее гидрофобных кислот оно понижается в наибольшей степени 9. Предлагаются математические модели для анализа факторов удерживания, при этом считается, что есть два основных фактора, влияющих на удерживание электростатический и адсорбционный . Развернутый математический аппарат можно найти в и . Предполагается, что адсорбции подвергаются кислоты и в диссоциированной, и в недиссоциированной форме, хотя для недиссоциированных кислот эта адсорбция намного сильнее. О
к

а. Рис. Влияние концентрации серной кислоты в качестве этоента на удерживание кислот. Скорость потока 0,6 млмин, температура колонки С. Кислоты 1 щавелевая, 2 лимонная, 3 пируваг, 4 янтарная, 5 аконитовая, 6 фумаровая, 7 галловая, 8 протокатеховая, 9 пгидроксибензойная, бензойная, ванилиновая 9.