Эффективность трансфузий криоконсервированных при -800С донорских тромбоцитных концентратов у больных гемобластозами

• Автор: Шерстнев, Филипп Сергеевич
• Шифр специальности: 14.01.21
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 89 с. : 12 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК

ИСПОЛЬЗОВАННЫХ

СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I.
ГЛАВА II.
ГЛАВА III.
ГЛАВА IV.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ПРАКТИЧЕСКИЕ

РЕКОМЕНДАЦИИ
ВЫВОДЫ
УКАЗАТЕЛЬ
ЛИТЕРАТУРЫ
Обзор литературы
Материалы и методы исследований
Морфофункциональная сохранность тромбоцитов, криоконсервированных при -80°С по экспоненциальной программе с применением криоконсерванта «Т ромбокриодмац»
Применение тромбоцитных концентратов, криоконсервированных с раствором «Тромбокриодмац» у онкогематологических больных

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ААБК - Американская ассоциация банков крови
АТК - аферезный тромбоцитный концентрат
АЧТВ - активированное частичное тромбопластиновое время
АДФ - аденозиндифосфорная кислота
ВАК - высшая аттестационная комиссия
ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения
ГФ - Государственная Фармакопея
ГЭК - гидроксиэтилкрахмал
ГНЦ РАМН - Г ематологический научный центр Российской Академии
медицинских наук
ГС - геморрагический синдром
ГСК - гемопоэтические стволовые клетки
ДВС - диссеминированное внутрисосудистое свертывание
ДМАЦ - диметилацетамид
ДМСО - диметилсульфоксид
ОДХК - отделение длительного хранения крови
ОМЛ - острый миелобластный лейкоз
ОТП — обогащенная тромбоцитами плазма
ПВП - поливинилпирролидон
ПДФ - продукты деградации фибрина
ПЭО-400 - полиэтиленоксид с молекулярной массой
РГШ - реакция на гипотонический шок
СПК - станция переливания крови
СПТ - скорректированный прирост тромбоцитов
ТК - тромбоцитный концентрат
ФГБУН - федеральное государственное бюджетное учреждение науки
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
В настоящее время для лечения больных гемобластозами используются программы интенсивной полихимиотерапии, трансплантация костного мозга и гемопоэтических стволовых клеток. При этом у пациентов с поражением мегакариоцитарного ростка кроветворения наблюдаются осложнения, связанные с тромбоцитопенией. Основным методом сопроводительной терапии, направленной на профилактику и лечение геморрагического синдрома у таких больных, являются

трансфузии тромбоцитных концентратов (ТК). В клинической практике широко используются нативные ТК, хранившиеся при +22°С в условиях постоянного перемешивания. При этом сохраняются структурные и функциональные свойства кровяных пластинок, однако из-за угрозы бактериальной контаминации и потери жизнеспособности клеток сроки хранения ограничены 3-5 сутками.
При обеспечении пациентов тромбоцитами неизбежно возникают трудности, обусловленные с одной стороны сложностью прогнозирования развития геморрагического синдрома, требующего трансфузий ТК, а с другой стороны - с высокой себестоимостью этого компонента крови. Наличие запасов криоконсервированных ТК позволяет оперативно реагировать на угрозу кровоточивости и своевременно переливать ТК при тромбоцитопенических кровотечениях у больных. Метод криоконсервирования позволяет создать на длительный срок запас донорских тромбоцитов, не тратить время на поиск доноров в экстренных ситуациях, что, в целом, облегчает организацию обеспечения тромбоцитами. В настоящее время изучены возможности криоконсервирования тромбоцитов с хладоограждающим раствором «Тромбокриодмац», в состав которого включён низкомолекулярный криопротектор диметилацетамид (ДМАЦ), не требующий отмывания перед трансфузией [4, 37]. Необходимо отметить, что жидкоазотные (-196°С) режимы криоконсервирования применяются ограниченно, главным образом вследствие трудоемкости и дороговизны. Вместе с тем существует более экономичный и доступный метод низкотемпературного консервирования ТК при -80°С в электрических морозильниках, который позволяет сократить затраты, связанные с использованием жидкого азота, упрощает процедуру замораживания тромбоцитов посредством применения одноразовых полимерных контейнеров, что исключает работу в стерильном боксе, сокращает временные затраты персонала [32, 51]. Способ криоконсервирования при -80°С, разработанный в эксперименте для малых объемов тромбоцитов, позволяет сохранять клетки, обладающие удовлетворительными морфофункциональными свойствами, после отогревания. Возможность криоконсервирования терапевтических доз ТК при -80°С для клинического применения до настоящего времени не определена. Эффективность

89,7% тромбоцитов, полученных с помощью фракционаторов клеток крови (рис. 4), в ТК, полученных методом дискретного афереза, сохранялось не менее 83% функционально активных клеток.
нативные с протектором И размороженные
Рисунок 4 - Динамика количества тромбоцитов на этапах «заготовка -смешивание с протектором - размораживание», х10п
Уровень pH во всех случаях соответствовал требованиям Технического регламента и не уменьшался ниже 7,0.
Внешнее воздействие, которое оказывается на тромбоциты при их получении, смешивании с криопротектором, замораживании и оттаивании, неизбежно приводит к изменению их функциональных свойств. Вследствие этого при оценке таких функций как агрегация и адгезия обычно в качестве исходного показателя используют результат измерения свойств нативных клеток [12, 136]. С учетом того, что процедура тромбоцитафереза, при которой кровь соприкасается с чужеродной поверхностью, приводит к концентрированию клеток, как следствие возникает обратимая активация тромбоцитов. Поэтому наряду с результатами, соответствующими норме для цельной венозной крови, наблюдали снижение агрегационной активности клеток с адреналином и АДФ (рис. 5).