Сравнительная оценка методов диагностики и схем лечения при хроническом хеликобактерассоциированном гастрите у детей

• Автор: Борисова, Елена Васильевна
• Шифр специальности: 14.00.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 142 с. : 13 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. Обзор литературы

Глава 2. Пациенты и методы исследования

Глава 3. Сравнительная оценка инвазивных и неинвазивных методов диагностики Н. pylori
Глава 4. Эффективность схем эрадикационной терапии с использованием де-нола и омепразола у детей с хроническим неэрозивным HP-ассоциированным гастритом 4.1 Клинико-эндоскопические и морфологические показатели у детей с хроническим неэрозивным HP-ассоциированным гастритом до лечения 4.2 Клинико-эндоскопические и морфологические показатели у детей с хроническим неэрозивным HP-ассоциированным гастритом через 4-6 недель после лечения 4.3 Клинико-эндоскопические и морфологические показатели у детей с хроническим неэрозивным HP-ассоциированным гастритом через 6 месяцев после лечения
Глава 5. Эффективность схем эрадикационной терапии с использованием де-нола и омепразола у детей с хроническим эрозивным HP-ассоциированным гастритом 5.1 Клинико-эндоскопические и морфологические показатели у детей с хроническим эрозивным HP-ассоциированным гастритом до лечения 5.2 Клинико-эндоскопические и морфологические показатели у детей с хроническим эрозивным HP-ассоциированным гастритом через 4-6 недель после лечения 5.3 Клинико-эндоскопические и морфологические показатели у детей с хроническим эрозивным HP-ассоциированным гастритом через 6 месяцев после лечения

ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ДРФ Схема терапии, включающая де-нол, рокситромицин, фуразолидон
ОРФ Схема терапии, включающая омепразол, рокситромицин, фуразолидон
ИФА иммуноферментный анализ
ПЦР полимеразная цепная реакция
ГЭР гастро-эзофагеальный рефлюкс
ДГР дуодено-гастральный рефлюкс
жкт желудочно-кишечный тракт
УЗИ ультразвуковое исследование
эгдс эзофагогастродуоденоскопия
HP Helicobacter pylori
ЛФГ лимфо-фолликулярная гиперплазия
мэл межэпителиальные лимфоциты
мээ межэпителиальные эозинофилы
со слизистая оболочка
IgA иммуноглобулин А
IgM иммуноглобулин М
IgG иммуноглобулин G
ипп ингибитор протонной прмпы

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы
Хронические воспалительные заболевания желудка и двенадцатиперстной кишки, ассоциированные с Helicobacter pylori (HP), занимают ведущее место в детской гастроэнтерологии.
В настоящее время признано, что HP является главной причиной развития и ведущим фактором патогенеза хронического гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки (3, 9, 15, 37, 60, 94). По данным разных авторов, в детском возрасте с HP-инфекцией ассоциировано 60 - 80% случаев гастрита и 88 - 100% случаев язвенной болезни двенадцатиперстной кишки (19, 58, 95, 247). В России уровень инфицированности детей хеликобактериями находится в пределах 60 - 70% и увеличивается с возрастом (99). Результаты определения распространенности HP-инфекции зависят не только от региона проживания, этнической принадлежности, социо-экономического статуса и возраста обследуемых, но и от используемых способов диагностики хеликобактериоза, которые отличаются друг от друга чувствительностью и специфичностью (39,46, 58, 63, 149, 194,209,230).
Выявление HP основывается на использовании инвазивных и неинвазивных тестов. Поскольку, согласно рекомендациям Европейской группы по изучению Helicobacter pylori (1999), у детей предпочтение следует отдавать неинвазивным способам выявления HP, разработка и внедрение в педиатрическую практику высокочувствительных неинвазивных методов диагностики HP - инфекции являются приоритетными задачами. Одним из новых методов, диагностики HP-инфекции является определение ДІЖ HP в копрофильтратах с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) (50, 102, 197).
Установление четкой взаимосвязи между HP и хроническими заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки явилось основанием для

TGTAAAGCCCCGCATTGCTC-3', биотини-лированный по 5' — концу. Реакцию проводили в 25 мкл реакционной смеси, содержащей 66 мМ Трис НС1 pH 8,8;
16,6 mM (NH4)2S04; 2,5 тМ MgC12; 0,1 мг/мл желатина, 250 мкМ каждого дезоксинуклеотидтрифосфата, по 5 пмоль каждого праймера и 2 ед Taq-полимеразы («Promega») при следующем температурном профиле: денатурация 94° С — 10 с, отжиг/синтез 60° С — 15 с в течение 5 циклов и далее -денатурация 92° С - 1 с и отжиг/синтез 60° С - 10 с, в течение 35 циклов. Реакцию амплификации проводили в ДНК-амплификаторе «Терцик МС2» (ДНК-технология, Москва) (ТУ 9452-001-46482062-98).
Регистрация результатов амплификации. Регистрацию результатов производили методом прямой твердофазной ДНК-гибридизации с флуоресцентными олигонуклеотидными зондами по технологии «ПлаТАн» (НПФ «Литех»). Для этого использовали олигонуклеотидный зонд Heiz 1 специфичный к амплифицированной последовательности фрагмента гена иге С с последовательностью нуклеотидов 5'-«FITC»-GCGAGCTTGGGG-CTGATGTG-3', и содержащий на 5' — конце молекулу флуоресцеина (FITC). Для проведения реакции гибридизации использовали набор реагентов для проведения прямого флуоресцентно-гибридизационного анализа ДНК -«Детект-П» (НПФ «Литех») и микропланшетный флуориметр «Fluoroscan Ascent» (Labsystems, Финляндия). Реакцию осуществляли в соответствии с инструкцией к набору «Детект-П». Процедура гибридизации включала в себя следующие этапы: 1) Перенос амплифицированных образцов в лунки
микропланшета со стрептавидиновым покрытием (входит в состав набора). 2) Инкубация в течение 30 мин. при температуре +37° С. 3) Денатурация в буфере D3 и троекратная отмывка в буфере W4. 4) Добавление олигонуклеотидного зонда в составе гибридизационного буфера Н5 и инкубация в течение 30 мин. при температуре + 60° С. 5) Отмывка в буфере W6, инкубация в течение 20 мин. в буфере К7. 6) Измерение флуоресценции на микропланшетном флуориметре «Fluoroscan Ascent» (Labsystems, Финляндия).