Рецепция, внутриклеточная сигнализация и гипоксические белки при высотной легочной артериальной гипертензии

• Автор: Алдашев, Алмаз Абдулхаевич
• Шифр специальности: 14.00.06
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Бишкек
• Количество страниц: 287 с. : ил.

национальный центр кардиологии и терапии

КЫРГЫЗСКОЙ РЕСПУБЛИКИ

На правах рукописи

АЛДАШЕВ АЛМАЗ АБДУЛХАЕВИЧ

РЕЦЕПЦИЯ, ВНУТРИКЛЕТОЧНАЯ СИГНАЛИЗАЦИЯ И ГИПОКСИЧЕСКИЕ БЕЖИ ПРИ ВЫСОТНОЙ ЛЕГОЧНОЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ.

14.00.06 - Кардиология 03.00.04 - Биохимия

диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук

Бишкек

ОГЛАВЛЕНИЕ
I. ВВЕДЕНИЕ
II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Молекулярные механизмы гипоксической
вазоконстрикции сосудов легкого
2.1.1. Теория "непрямого эффекта"
2.1.2. О механизме прямой гипоксической
вазоконстрикции сосудов легкого
2.1.3. Роль уровня внутриклеточного кальция в
гипоксической вазоконстикции сосудов легкого
2.1.3. Хроническая гипоксия и ремоделирование
сосудов легких
2.1.4. Влияние гипоксии на регуляцию экспрессии
ряда генов
2.2. Адренорецепторы и гипоксия
2.2.1. Структура адренорецепторов
2.2.2. О-белки и аденилатциклаза
2.2.3. Аденилатциклаза
2.2.4. Механизмы регуляции передачи сигнала
2.2.5. Взаимная регуляция стимулирующих и ингибирующих аденилатциклазу путей
передачи сигнала
2.2.6. Возможная роль адренорецепторов в генезе
В ЛАГ
2.3. Гипоксические стресс-белки
2.3.1. Экспрессия стресс-белков при хронической
гипоксии и активация митогенных путей передачи сигнала в клетке

2.3.2. Механизмы рецептор-опосредованной регуляции пролиферации клеток. РТК-зависимый митогенный путь передачи сигнала
2.3.3. Рецептор тирозинкиназа. Механизмы передачи митогенного сигнала в клетке
2.3.4. Регуляция передачи митогенного сигнала в клетке на уровне РТК
2.3.5. G-белок зависимый митогенный путь передачи сигнала
2.3.6. Активация МАПК-каскада
2.4. Задачи исследования
III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Экспериментальная модель ВЛАГ
3.2. Выделение плазматических мембран из предсердий крупных животных по методу Feldman et el.(1988) с модификациями
3.3. Выделение плазматических мембран из миокарда желудочков сердца
3.4. Выделение плазматических мембран из легких
3.5. Определение плотности рецепторов на мембране методом связывания радиоактивного лиганда
3.6. Исследование активности аденилатциклазы на мембранах клеток
3.7. АДФ-риболизирование Gi -белков Пертуссис токсином (ИТк)
3.8. Выделение общей РЕПС из ткани
3.9. Выделение РБК из клеток в культуре

представляет собой PCNA, р34 - это изоформа ЛДГ, р78 и р94 глюкозозависимые белки (Anderson et al.,1989). Белки с аналогичными молекулярными весами экспрессируются гипоксией в эндотелиальных клетках (Zimmerman et al.,1991). Но в эндотелиальных клетках при гипоксии не экспрессируются глюкозозависимые белки (Zimmerman et al.,1991), индуцируемые в фибробластах (Anderson et al.,1989). В настоящее время предположено, что гипоксический белок ЭК р36 - это глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (Graven et al.,1997). Однако увеличение экспрессии ГАФД было показано этими авторами только на уровне мРНК, а не белка. Большинство исследователей сомневается, что при гипоксии имеет место усиление синтеза ГАФД и его идентичность с р36.
Имеются данные о том, что гипоксия усиливает синтез тропомиозина в ЭК (Rao et al.,1994). Поскольку изоформы тропомиозина имеют молекулярные массы в диапазоне 34-41 кДа, то предполагают, что р34, рЗб, р39 могут быть в том числе и тропомиозинами. Что касается секретируемых белков, то из ЭК высвобождаются факторы роста из эндотелия (ФРСЭ) и тромбоцитов (ТФР) (Shweiki et al.,1992; Vender et al.,1987; Kourembanas et al.,1990), эндотелии (Kourembanas et al.,1991; Hassoun et al.,1992), ингибитор пролиферации ГМК ( Hassoun et al.,1989), тогда как фибробластами - TGF-(31 (Falanga et al.,1991). Культивируемые ГМК в ответ на гипоксию выделяют пептидный фактор, усиливающий синтез эластина клетками адвентиции легочных сосудов (Mecham et al.,1987). Ранее сообщалось, что лимфоциты и ЭК при гипоксии выделяют в среду интерлейкины: IL-1 (Penhatur-Das et al.,1989; Shreeniwas et al.,1992), IL-2 (Zuckerberg et al.,1994), EL-8 (Karakorum et al.,1994), EL-6 (Yan et al.,1997). В ответ на гипоксию кардиомиоциты синтезируют ФРСЭ (Shweiki, 1993), БТ1ЕЕ - HSP70 (Iwaki