Комплексные физиологически активных веществ с ионами меди активных центров церулоплазмина

• Автор: Волков, Александр Александрович
• Шифр специальности: 15.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 0 с. : 145 ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ЦП - церулоплазмин ДКВ - дигидрокверцетин ДР - доксорубицин Ст - стирол

ЫВПД - Ы-винилпирролидон

Ст-ЫВПД - (со)полимер стирола с Ы-винилпирролидоном Ст-4ВП - (со)полимер стирола с 4-винилпиридином НЬ - гемоглобин

СпА ЦП - специфическая активность церулоплазмина ПАК - полиамидокислота

Си-ПАК, Са-ПАК - модифицированные полиамидокислоты

СОДЕРЖАНИЕ

Введение

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Свойства церулоплазмина

1.1.1. Фармакологические свойства церулоплазмина
1.1.2. Структура молекулы церулоплазмина
и его основные биохимические свойства
1.1.3. Физиологическая роль церулоплазмина
в организме
1.1.4. Регуляция обмена меди в организме
1.1.5. Антиоксидантные свойства церулоплазмина
1.2. Способы выделения церулоплазмина
1.3. Термодинамические и кинетические особенности взаимодействия белковых макромолекул
с лигандами
ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Получение и свойства церулоплазмина
2.1.1. Количественное определение белка в препарате Церулоплазмин
2.1.2. Определение степени очистки
2.1.3. Электрофорез на плёнках из ацетата целлюлозы
2.1.4. Иммуноэлектрофорез по методу вгабаг (СгаЬаг,УИПагп8, 1953)[97]
2.1.5. Гель-проникающая хроматография низкого давления
2.1.6. Определение ферментативной активности

2.1.7. Количественное определение содержания ЦП
2.2. Физиологически активные вещества
2.2.1. Доксорубицин
2.2.2. Дигидрокверцетин
2.2.3. Лецитин
2.3. Очистка растворителей
2.4. Спектрофотометрические измерения
2.5. Исследования методом ЭПР
2.6. Измерения pH растворов
2.7. Измерение поверхностного натяжения
2.8. Исследования на модельных системах
2.8.1. Модифицированная поверхность полипиромеллитимида
2.8.2. Изучение адсорбции
2.8.3. Модельные системы на основе монослоев Ленгмюра
2.8.4. Получение дисперсии везикул
2.9. Измерение краевого угла смачивания
2.10. Атомно-силовая микроскопия
ГЛАВА 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
3.1. Комплексообразование ДР с ионами меди каталитического центра ЦП
3.1.1. Характеристика реакционной смеси ДР и
ЦП в воде
3.1.2. Изучение свойств комплексов Си2 ДР
на моделях биомембран
3.2. Ассоциация полифенольного флавоноида - ДКВ с ЦП
3.2.1. Обоснование выбора дигидрокверцетина
как протекторного лиганда

Конкурентным называют ингибитор, обратимо
взаимодействующий с активным центром фермента. Как правило, конкурентные ингибиторы по структуре похожи на субстрат и могут вытесняться из фермент-ингибиторного комплекса избытком субстрата. Взаимодействие с конкурентным ингибитором не приводит к денатурации или инактивации фермента, поэтому при замене ингибитора на субстрат скорость ферментативной реакции не снижается (рис. 1.6.) (Комов В.Н.. 2004)[95].

Рис. 1.6. Схема действия конкурентного ингибитора
При взаимодействии фермента с конкурентным ингибитором изменяется значение Км соответствующей ферментативной реакции.
Сходство субстрата и конкурентного ингибитора достаточно для взаимодействия и образования фермент-ингибиторного комплекса, но недостаточно для ферментативной реакции. В качестве примера можно привести действие малоновой кислоты на реакцию, которая катализируется сукцинатдегидрогеназой и связана с превращением янтарной кислоты в фумаровую.
Добавление малоновой кислоты к реакционной смеси снижает или полностью останавливает ферментативную реакцию, так как она является конкурентным ингибитором сукцинатдегидрогеназы.
Сходства малоновой кислоты с янтарной достаточно для образования комплекса с ферментом, однако распад этого комплекса не происходит. При увеличении концентрации янтарной кислоты она