Цитологические, генетические и протеомные изменения в крови крупного рогатого скота, инфицированного вирусом лейкоза

• Автор: Трофимов, Олег Владимирович
• Шифр специальности: 06.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Тюмень
• Количество страниц: 148 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Общая характеристика лейкоза крупного рогатого скота
1.2 Распространение заболевания
1.3 Меры борьбы с заболеванием
1.4 Вирус лейкоза крупного рогатого скота
1.4.1 Строение вириона
1.4.2 Структурная и функциональная организация генома
1.4.3 Основные гены и продукты экспрессии генов, их роль в процессе трансформации клетки
1.5 Особенности взаимодействия ВЛКРС с клеткой
1.6 Механизмы передачи инфекции
1.7 Гуморальный и цитотоксический иммунные ответы, сопровождающие В ЛКРС-инфекцию
1.8 Механизмы вирусной индукции канцерогенеза
1.9 Патоморфологические изменения при лейкозе крупного рогатого скота
1.10 Диагностика лейкоза крупного рогатого скота
1.10.1 Гистологические методы диагностики
1.10.2 Серологические методы диагностики
1.10.3 Молекулярно-генетические методы диагностики
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1 Материал исследований
2.2 Гистологический анализ мазков крови
2.3 Электрофоретический анализ белков сыворотки крови
2.4 Рестрикционный анализ ДНК, выделенной из крови
2.5 Методы обработки данных

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Гистологические и цитогенетические изменения в периферической крови животных, инфицированных вирусом лейкоза КРС
3.2 Изменения белкового состава сыворотки крови животных, инфицированных вирусом лейкоза КРС
3.3 Обнаружение провирусной ДНК вируса лейкоза КРС в крови методом рестрикционного анализа
4 ВЫВОДЫ
5 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
6 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
7 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ
Лейкозы - гетерогенная группа злокачественных заболеваний крови. Точные молекулярные механизмы возникновения и развития лейкозов до сих пор не установлены. В злокачественных клетках с высокой частотой выявляются мутантные гены, в норме ответственные за пролиферацию и дифференцировку кроветворных клеток-предшественников (Д. Баскаран и др., 2010). В настоящее время во многих лабораториях мира ведутся работы, направленные на изучение свойств «лейкозных онкогенов» и их вклада в развитие лейкозов у человека и животных.
В настоящее время лейкоз КРС является причиной основных экономических потерь при разведении крупного рогатого скота (М.C. Wu et al., 1989; J. Brenner et al., 1990; R.M. Jacobs et al., 1991; F.L. Pollari et al., 1992; Y. Da et al., 1993; K.G. Trono et al., 2001; D.D. Motton and G.C. Buehring, 2003; S.L. Ott et al., 2003; J.K. Rhodes et al., 2003). Экономический ущерб от лейкоза достигает значительных размеров и складывается из недополучения молока, приплода, ограничений в реализации молока и племенного молодняка, преждевременной выбраковки коров и быков-производителей, утилизации туш, расходов на проведение оздоровительных мероприятий (Г.А. Гаврилова, 2003).
Лейкоз крупного рогатого скота встречается на всех континентах. Болезнь распространена в целом ряде стран Восточной Европы: Болгарии, Хорватии, Эстонии, Латвии, Польше, Румынии, Украине. Высокий уровень заболеваемости отмечается в Северной и Южной Америке (R.M. Jacobs et al., 1995; J.L. D'Angelino et al., 1998; K.G. Trono et al., 2001; J.A. Van Leeuwen et al., 2005; 2006; G. Rama et al., 2011). Напряженная эпидемиологическая ситуация наблюдается также и в некоторых азиатских странах (S. Meas et al., 2000; G.H. Suh et al., 2005; Z. Trainin and J. Brenner, 2005; K. Murakami et al., 2011).
В Российской Федерации лейкоз крупного рогатого скота распространен повсеместно (М.И. Гулюкин и др., 2005). Высокий уровень

ны эндокарда и на перикарде встречаются опухоли различной величины и формы. Иногда опухолями заполнена вся полость предсердий. На гистологических препаратах в начальных стадиях обнаруживаются, клеточные инфильтраты между мышечными волокнами. По мере развития процесса количество их увеличивается. При сильном поражении миокард в значительной мере замещается лейкозными клетками.
Печень при лейкозе также может быть увеличена в объеме, иметь серый или светло-бурый цвет, иногда с желтым оттенком. В ряде случаев в паренхиме печени или на ее поверхности находятся опухолевые образования различной величины и формы. На начальных стадиях лейкозные клетки могут заполнять печеночные капилляры. В гепатоцитах наблюдаются зернистая и жировая дистрофии, на значительных участках они исчезают и замещаются опухолевыми клетками.
В почках у крупного рогатого скота чаще наблюдается опухолевая форма поражения. Под капсулой находятся опухоли белого цвета, дряблой консистенции. Иногда они сливаются друг с другом, образуя конгломераты. При диффузной форме поражения почки увеличены, серого цвета. При незначительном поражении на гистологических препаратах видны скопления лимфоидных клеток вокруг мальпигиевых клубочков, сосудов межуточной ткани почки, под эпителием лоханки. При сильном поражении скопления лейкозных клеток образуют обширные поля, в которых встречаются лишь отдельные структурные элементы почки.
Изменения могут затрагивать и скелетные мышцы. В них обнаруживаются разрастания лейкозных клеток белого цвета, рыхлой или мягкой консистенции, в виде прослоек между отдельными мышечными пучками или группами мышц. В значительных по размерам лейкозных разрастаниях мышечные волокна отсутствуют.
В других органах изменения при лейкозе сходны с описанными (П.А. Кокуричев и др., 1994). Наблюдается диффузное прорастание лейкозных клеток между структурными элементами органа с последующим